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重亞硫酸鹽測序技術(shù)介紹-免費閱讀

2024-09-10 00:12 上一頁面

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【正文】 此方法可方便地應(yīng)用于任何序列的甲基化狀態(tài)的分析,能對甲基化的等位基因進(jìn)行半定量,獲得甲基化和未甲基化等位基因的比例;并且可以提示甲基化狀態(tài)的不均勻性。 酶切法同亞硫酸氫鹽聯(lián)合法 ? 酶切法:限制性酶切后選用對特 異 DNA片段甲基化序列敏感的限制性內(nèi)切酶 (酶 切位點與甲基化位點不重疊 )進(jìn)行酶切后,以待測 甲基化位點外側(cè)序列為擴(kuò)增起始點進(jìn)行 PCR。故 CpG在基因組中是以島的形式分布的。 DNA的甲基化可引起基因的失活。序列。 CpG島與 56%的基因編碼有關(guān)。 重亞硫酸氫鹽直接測序技術(shù)的優(yōu)缺點 ? 優(yōu)點:測序法以 CpG島兩側(cè)不含 CpG點的一段序列為引物配對區(qū),能夠同時擴(kuò)增出甲基化和非甲基化靶序列。故此, DNA經(jīng)亞硫酸氫鈉處理后,進(jìn)行限制性酶切 CpG位點時,限制性位點的保留與否能反應(yīng)該 DNA片段是否發(fā)生甲基化。 ? 研究證明啟動子區(qū)的高甲基化導(dǎo)致抑癌基因失活是人類
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