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Methods, 200,3:90– 97 32 致 謝 本文的研究工作是在我的導(dǎo)師郭潔老師的悉心指導(dǎo)下完成的。所選取的工藝條件：浸提液乙醇濃度、浸提溫度、料液比 (g:mL)、浸提時間 。 料液比的影響 實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)用 1: 1: 1:2 1: 1:35(g:mL)， 5 種不同的料液比，提取條件為75%的乙醇為提取劑，回流提取時間為 ，提取溫度為 80℃ ，結(jié)果見表 36 圖 36 料液比 的影響 料液比 (g:mL) 吸光度 A 提取率 (%) 黃酮濃度 (μg/mL) 1:10. 1:20 1:25 1:30 （續(xù)表） 料液比 (g:mL) 吸光度 A 提取率 (%) 黃酮濃度 (μg/mL) 1:35 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 505060708090100黃酮提取率/% 料液比 /g :m L 1: 10 1: 20 1: 25 1: 30 1: 350510152025303540 黃酮提取率 /% 黃酮濃度 / μ m /m L黃酮濃度/μm/mL 圖 36 料液比的影響 28 根據(jù)圖 36可知，黃酮提取率隨提取劑量的增大而增大，這是因?yàn)橐掖加昧吭酱?，可溶解的黃酮也就越大，但當(dāng)固液比達(dá)到 1:20后，提取率增大的趨勢不是很明顯，因此，考慮到采用較大的固液比時，不僅增加了乙醇的用量，還增大了后續(xù)工序的難度，最終導(dǎo)致生產(chǎn)成本的增加，故選用 l:20的固液比作為最優(yōu)值。 25 提取溫度的影響 實(shí)驗(yàn)中選取 60、 70、 80、 90℃ ， 4個不同提取溫度，其他提取條件選取 75%的乙醇為提取劑，回流提取時間為 ，料液比為 1:20，結(jié)果見下表 34 圖 34 提取溫度的影響 提取溫度 (℃ ) 吸光度 A 提取率 (%) 黃酮濃度 (μg/mL) 60 70 80 90 提取溫度 對 黃酮的提取率的影響效果見圖 34 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 1006065707580859095100 黃酮提取率/% 黃酮提取率 /% 黃酮濃度 / μ m /m L提取溫度 / ℃0510152025303540黃酮濃度/μm/mL 圖 34 提取溫度的影響 根據(jù)圖 34可知提取溫度在 60℃ 到 80℃ 之間， 決明子 中黃酮的提取率隨著溫度的升高呈現(xiàn)明顯的增大的趨勢，分析其原因可能是因?yàn)樘崛囟仍礁撸肿訑U(kuò)散速度加快，有利于細(xì)胞內(nèi)黃酮的溶解浸出，故認(rèn)為 80℃ 為最佳提取溫度。堿性水溶液的提取效果略好，但是提取液顏色偏灰色，雜質(zhì)較經(jīng)石油醚脫色，提取效率與沸水相比提取并不多。 M(%)=[Y(100/10)(50/2)10106100]/w。 (2) 提取過程中，保持提取溫度穩(wěn)定，一定不能使溶劑揮發(fā)。 4. 提取溶劑的選擇 分別用沸水、堿性水溶液 (pH值 )、 75％乙醇溶液、 75％甲醇溶液、 75％丙酮溶液 [16]，80℃ 水浴下，回流浸提 ，料液比為 1:20分別提取，測定其吸光度，計算其提取率分別。 2. 決明子中黃酮平均含量的提取及測定 決明子中總黃酮平均含量的測定。黃酮苷一般易溶于水、乙醇、甲醇等強(qiáng)極性的溶劑中；難溶于或不溶于苯、氯仿等有機(jī)溶劑中。 14 (4) 乙醇濃度對決明子 中 黃酮浸提效果的影響 。 兩種方法機(jī)理不同，亞硝酸鈉 硝酸鋁顯色原理文獻(xiàn) 認(rèn)為是蘆丁 NaNO2Al(NO3)3NaOH試劑在蘆丁 B環(huán)的 3’,4鄰二酚羥基部位反應(yīng)產(chǎn)生紅色物質(zhì)。原理是沒能夠充分破壞以纖維索為主的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)及其細(xì)胞間相連的果膠，使植物中的果膠完全能夠分解成小分子物質(zhì)，減小提取的傳質(zhì)阻力，是植物中的黃酮 類物質(zhì)能夠充分地釋放出來。常見的可以分為三種方法：冷浸法、滲漉法、回流法。 (2) 堿性水或堿性稀醇提取法 黃酮類物質(zhì)大多具有酚羥基，因此可以用堿水或堿性稀醇浸出，經(jīng)酸化后得出黃酮類物質(zhì)。從加工過程看主要有兩種形式，一種是用富含黃酮類的原料直接加工成食品，在加工過程中最大程度地保留有效成分；另一種是從原料中提取出黃酮類物質(zhì)，再把他添加到其他原料中進(jìn)行加工制成產(chǎn)品。近來研究顯示， BAI還具有抗艾滋病病毒 HIV的作用，能誘導(dǎo)感染 HIV的細(xì)胞發(fā)生凋亡。甲基黃酮醇胺鹽酸赫 MFA前期研究表明： MFA有抗實(shí)驗(yàn)性心率失常、實(shí)驗(yàn)性心肌梗塞和實(shí)驗(yàn)性血栓形成的作用，可以抑制鉀鈣引起的兔主動脈條及平滑肌收縮。 關(guān)于衰老機(jī)理的自由基學(xué)說認(rèn)為 [12]，機(jī)體內(nèi)的自由基可在細(xì)胞代謝過程中產(chǎn)生，也可由環(huán)境因素促成。 9 圖 11 2苯基色原酮 (黃酮 ) 目前黃酮類化合物其基本骨架具有 C6C3C6的特點(diǎn)，即由兩個芳香環(huán) A和 B，通過中央三碳鏈相互連接而成的一系列化合物。小決明油中還含有少量錦癸酸 (malvalicaeid)，及菜子甾酵 (campester01)。決明子多糖也抑制血清過氧化產(chǎn)物 (MDA)的產(chǎn)生，加入糖濃度小于 ％ (即加入糖體積小于 )時，隨著加入的糖濃度增加，吸光度值 逐漸降低，即血清過氧化產(chǎn)物 (MDA)濃度逐漸減小，氧化抑制率逐漸升高，可達(dá) ％；但當(dāng)加入的糖濃度繼續(xù)升高時，抑制血清被氧化的能力不再增加，表明糖抑制過氧化反應(yīng)的作用是有一定限度的。決明子蛋白質(zhì)降脂作用的機(jī)理有待進(jìn)一步研究。決明子外殼 (SC I)也具有通便潤腸作用，其中蒽醌類物質(zhì)通便作用主要體現(xiàn)為瀉下，但伴隨便秘，而多糖與纖維素的通便作用則平緩穩(wěn)定．且兩者結(jié)合后效果最佳。競爭性抑制病原菌或腸道有害菌增殖，同時大大提高了機(jī)體的消化能力和抵抗力，有益宿主改善和恢復(fù)健康狀態(tài)。 潘正軍等人所作 動物試驗(yàn) 表明 [3]，決明子能抑制血清膽固醇升高和主動脈粥樣硬化斑點(diǎn)形成。上世紀(jì)九十年代以來 ，人們對 中藥材 的綜臺利用價值產(chǎn)生了良好 的 興趣， 其 存在廣闊的開發(fā)前景。C, extracting time . Using the concentration of rutin standard solution as abscissa and the absorbency as ycoordinate, the linear chart was constructed and the standard curve the regression equation was C=(R2=). And measurement extract spectrophotometry for and the yield of flavonoids was %. Key words: cassia seed, flavonoids, ethanol, cxtraction technology III 目 錄 第 1 章 緒論 ................................................................................................................ 5 研究背景與研究意義 ................................................................................... 5 研究進(jìn)展 ....................................................................................................... 5 藥用理作用研究 ................................................................................ 5 化學(xué)成分研究 .................................................................................... 7 黃酮類化合物的性質(zhì) ................................................................................... 8 黃酮類化合物的結(jié)構(gòu) ........................................................................ 8 決明子中黃酮類功效 ...................................................................... 10 決明子中黃酮類化合物提取方法 ................................................... 11 黃酮類化合物的常用分析側(cè)定方法 .............................................. 13 研究的目的與內(nèi)容 ..................................................................................... 13 第 2 章 實(shí)驗(yàn)部分 ...................................................................................................... 15 儀器與藥品 ..................................................................