【正文】 富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：10mg）四種不同介質中的相似因子批號與上市品f2相似因子水201503016966557520150302796659792015030372726075取本品及上市制劑（20mg），采用不同的溶出介質進行溶出度考察，比較溶出曲線差異，并計算F2因子。 耐用性 為考察沃諾拉贊片溶出度的溶出方法及測定方法的耐用性情況，通過微調溶出過程的因素及測定過程的因素進行試驗，計算微調情況下每片的溶出度。 精密度試驗 取本品（規(guī)格：10mg）1片，照溶出度測定法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅹ C第二法）測定，轉速為每分鐘50轉，依法操作，經30分鐘時，取溶液6份，每份約10ml，濾過，作為供試品溶液，另取富馬酸沃諾拉贊工作對照品約15mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加溶出介質稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加溶出介質稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。（~7，制劑的質量控制二第200~203頁） 富馬酸沃諾拉贊片溶出度檢查濾膜吸附試驗結果序號濾前1濾前2濾后1濾后2平均RSD%峰面積923868916187921843918160 線性關系試驗 稱取富馬酸沃諾拉贊工作對照品約（%）15mg，置100ml量瓶中，加溶出介質溶解并稀釋至刻度，搖勻，依次稀釋制成不同濃度的溶液（→100、1→100、1→50、1→2→21→3→25），作為線性溶液，精密量取上述各線性溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。 溶出方法的選擇參照片劑溶出度測定的一般方法，本品選用漿法操作（中國藥典2010年版附錄Ⅹ C第二法）。輔料干擾試驗輔料、溶劑均不干擾測定。另取富馬酸沃諾拉贊工作對照品適量，加溶劑溶解稀釋制成每1ml中約含沃諾拉贊10μg的溶液，作為對照品溶液。（~22，制劑的質量控制一第253~274頁） 富馬酸沃諾拉贊片含量測定回收率試驗結果編號對照品加入量（mg）對照品中諾拉贊量（mg）沃諾拉贊測得量（mg）回收率%平均回收率%RSD%123456789結論：%～%之間，準確度良好。 含量測定方法學驗證 含量測定方法學驗證總結項目驗證結果波長選擇同原料藥。分別精密量取上述溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，、11。1 準確性試驗雜質對照溶液：取雜質Ⅶ工作對照品適量，精密稱定，作為對照品溶液。按外標法計算雜質Ⅶ的含量。 吡啶3磺酸檢測限試驗結果名稱稀釋步驟檢測限/ng吡啶3磺酸→100ml結論：此法靈敏度較高，可有效檢出富馬酸沃諾拉贊及已知雜質。破壞性試驗 Ⅶ工作對照品破壞試驗溶液的配制與處理：溶液稀釋步驟處理方法溶劑未破壞→20ml100ml無降解處理高溫破壞→20ml100ml水浴100℃加熱6小時高溫空白溶劑適量水浴100℃加熱6小時光照破壞→20ml100ml光照箱4500LX照射40小時光照空白溶劑適量光照箱4500LX照射40小時酸破壞→20ml100ml1mol/L鹽酸2ml，室溫放置28小時酸空白溶劑適量1mol/L鹽酸2ml，室溫放置28小時堿破壞→20ml100ml1mol/L氫氧化鈉溶液1ml，室溫放置26小時堿空白溶劑適量1mol/L氫氧化鈉溶液1ml，室溫放置26小時氧化破壞→20ml100ml30%雙氧水3ml，室溫放置23小時氧化空白溶劑適量30%雙氧水3ml，室溫放置23小時取上述溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。定量限。精密稱定，置20ml量瓶中，加流動相A溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。3）取雜質Ⅰ、Ⅱ，雜質Ⅲ，雜質Ⅳ，雜質Ⅴ，雜質Ⅵ，精密稱定，置200ml量瓶中，加流動相A溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1ml，置20ml量瓶中，精密稱定，置同一20ml量瓶中，按處方比例加入輔料，加流動相A溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為回收率（120%濃度）溶液。將上述各溶液于室溫下放置12小時，分別于0、12小時，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積考察溶液穩(wěn)定性，～9。按外標法計算各已知雜質的含量；未知單雜以自身對照法計算其含量。 富馬酸沃諾拉贊及已知相關雜質檢測限試驗結果名稱雜質Ⅲ雜質Ⅰ沃諾拉贊雜質Ⅱ雜質Ⅳ雜質Ⅴ雜質ⅥC檢測限ng/ml檢測限/ng結論：此法靈敏度較高，可有效檢出富馬酸沃諾拉贊及已知雜質。對照溶液：精密量取供試品溶液適量，作為對照溶液。定量限；雜質Ⅰ；雜質Ⅱ；雜質Ⅲ；雜質Ⅳ；雜質Ⅴ；雜質Ⅵ。色譜條件：流動相：（）甲醇（52:48）流速：：紫外檢測器 波長：230nm 溶劑：流動相 色譜柱：十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm） 具體試驗操作：取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于沃諾拉贊10mg），置100ml量瓶中，加流動相適量，振搖，使充分溶解，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置50ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。陰性菌對照組：取1：10供試液10ml，分別加入100ml、200ml的膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，加入10～100cfu/ml的金黃色葡萄球菌，同試驗組方法進行試驗。：智能生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、電動吸引器 、薄膜過濾器等。 具體試驗操作： 供試品溶液：取本品1片，置100ml量瓶（10mg規(guī)格）或200ml量瓶（20mg規(guī)格）中，加流動相適量，振搖，使充分溶解，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置50ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。 溶出度檢查方法：溶出度測定法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅹ C第二法） 高效液相色譜法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)儀器與用具：溶出儀、溫度計、高效液相色譜儀、電子分析天平、十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）、容量瓶、移液管、燒杯，PH計。 計算公式：已知雜質Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ： （Ax為供試品溶液中已知雜質的峰面積，AS為對照品溶液中已知雜質的峰面積，Wx為已知雜質工作對照品的稱樣量，Px為已知雜質工作對照品含量，Vx為已知雜質對照品溶液的稀釋體積，V為供試品溶液的稀釋體積，W為供試品的稱樣量） （Ai為供試品溶液中其他單個未知雜質的峰面積，At為對照溶液主峰面積） （A總為供試品溶液中所有峰的峰面積和，A主為供試品溶液中沃諾拉贊的峰面積，為供試品溶液中已知雜質的峰面積之和，At為對照溶液中沃諾拉贊的峰面積）限度：供試品溶液色譜圖中如顯雜質峰（溶劑峰及富馬酸峰除外），雜質Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ按外標法以峰面積計算，%；其他單個未知雜質峰面積不得大于對照溶液的主峰面積（%）；其他雜質峰面積的和不得大于對照溶液的主峰面積的4倍（%）。試液與試藥：磷酸二氫鉀、三乙胺、甲醇、水。目錄 制劑的質量控制 3 質量標準 3 分析方法 4 性狀 4 鑒別 4 檢查 4 含量測定 10 分析方法的驗證 11 分析方法學驗證用樣品 11 有關物質方法學驗證 11 吡啶3磺酸方法學驗證 21 含量測定方法學驗證 28 溶出度測定方法學驗證 32 微生物限度檢查方法學驗證 44 批檢驗報告 44 雜質 45 雜質情況分析 45 雜質制定依據(jù) 46 質量標準制定依據(jù) 46 質量標準 46 5060 / 59 制劑的質量控制 質量標準檢驗項目方法放行標準限度貨架期標準限度性狀感觀本品為薄膜衣片，除去包衣后顯白色或類白色本品為薄膜衣片，除去包衣后顯白色或類白色鑒別HPLC法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)供試品溶液中沃諾拉贊峰保留時間應與對照品溶液中沃諾拉贊峰保留時間一致供試品溶液中沃諾拉贊峰保留時間應與對照品溶液中沃諾拉贊峰保留時間一致有關物質HPLC法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)雜質Ⅰ：%、雜質Ⅱ：%、雜質Ⅲ：%、雜質Ⅳ：%、雜質Ⅴ：%、雜質Ⅵ：%、其他單雜：%、其他總雜：%雜質Ⅰ：%、雜質Ⅱ：%、雜質Ⅲ：%、雜質Ⅳ：%、雜質Ⅴ：%、雜質Ⅵ：%、其他單雜：%、其他總雜：%吡啶3磺酸HPLC法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)%%含量均勻度含量均勻度檢查法（中國藥典2010年版二部附錄X E）應符合規(guī)定應符合規(guī)定溶出度溶出度測定法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅹ C第二法）≥90%≥85%微生物限度微生物限度檢查法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅺ J）細菌數(shù)不得過1000cfu/g；霉菌和酵母菌數(shù)不得過100cfu/g；大腸埃希菌不得檢出/g細菌數(shù)不得過1000cfu/g；霉菌和酵母菌數(shù)不得過100cfu/g；大腸埃希菌不得檢出/g含量HPLC法（中國藥典2010年版二部附錄V D)含（C17H16FN3SO2）%~%含（C17H16FN3SO2）%~% 分析方法 性狀 檢查方法：感觀具體試驗操作：取本品，觀察其外觀性狀。試驗條件：十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）； 紫外檢測器（檢測波長為230nm）； 流動相：（）甲醇（52：48）為流動相A，甲醇為流動相B，按下表梯度進行洗脫； 溶劑：流動相A； 流速：。 吡啶3磺酸 檢查方法：高效液相色譜法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)儀器與用具：高效液相色譜儀、十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）、電子分析天平、容量瓶、移液管、燒杯，PH計。試液與試藥：鹽酸、磷酸二氫鉀、三乙胺、甲醇、水。 對照品溶液：取富馬酸沃諾拉贊工作對照品適量（約相當于沃諾拉贊10mg），精密稱定，置100ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。：用平皿法，依法檢查（中國藥典2010年版二部附錄Ⅺ J）。于24h在366nm紫外光下觀察，同時用未接種的MUG培養(yǎng)基作本底對照。精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取富馬酸沃諾拉贊工作對照品適量，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。線性～，相關系數(shù)R2=雜質Ⅰ～，相關系數(shù)R2=雜質Ⅱ～，相關系數(shù)R2=雜質Ⅲ～，相關系數(shù)R2=雜質Ⅳ～，相關系數(shù)R2=雜質Ⅴ～，相關系數(shù)R2=雜質Ⅵ～，相關系數(shù)R2=準確度雜質Ⅰ%～%范圍內，準確度良好，RSD=%雜質Ⅱ%～%范圍內，準確度良好，RSD=%雜質Ⅲ%～%范圍內，準確度良好，RSD=%雜質Ⅳ%～%范圍內，準確度良好，RSD=%雜質Ⅴ%～%范圍內，準確度良好，RSD=%雜質Ⅵ%～%范圍內，準確度良好，RSD=%精密度重復性試驗：測得雜質Ⅰ含量RSD=%，雜質Ⅱ含量RSD=%，雜質Ⅲ含量RSD=%，雜質Ⅳ含量RSD=%，測得雜質Ⅴ含量RSD=%，雜質Ⅵ含量RSD=%，其他單雜含量RSD=%，其他總雜含量RSD=%。分別取雜質Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ工作對照品各適量，精密稱定，作為雜質對照品溶液。線性關系試驗 同原料藥。重復測定6次，考察精密度。（~64，制劑的質量控制一第114~128頁） 富馬酸沃諾拉贊片有關物質檢查溶液穩(wěn)定性試驗結果（供試品溶液）名稱/時間0h3h6h9h12h平均值RSD%未知雜質1405937013886399842823985雜質Ⅰ10040953298789514104759888沃諾拉贊435466514354604943473026434439244343410143488750雜質Ⅱ214442134721812221022392322126未知雜質2835182367654934995788634 富馬酸沃諾拉贊片有關物質檢查溶液穩(wěn)定性試驗結果（對照溶液）名稱/時間0h3h6h9h12h平均值RSD%沃諾拉贊223519224561224146224257224210224139 富馬酸沃諾拉贊片有關物質檢查溶液穩(wěn)定性試驗結果（雜質對照品溶液）峰面積/時間0h3h6h9h12h平均值RSD%雜質Ⅰ232331232403232799232538230054232025雜質Ⅱ2505242507642511062512642