菊花嫩莖快繁技術(shù)的研究生物技術(shù)及應(yīng)用(存儲(chǔ)版)
【正文】 2．3生根誘導(dǎo)及移栽…………………………………………………………112． 4細(xì)菌、真菌污染及防治………………………………………………………12……………………………………………………………………… 12參考文獻(xiàn)…………………………………………………………………… 13致謝………………………………………………………14菊花又稱(chēng)“菊”、“秋菊”、“黃花”, 為菊科菊屬的多年生宿根草本植物或半灌木, 是原產(chǎn)于我國(guó)的十大傳統(tǒng)名花和世界最主要的切花之一, 主產(chǎn)于浙江、江蘇, 在四川、安徽、河南、山東等省也有栽培。現(xiàn)代研究表明, 菊花花瓣中不僅含有多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì), 它還有食用、藥用等多種價(jià)值, 有抗病毒、抗炎、抗氧化、抗HIV 和癌細(xì)胞的成分、舒血管、降血壓、降血脂、抗腫瘤等多種藥理作用。藥品與試劑：MS培養(yǎng)基母液、激素(生長(zhǎng)素 、細(xì)胞分裂素等)母液、有機(jī)物（瓊脂、蔗糖）、無(wú)菌水、 %升汞、 70 %、75%酒精、。白色光一般能滿足生長(zhǎng)需要。 選取生長(zhǎng)健壯的嫩莖洗去表面泥土 ,在超凈工作臺(tái) ,用 75 %酒精處理 20～30 秒 ,再用無(wú)菌水沖洗 3～5 次 ,轉(zhuǎn)入 %升汞溶液浸泡 8～10 分鐘 ,再用無(wú)菌水沖洗 4～6 次 ,用濾紙吸干水分。經(jīng)過(guò)10d 菊花莖尖顏色逐漸變綠,基部逐漸增大,莖尖也逐漸伸長(zhǎng),一般25d 后,長(zhǎng)出叢生芽。為了防止褐變我們加入了VC溶液。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn),6BA/ NAA 比值越大有利于芽分化。為了防止當(dāng)代培養(yǎng)基染菌，我們?cè)谂囵B(yǎng)基中附加50—150mg/l氨芐青霉素；為了防止生根培養(yǎng)基的試管苗染菌我們加入50mg/l 硫酸丁胺卡那霉素。特別是在接種時(shí)如果發(fā)現(xiàn)嫩莖很難插進(jìn)培養(yǎng)基那么下次應(yīng)該適當(dāng)?shù)慕档铜傊壤?，如發(fā)現(xiàn)隨凝固但很軟就應(yīng)在下次增大比例 ，方案上的不一定都合適，要看實(shí)際情況而定。%瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)皿中濕度稍低。2．4細(xì)菌、真菌污染及防治表5 初代、繼代培養(yǎng)中的污染統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)類(lèi)型污染分類(lèi)總計(jì)概率染菌表現(xiàn)初代真菌污染%外植體周?chē)邪咨q毛狀菌絲，培養(yǎng)基出現(xiàn)綠、白菌斑細(xì)菌污染13%培養(yǎng)基表層呈水漬狀污染，外植體周?chē)涡卧旗F狀污染繼代真菌污染19%培養(yǎng)基表層出現(xiàn)黃、白色油滴狀菌斑細(xì)菌污染30%培養(yǎng)基表層有粉紅色如水漬狀分布的菌斑在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，我們會(huì)發(fā)現(xiàn)每次實(shí)驗(yàn)下來(lái)總有幾瓶污染的，大多都是真菌和細(xì)菌污染。表4 菊花組培中生長(zhǎng)素的濃度范圍(單位:mg/L )生長(zhǎng)素NAAIBAIAA愈傷誘導(dǎo)和分化0. 01～ 20. 3～ 3生根0. 1～ 0. 3 (1/2M S)0. 1～ 0. 31. 06BA濃度0～0. 5 mg/L范圍內(nèi),菊花分枝數(shù)隨6BA濃度增高而增多,但超過(guò)這一濃度,菊花分枝數(shù)隨濃度增高而降低,說(shuō)明菊花分枝數(shù)在一定范圍內(nèi)與6BA 濃度呈正相關(guān)。在拿菊花莖尖和菊花葉片接種到初代培養(yǎng)基上在相同的條件下培養(yǎng)時(shí)，發(fā)現(xiàn)莖尖及莖段最為合適,其他外殖體在此培養(yǎng)基效果不明顯。置于光照培養(yǎng)箱中,每天連續(xù)光照12～16h ,光照強(qiáng)度為2 000～3 000Lx ,培養(yǎng)溫度(25 177。將操作用刀、 鑷子、 剪子等用具在酒精燈下用火灼燒到變紅,冷卻待用。范圍為1000～ 4000lx, 較多選擇1500～ 2000lx。 植物材料：菊花嫩莖。菊花味甘、性寒,在明代李時(shí)珍的《本草綱目》中載有“利五脈,調(diào)四肢,治頭目風(fēng)熱,腦骨疼痛,養(yǎng)目血,去翳膜,主肝氣不足”的功效[1] ， 且具有很強(qiáng)的抗菌作用, 對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等有很強(qiáng)的抑殺作用，常用于治療心胸?zé)?、疔瘡、偏頭痛、冠心病、乳腺炎、扁桃炎等疾病, 可降低血液中的血脂和膽固醇, 預(yù)防心臟病的發(fā)生, 并能增強(qiáng)身體的免疫能力。 Turning brown。滅菌出錯(cuò)，培養(yǎng)基出現(xiàn)問(wèn)題（包括滅菌時(shí)中途打開(kāi)滅菌鍋在里面加?xùn)|西，操作失誤等）。不同品種的菊花其生長(zhǎng)環(huán)境有什么不同。）先配制誘導(dǎo)培養(yǎng)基→組培室消毒（超凈工作臺(tái)紫外消毒20min）→菊花嫩莖消毒處理→實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備→實(shí)驗(yàn)操作(初代培養(yǎng),繼代培養(yǎng),生根培養(yǎng)) →觀察并記錄數(shù)據(jù)和現(xiàn)象→實(shí)驗(yàn)中可能出現(xiàn)問(wèn)題的處理→實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的苗移栽到適用田。誘導(dǎo)培養(yǎng)的成活率，繼代培養(yǎng)的成活率及最終長(zhǎng)成小苗的比例。杭菊、亳菊、貢菊、滁菊、祁菊、懷菊、濟(jì)菊、黃菊為我國(guó)藥用菊花的八大主流商品。菊花的主要繁殖方法有扦插繁殖、分株繁殖、壓條繁殖、嫁接繁殖等,這些方法均存在一定程度的缺點(diǎn)與不足,主要表現(xiàn)為繁殖速度不快、病蟲(chóng)害發(fā)生頻率高、易受季節(jié)變化 影響等
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