【正文】 50123250756雜質(zhì)Ⅲ154679154344153319153644154283154054雜質(zhì)Ⅳ222815222039224030223597222471222990雜質(zhì)Ⅴ194349190641188570185235180721187903雜質(zhì)Ⅵ244802246539250233246858237531245193結論：供試品溶液、對照溶液、雜質(zhì)對照品溶液12h內(nèi)穩(wěn)定性良好。同法配制3份。精密量取供試品溶液1ml，置200ml量瓶中，加流動相A稀釋制成至刻度，搖勻，作為對照溶液。線性～，相關系數(shù)R2=1準確度%～%范圍內(nèi)，準確度良好，RSD=%精密度重復性試驗：測得吡啶3磺酸含量RSD=%。（～12，制劑的質(zhì)量控制一第167~178頁） 富馬酸沃諾拉贊片吡啶3磺酸檢查破壞試驗結果名稱吡啶3磺酸總峰面積主峰面積/%物料平衡/%分離度峰純度未 破 壞/合格63379100/高溫破壞合格62286光照破壞合格71121酸 破 壞合格69644堿 破 壞合格73152氧化破壞合格62279計算公式：物料平衡%=（破壞后總峰面積/濃度）/（破壞前總峰面積/濃度）結論：溶劑不干擾本品的測定，各破壞條件下主峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度符合要求，主峰未檢出不純物，樣品破壞前后物料守恒，故該方法測定本品有關物質(zhì)的專屬性良好。線性關系試驗 同原料藥。重復測定6次，考察精密度。供試品溶液：取本品細粉適量（相當于富馬酸沃諾拉贊25mg），精密稱定，置50ml量瓶中，加流動相A使沃諾拉贊溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；按外標法計算粉末中吡啶3磺酸的百分含量。（～66，制劑的質(zhì)量控制一第221~232頁）按外標法以峰面積計算供試品溶液中吡啶3磺酸的量。選擇230nm作為檢測波長專屬性同有關物質(zhì)測定項下溶液穩(wěn)定性對照品溶液及供試品溶液室溫放置10小時內(nèi)穩(wěn)定性良好線性和范圍～，回歸系數(shù)R2=定量限同原料藥準確度%～%之間，%精密度%，%耐用性采用不同色譜柱、不同流速和改變流動相比例、鹽濃度及pH值測定結果一致性良好，%，% 含量測定方法學驗證內(nèi)容色譜條件 參照原料藥含量的色譜條件，并對本法的含量測定進行方法學研究。精密度試驗 對照品溶液：取富馬酸沃諾拉贊工作對照品適量（約含沃諾拉贊10mg），精密稱定，置100ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml置50ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。在室溫下放置10小時，分別于0、10小時分別精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，考察溶液穩(wěn)定性。轉速的選擇溶出的轉速選擇50轉/min。轉速為每分鐘50轉，經(jīng)30分鐘時，照高效液相色譜法測定。以濃度（C）為橫坐標，以峰面積（A）為縱坐標，進行線性回歸，計算線性相關系數(shù)。精密量取上述溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。、8。 富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：20mg）不同溶劑溶出度試驗結果表溶出介質(zhì)取樣點溶出度%20150304批20150305批20150306批市售2min3min5min10min30min水2min3min5min10min30min2min3min5min10min30min2min3min5min10min30min從四種溶出介質(zhì)中的累積溶出曲線看，并根據(jù)四個點（10min）的累積溶出數(shù)據(jù)計算f2相似因子均大于50，因此我公司研制的富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：20mg）與上市制劑（規(guī)格：20mg）的體外溶出行為基本相似。（~1310，制劑的質(zhì)量控制三第139~274頁、四第9~280頁、五第9~280頁、六第9~280頁、七第9~145頁） 富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：10mg）不同溶劑溶出度試驗結果表溶出介質(zhì)取樣點溶出度%20150301批20150302批20150303批市售2min3min5min10min30min水2min3min5min10min30min2min3min5min10min30min2min3min5min10min30min從四種溶出介質(zhì)中的累積溶出曲線看，并根據(jù)四個點（10min）的累積溶出數(shù)據(jù)計算f2相似因子均大于50，因此我公司研制的富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：10mg）與上市制劑（規(guī)格：10mg）的體外溶出行為基本相似。（~126，制劑的質(zhì)量控制二第255~288頁、三第9~42頁） 卡格列凈片溶出靈敏度試驗批號編號累積溶出度%2min3min5min10min30minXA008123456RSD%XA009（確定處方工藝）123456RSD%不同工藝的RSD%結論：用該法測定不同處方工藝生產(chǎn)的樣品的不同時間點累積溶出度RSD%大，故該法測定本品溶出度靈敏度良好。 富馬酸沃諾拉贊片溶出度檢查回收率試驗結果編號對照品的加入量（mg）對照品中諾拉贊量（mg）沃諾拉贊測得量（mg）回收率%平均回收率%RSD%123456789 結論：%～%，此法準確度良好。 濾膜吸附試驗取專屬性項下本品經(jīng)30min時的溶出液，分別經(jīng)離心取上清液、用濾膜濾過棄去前3～5滴，分別精密量取濾過20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。溶出均一性3批樣品6片不同時間點的溶出度RSD%均小于10，溶出均一性良好溶出曲線考察3批樣品在四種溶出介質(zhì)中的溶出曲線與上市制劑相似（F250），且批間一致性良好。波長的選擇參考含量測定方法。溶液穩(wěn)定性試驗取重復性項下細粉適量，精密稱定，加溶劑溶解稀釋制成每1ml中約含沃諾拉贊10μg的溶液，濾過，作為供試品溶液。取上述兩種溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算回收率。（~86，制劑的質(zhì)量控制一第233~252頁） 富馬酸沃諾拉贊片吡啶3磺酸檢查耐用性試驗結果耐用性研究項目方法及條件耐用范圍吡啶3磺酸保留時間（min）吡啶3磺酸%色譜C18柱月旭島津流速柱溫30℃40℃流動相pH值鹽濃度平均值（%）RSD（%）結論：此方法測定本品有關物質(zhì)耐用性良好。同法配制3份。（~54，制劑的質(zhì)量控制一第216~220頁） 富馬酸沃諾拉贊片吡啶3磺酸檢查溶液穩(wěn)定性試驗結果峰面積/時間0h2h4h6h8h平均值RSD%吡啶3磺酸130066131647130726130817131054130862結論：供試品溶液室溫條件下放置8h內(nèi)穩(wěn)定性良好。分別精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。檢測限試驗 同原料藥。雜質(zhì)對照溶液：取雜質(zhì)Ⅶ工作對照品適量，精密稱定，作為對照品溶液。檢測限。取重復性項下供試品。同法配制3份。分別取雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ工作對照品各適量，精密稱定，作為雜質(zhì)對照品溶液。分別精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。檢測限試驗 同原料藥。梯度表如下：時間（分鐘） 流動相A（%） 流動相B（%）01000231000452080501000601000 溶液配制 供試品溶液：取本品細粉適量（約相當于沃諾拉贊25mg），精密稱定，置50ml量瓶中，加流動相A適量，振搖，使充分溶解，加流動相A稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。檢測限；雜質(zhì)Ⅰ；雜質(zhì)Ⅱ；雜質(zhì)Ⅲ；雜質(zhì)Ⅳ；雜質(zhì)Ⅴ；雜質(zhì)Ⅵ的檢測限為60ng。試藥與試劑：磷酸二氫鉀、三乙胺、甲醇、水。（2）控制菌的檢查法大腸埃希菌：試驗組取1：10供試液10ml，分別加入100ml、200ml的膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，加入10～100cfu/ml試驗菌，3537℃培養(yǎng)1824h；，接種至5mlMUG培養(yǎng)管內(nèi)，培養(yǎng)5h與24h時，置紫外燈366nm處觀察，然后沿培養(yǎng)基管壁加入數(shù)滴靛基質(zhì)試液。 微生物限度：營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基、膽鹽乳糖培養(yǎng)基、MUG培養(yǎng)基、%氯化鈉溶液。試驗條件：十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）； 紫外檢測器（檢測波長為230nm）； 流動相：（）甲醇（52:48）； 溶劑：流動相； 流速：。取對照品溶液、供試品溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖， 計算公式： （Ax為供試品溶液中吡啶3磺酸的峰面積，AS為對照品溶液中吡啶3磺酸的峰面積，Wx為雜質(zhì)Ⅶ工作對照品的稱樣量，Px為雜質(zhì)Ⅶ工作對照品含量，Vx為吡啶3磺酸對照品溶液的稀釋體積，V為供試品溶液的稀釋體積，W為供試品的稱樣量）限度：供試品溶液色譜圖中如顯與對照品溶液相對應的雜質(zhì)峰，%。精密量取供試品溶液、對照溶液與雜質(zhì)對照品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。 檢查 有關物質(zhì) 檢查方法：高效液相色譜法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)儀器與用具：高效液相色譜儀、十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）、電子分析天平、容量瓶、移液管、燒杯，PH計。限度：本品應為薄膜衣片，除去包衣后顯白色或類白色。 梯度如下表：時間（分鐘）流動相A（%）流動相B（%）01000231000452080501000601000 具體試驗操作：取本品細粉適量（約相當于沃諾拉贊25mg），精密稱定，置50ml量瓶中，加流動相A適量，振搖，使充分溶解，加流動相A稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；精密量取適量，作為對照溶液。試液與試藥：磷酸二氫鉀、磷酸、甲醇、水。試驗條件：十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）； 紫外檢測器（檢測波長為230nm）； 流動相：（）甲醇（52:48）； 溶劑：； 流速：。 精密量取供試品溶液和對照品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。（1）細菌、霉菌及酵母菌：供試品配制：按中國藥典（2010年版二部）微生物限度檢查法（附錄XI J）的規(guī)定，稱取供試品10g，加pH ，混勻，靜置10min，取上部澄清液體作為1：10供試液，備用。在紫外光下若管內(nèi)培養(yǎng)物呈現(xiàn)藍白色熒光，為MUG陽性；不呈現(xiàn)熒光，為MUG陰性。計算公式：含量(%)=（A樣為供試品溶液中主峰的面積；A對為對照品溶液中主峰的面積；M對為對照品的稱樣量，mg；M樣為供試品的稱樣量，mg；T對為對照品的含量；V對為對照品溶液的稀釋體積；V樣為供試品溶液的稀釋體積；為平均片重，mg；X為標示量，10或20mg）限度：應為標示量的90%～110%。中間精密度試驗：測得雜質(zhì)Ⅰ含量RSD=%，雜質(zhì)Ⅱ含量RSD=%，雜質(zhì)Ⅲ含量RSD=%，雜質(zhì)Ⅳ含量RSD=%，測得雜質(zhì)Ⅴ含量RSD=%，雜質(zhì)Ⅵ含量RSD=%，其他單雜含量RSD=%，其他總雜含量RSD=%。系統(tǒng)適用性溶液：取富馬酸沃諾拉贊工作對照品及雜質(zhì)工作對照品各適量，作為系統(tǒng)適用性溶液。 富馬酸沃諾拉贊及已知相關雜質(zhì)線性試驗結果名稱濃度范圍（μg/ml）線性方程R2沃諾拉贊～A=雜質(zhì)