生化3第三章核酸化學(xué)(存儲版)
【正文】 7甲基鳥苷 m7G （四）、核苷酸（ nucleotide） H （五） .核苷酸衍生物 OPOONNNNN H 2OHHO HHO HHO C H 2OPOOOPOO三磷酸腺苷 ( A T P )AMP ADP ATP 核酸中也存在一些不常見的稀有堿基。稀有堿基的種類很多，大部分是上述堿基的甲基化產(chǎn)物。 38186。核酸的的一級結(jié)構(gòu) (堿基順序 )保持不變。 將熱變性的 DNA驟然冷卻至低溫時(shí)， DNA不可能復(fù)性。 HGP與曼哈頓原子彈計(jì)劃和啊波羅登月計(jì)劃一起被稱為二 十世紀(jì)三大科學(xué)工程 . 美國 ,英國 ,日本 ,德國 ,法國 ,中國 .我國是 1999年加入 ,承擔(dān) 1%的測序任務(wù) .{我國成立三個(gè)人類基因組中心 — 北京遺傳所，上海（南方），北京（北方）。現(xiàn)使用毛細(xì)管陳列電泳技術(shù)，每個(gè)堿基少于 。 二 .HGP取得的成就 ：人類基因組計(jì)劃的任務(wù)已完成，與蛋白質(zhì)有關(guān)的基因只占 2%，含 2萬 。 核酸雜交方法： Southern blotting雜交技術(shù) : Northern blotting雜交技術(shù) : 點(diǎn)雜交技術(shù) : 菌落 /噬菌體的原位雜交技術(shù) : （三） .雜交檢測方法 — 放射自顯影 點(diǎn)雜交 三 .PCR技術(shù) DNA Polymerase Chain Reaction （一）基本步驟 引物 1pmol/ul,dNTP200umol/l, Taq酶 2u/100ul 94 ?c 510min 褪火 45s60s 保 溫 72 ?c1min （二） PCR技術(shù)的應(yīng)用 1. 遺傳病，疑難病的診斷及產(chǎn)前檢查 2 .病原體的檢測 3 .癌基因的檢查 4 .基因組測序 5 .基因探針的制備 6 .基因突變的分析及定位誘變 7 .cDNA庫的構(gòu)建 ,DNA重組 ,基因分離與克隆 8. 法醫(yī)及刑事鑒定 （三） PCR技術(shù)的特點(diǎn) 1 .引物設(shè)計(jì) :(引物的長度一般為 18～ 25bp) 擴(kuò)増長度一般在 200～ 800bp之間 2 .擴(kuò)増效率 : 2n,DNA量增加 106～ 109倍 3 .擴(kuò)増溫度 : G＋ C含量和 Tm值 ,一般在 40－ 60%之間， 兩條相差 2－ 3 ℃, 72 ℃. :3’端不得有任何修飾 第七節(jié)人類基因組計(jì)劃簡介 一 .人類基因組計(jì)劃概況 概況 : 1986年，由 (Science)人類基因組計(jì)劃(human genome projectHGP)。因而測定 Tm值，可反映 DNA分子中 G, C含量，可通過經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算：（ G+C)%=()* （二） . 核酸的復(fù)性 變性核酸的互補(bǔ)鏈在適當(dāng)?shù)臈l件下，重新締合成為雙螺旋結(jié)構(gòu)的過程稱為 復(fù)性 。 PH的溶解性 二 .兩性性質(zhì) : 胸腺嘧啶 核苷酸兩性離解及等電點(diǎn) 三、核酸的紫外吸收特性 在核酸分子中，由于嘌呤堿和嘧啶堿具有共軛雙鍵體系，因而具有獨(dú)特的紫外線吸收光譜，一般在 260nm左右有最大吸收峰，可以作為核酸及其組份定性和定量測定的依據(jù)。末端都具有 CpCpAOH的結(jié)構(gòu)。 DNA所含的糖為 βD2脫氧核糖； RNA所含的糖則為 βD核糖。 ? cAMP ? cGMP (強(qiáng)力味精 ) IMP GMP 第二節(jié)、 RNA的分子 結(jié)構(gòu) 一、 RNA的一級結(jié)構(gòu) （一）連接方式 5’ 5’ 3’ 3’ 5′PdAPdCPdGPdTOH 3′ 5′PAPCPGPUOH ′ 或 5′
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