重亞硫酸鹽測(cè)序技術(shù)介紹(文件)
【正文】 DNA樣品特定基 因位點(diǎn)的甲基化狀態(tài)，但由于涉及 PCR和限制性酶 的使用，通常只能分析一個(gè)特定的序列 SSCP ?將亞硫酸氫鹽處理和單鏈構(gòu) 象多態(tài)性PCR(PCR． SSCP)結(jié)合起來(lái)，設(shè)計(jì)了針對(duì) 轉(zhuǎn)化后 DNA序列的引物，同時(shí)擴(kuò)增未甲基化和甲 基化的 DNA，由此產(chǎn)生的兩種不同的擴(kuò)增產(chǎn)物可以 通過(guò) SSCP區(qū)分。 ? 研究證明啟動(dòng)子區(qū)的高甲基化導(dǎo)致抑癌基因失活是人類腫瘤所具有的共同特征之一，而且這種高甲基化是導(dǎo)致抑癌基因失活的又一個(gè)機(jī)制。 重亞硫酸直接測(cè)序法對(duì)啟動(dòng)子測(cè)序的應(yīng)用 ? CpG島不僅是基因的一種標(biāo)志，而且還參與基因表達(dá)的調(diào)控和影響染色質(zhì)的結(jié)構(gòu) 。故此， DNA經(jīng)亞硫酸氫鈉處理后，進(jìn)行限制性酶切 CpG位點(diǎn)時(shí)，限制性位點(diǎn)的保留與否能反應(yīng)該 DNA片段是否發(fā)生甲基化。該 DNA片段若存在甲基化，將會(huì)有擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)；若 無(wú)甲基化，則不會(huì)有任何片段擴(kuò)增
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