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生化3第三章核酸化學(xué)(專業(yè)版)

2025-02-27 10:36上一頁面

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【正文】 。 一般 DNA的 Tm值在 7085?C之間。DNA抗堿 (高溫不抗堿 ) ?酸降解:水解速度 嘌呤糖苷鍵 嘧啶糖苷鍵 脫氧核糖糖苷鍵 核糖糖苷鍵 糖苷鍵 脂鍵 ?在低溫的酸性條件下 DNA, RNA則穩(wěn)定 核酸酶有 :外切酶,內(nèi)切酶和磷酸酯酶 牛胰 RNaseI 產(chǎn)物: 3’嘧啶核苷酸(結(jié)尾) 內(nèi)切酶 Rnase T1 產(chǎn)物: 3’鳥嘌呤核苷酸(結(jié)尾) Rnase U2 產(chǎn)物: 3’嘌呤核苷酸(結(jié)尾) SPDase (牛脾 ) 5’端開始,產(chǎn)物: 3’核苷酸 外切酶 VPDase (蛇毒 )3’端開始,產(chǎn)物: 5’核苷酸 磷酸單酯酶( PNase) 5’磷酸 三、 RNA一級結(jié)構(gòu)的測定 用 ?32p –ATP標(biāo)記 5’末端 (一)、末端基團(tuán)分析 堿解 5’ pGGCCGAoH3’ pGp+2Gp+2Cp+A 外切酶 : 如: SPDase 5’ pGGCCGAoH3’ pGp+2Gp+2Cp+A 末端標(biāo)記 (二)酶的部分降解及產(chǎn)物的分離 尿素柱層析 雙向電泳 凝膠電泳 (三)小片段核苷酸的順序測定 按序降解法 核酸酶外切酶部分降解法 核酸內(nèi)切酶降解法 (四) .由小片段核苷酸的順序推測 RNA分子順序 pAGCUG pAGCU +G pAGCUG pAGC+U+G pAG+C+U+G pA+G+C+U+G VPDase (一) RNA的二級結(jié)構(gòu) 四 .RNA的高級結(jié)構(gòu) ?占 RNA總量的 15% ?一種氨基酸對應(yīng)最少一種 RNA ?分子量 25000左右,大約由 70- 90個核苷酸組成,沉降系數(shù)為 4S左右。 ?分子中含有較多的修飾成分。 DNA的 Tm值與分子中的 G和 C的含量有關(guān)。 。 。因此,通常將紫外吸收的增加量達(dá)最大量一半時的溫度稱熔解溫度,用Tm表示。 多聚核苷酸的表示方式 DNA RNA 二、 RNA的降解 RNA的化學(xué)降解 ?堿降解: RNA用稀堿降解產(chǎn)物為 2’核苷酸和 3’核苷酸混合物。 ?339。 G和 C的含量高, Tm值高。 HGP的目標(biāo): 基因的表達(dá)調(diào)節(jié),癌癥發(fā)生的機制及治療,人類疾病的防治, 醫(yī)療,制藥,人口素質(zhì),環(huán)境等。承擔(dān) 3號染色體短臂D3S3610至端粒 30M b區(qū)域 3000萬 bp} HGP的研究內(nèi)容 : 。 變性表征 : 生物活性部分喪失、粘度下降、浮力密度升高、紫外吸收增加(增色效應(yīng)) 變性因素 : pH( )變性劑(脲、甲酰胺、甲醛),低離子強度 加熱 熱變性和 Tm : DNA的變性過程 是突變性的,它在很窄的溫度區(qū)間內(nèi)完成。 ? cAMP ? cGMP (強力味精 ) IMP GMP 第二節(jié)、 RNA的分子 結(jié)構(gòu) 一、 RNA的一級結(jié)構(gòu) (一)連接方式 5’ 5’ 3’ 3’ 5′PdAPdCPdGPdTOH 3′ 5′PAPCPGPUOH ′ 或 5′ACGTGCGT 3′
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