超臨界色譜ppt課件(存儲(chǔ)版)
【正文】 ξ=4πδρ/ε 式中 ， ρ是毛細(xì)管表面電荷密度； δ為雙電層厚度 。 按 Gidding方程 [5]， 分辨率 R只可定義為 )/)(4/( 21???? NR式中， Δυ／ υ是兩溶質(zhì)的區(qū)帶間的相對(duì)速度差。待測(cè)組分從毛細(xì)管的一端引人，在電場(chǎng)作用下，由于離子遷移速度有差別，而在整個(gè)毛細(xì)管內(nèi)形成不同的樣品區(qū)帶，在毛細(xì)管的另一端放置檢測(cè)器，以便連續(xù)地檢測(cè)流過(guò)的每一個(gè)組分帶，分析信號(hào)通過(guò)檢狽 u器接收后。 分離效率 n可表示為 DUn eo2)( ?? ??式中 ， D為溶質(zhì)的平均擴(kuò)散系數(shù) 。 在雙電層內(nèi) ， EOF總是向雙電層內(nèi)抗衡離子方向遷移 ， 穿過(guò)雙電層的電勢(shì)下降的程度受電滲流速度所控制 。Kα是一個(gè)常數(shù)；其值在 1～ 1． 5之間 ， 取決于遷移質(zhì)點(diǎn)的形狀 。 即摩擦阻力正比于溶液的粘度 、 質(zhì)點(diǎn)大小和其電泳速度 。 （ 5） 分辨率高 ， 理論塔板數(shù)為幾十萬(wàn)至幾百萬(wàn)／米 。 此后 ， 許多的研究報(bào)告涉及氨基酸 、肽類(lèi) 、 蛋白質(zhì)的分離 。 （ 2）與氣相色譜法比較 出于流體的擴(kuò)散系數(shù)與粘度介于氣體和液體之間， 因此 SFC的譜帶展寬比 GC要??； 另外， SFC中流動(dòng)相的作用類(lèi)似 LC中流動(dòng)相，流體作流動(dòng)相不僅載帶溶質(zhì)移動(dòng)，而且與溶質(zhì)會(huì)產(chǎn)生相互作用力，參與選擇競(jìng)爭(zhēng)。 它在紫外區(qū)是透明的；臨界溫度 31℃ ， 臨界壓力 106Pa；在色譜分離中 ， CO2流體允許對(duì)溫度 、 壓力有寬的選擇范圍 。 （ 2） 帶有一個(gè) 限流器 （ 或稱(chēng)反壓裝置 ） 。 另一方面 ， 其密度與液相色譜類(lèi)似 ， 這樣就便于在較低溫度下分離和分析熱不穩(wěn)定性 、 相對(duì)分子質(zhì)量大的物質(zhì) 。當(dāng)處于臨界溫度以上，則不管施加多大壓力，氣體也不會(huì)液化。205 超臨界流體色譜法簡(jiǎn)介 超臨界流體色譜法 （ Supercritical Fluid Chromatography ,SFC） 是以 超臨界流體 作為流動(dòng)相的一種色譜方法 。而在物質(zhì)的超臨界溫度下，其氣相和液相具有相同的密度。 超臨界流體的 擴(kuò)散系數(shù)和粘度接近于氣相色譜 ， 因此溶質(zhì)的傳質(zhì)阻力小 ， 可以獲得快速高效分離 。 這點(diǎn)類(lèi)似氣相色譜中的色譜柱 ， 目的是為了提供對(duì)流動(dòng)相的精確溫度控制 。 在 SFC中 ， 最廣泛使用的流動(dòng)相要算是 CO2流體 ， 它無(wú)色 、 無(wú)味 、 無(wú)毒 、 易獲取并且價(jià)廉 ， 對(duì)各類(lèi)有機(jī)分子都是一種極好的溶劑 。 這是由于流體的低粘度使其流動(dòng)速度比 HPLC法快 ， 有利于縮短分離時(shí)間 。 1909年 ， “ 電泳 ” 這一術(shù)語(yǔ) ， 他的實(shí)驗(yàn)是用于測(cè)定蛋白質(zhì)的等電點(diǎn) 。 （ 4） 靈敏度高 ， 檢測(cè)眼可達(dá) （ 1013～ 1O15） mol， 使用激光誘導(dǎo)的熒光檢測(cè)限可達(dá) （ 1O19～ 1O21） mol。 電場(chǎng)力促使帶電質(zhì)點(diǎn)向兩極移動(dòng) ， 質(zhì)點(diǎn)在移動(dòng)過(guò)程
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