【正文】 色氨酸采用分光光度法測定 ， 其余氨基酸采用氨基酸自動分析儀或高效液相色譜儀分離測定 。 復(fù)方氨基酸輸液配制工藝如下 : （ 1） 穩(wěn)定及難溶氨基酸的溶解 取新鮮注射用水 （ 約全量的 2／ 3） 于容器中 ， 加溫至 90℃ ， 將亮氨酸 、 異亮氨酸 、 蛋氨酸 、 苯丙氨酸 、 纈氨酸 、 天冬氨酸及谷氨酸依次投入 ， 充分?jǐn)嚢枞芙?， 停止加熱 ， 加入色氨酸攪拌溶解 。輸液中 必需氨基酸（ E）與非必需氨基酸（ N）之 比（ E／ N） 依具體情況而定 。 有些氨基酸輸液還加入 山梨醇 、 木糖 、 維生素 、Na＋ 、 K＋ 、 Ca2+或 Mg2+等成分 ， 以補(bǔ)充能量 ， 提高 氨基酸 的利用率及其 營養(yǎng)價值 ， 也有些 氨基酸輸液與右旋糖酐配伍 制成較理想的 代血漿 。 （ 2） 合成路線 : LThr的合成原料為甘氨酸和乙醛 。 （ 2） 合成路線 : LPro可采用化學(xué)合成法 、 發(fā)酵法及蛋白質(zhì)原料水解分離法生產(chǎn) ， 合成法也有不同的原料和工藝 。 不對稱合成法 包括直接合成 、 α酮酸反應(yīng)及 不對稱催化加氫等方法 。 Ac－ D－ Phe的消旋 上述 粗品及精品 LPhe母液 及洗滌液合并后濃縮至 60L,于 100L反應(yīng)罐中在攪拌下緩緩加入 醋酸酐 ， 在 25～ 45℃ 攪拌反應(yīng) 30min，冷卻至室溫 ， 放置 6h， 用濃鹽酸 調(diào) PH ～ ， 5℃結(jié)晶過夜 ， 濾取結(jié)晶 ， 用去離子水洗滌 3～ 5次 ， 每次 20L， 抽干 ， 于 40℃ 真空干燥得 Ac－ DL－ Phe。 ② AcDLPhe的制備 將 DLPhe、 冰醋酸及醋酸酐 按1∶ 7∶ 1（ w／ V／ v）的比例加入反應(yīng)釜中， 90℃ 反應(yīng) 4～ 5h，回收醋酸，濃縮液加一定量去離子水，再濃縮至一定體積， 冷卻結(jié)晶 ，濾取結(jié)晶于 60℃ 真空干燥得 Ac－ DL－ Phe。 （ C＝ ～ ， 在 5mol／ L HCl中 ） ， 〔 α〕 25D為 176。 生物反應(yīng)堆 Ⅱ 轉(zhuǎn)化液過濾澄清 ， 于 60～ 70℃ 下減壓濃縮至原體積的 50％ ， 冷卻后加等體積 甲醇 ， 5℃結(jié)晶過夜 ， 濾取結(jié)晶并用少量冷甲醇洗滌抽干 ， 80℃真空干燥得 LAla粗品 。coli的細(xì)胞固定 取濕菌體 20kg懸浮于 80L， 生理鹽水 （ 或離心后的培養(yǎng)清液 ） 中 ， 保溫至 40℃ ， 再加入 90L保溫至 40℃ 的 12％ 明膠 溶液及％ 戊二醛 溶液 ， 充分?jǐn)嚢杈鶆?， 放置冷卻凝固 ，再 漫于 ％ 戊二醛溶液 中 。 培養(yǎng)結(jié)束后用 1mol／ L HCl調(diào) ， 升溫至 45℃ 并保溫 1h， 冷卻至室溫 ， 轉(zhuǎn)筒式高速離心機(jī)收集菌體 （ 含天冬氨酸酶 ） ， 備用 。 包埋法 將 聚合物 的 單體 和酶溶液混合后 ， 再借助 聚合促進(jìn)劑 （ 包括交聯(lián)劑 ） 的作用進(jìn)行聚合 ， 將酶包埋于聚合物中以達(dá)到固定化的目的 。 吸附法 這是通過載體表面和酶分子表面間的 次級鍵相互作用 而達(dá)到固定目的的方法 ， 又可分： 物理吸附和離子交換吸附 。 （ C＝ ～ ，在5mol／ L HCl中）。 固定化酶或細(xì)胞 可進(jìn)行連續(xù)操作，節(jié)省能源和勞務(wù)，并可長期反復(fù)使用。 二級種子培養(yǎng)接種量 ％ ， 培養(yǎng) 48h。 %， 氯化物不超過 ％ ， 硫酸鹽不超過 ％ ，鐵鹽不超過 ％ ,重金屬不超過 ％ ， 砷鹽不超過 。 ⑤ 濃縮趕氨 合并 pH3～ 12的洗脫液 ， 70～ 80℃ 減壓蒸餾 、 濃縮至粘稠狀 ， 加去離子水至原體積的 1／ 4， 再濃縮至粘稠狀 。 一級種子培養(yǎng)： 1000ml三解瓶中培養(yǎng)基裝量為200ml， 接種一環(huán)牛肉膏斜面 ， 搖床30℃ 培養(yǎng) （ 沖程 7cm， 頻率 105次／ min） 16h。 ⑵ 氨基酸 發(fā)酵方式 主要是液體通風(fēng)深層培養(yǎng)法 ， 其過程是由菌種試管培養(yǎng)逐級放大直至數(shù)噸至數(shù)百噸發(fā)酵罐 。 二 、 發(fā)酵法 （ － ） 基本原理與過程 發(fā)酵的基本原理 生物化學(xué)中稱酵母 無氧呼吸 過程為 發(fā)酵 ， 反應(yīng)過程中電子供體與受體皆為有機(jī)物 ， 有時電子受體為電子供體的分解產(chǎn)物 ， 氧化作用不完全 ， 最終形成還原性產(chǎn)物 。 ③ 濃縮 、 沉淀與解析 上述流出液 減壓濃縮 至進(jìn)柱液體積的 1／ 3， 攪拌下加入 1／ 10體積 （ v／ v） 的 鄰二甲苯 4磺酸 ， 產(chǎn)生亮氨酸磺酸鹽沉淀 。 含量測定 ： （ 5） 作用與用途 L胱氨酸具有增強(qiáng)造血機(jī)能 、 升高白細(xì)胞 、 促進(jìn)皮膚損傷的修復(fù)及抗輻射作用 。 不溶于 乙醇 、乙醚及丙酮 。 如在沸水中 苯丙氨酸 溶解度大于酪氨酸 100倍 ， 若將含少量酪氨酸的苯丙氨酸粗品溶于 15倍體積 （ w／ v） 的熱水中 ， 調(diào) ， 經(jīng)脫色過濾可除去大部分酪氨酸；濾液濃縮至原體積的 1／ 3， 加 2倍體積 （ v／ v）的 95％ 乙醇 ， 4℃ 放置 ， 濾取結(jié)晶 ， 用 95%乙醇洗滌 ， 烘干即得苯丙氨酸精品 。 如 鄰二甲苯 4磺酸能與亮氨酸 形成 不溶性鹽沉淀 ，后者與 氨水反應(yīng) 又可獲得 游離亮氨酸 ； 組氨酸可與 HgC12形成不溶性 汞鹽沉淀 ， 后者經(jīng)處理后又可獲得游離 組氨酸 ； 精氨酸可與苯甲醛 生成水不溶性 苯亞甲基精氨酸沉淀 ， 后者用 鹽酸 除去 苯甲醛 即可得精氨酸 。 （ 3） 酶水解法 蛋白質(zhì)原料在一定 pH和溫度條件下經(jīng)蛋白水解酶作用分解成 氨基酸和小肽 的過程稱為酶水解法 。 水解法生產(chǎn)氨基酸的主要過程為 水解、分離和結(jié)晶精制 三個步驟。 半必需氨基酸：氨基酸 （ 胱氨酸及酪氨酸 ） 可分別由其他 氨基酸 （ 蛋氨酸和苯丙氨酸 )產(chǎn)生 ， 若食物中提供了足夠的該 氨基酸 （ 氨酸及酪氨酸 ） ， 可減少對其他 氨基酸 （ 蛋氨酸及苯丙氨酸 ） 的需求量 。 通過 體內(nèi)轉(zhuǎn)化 而維持其 動態(tài)平衡 ， 若其動態(tài)平衡失調(diào) ， 則機(jī)體 代謝紊亂 ， 甚至引起 病變 。 是以 離子晶格 組成 ， 而一般的有機(jī)化合物是由 分子晶格 組成的 。 氨基酸是構(gòu)成機(jī)體蛋白質(zhì)的 基本單位 ， 且構(gòu)成生物體蛋白質(zhì)的氨基酸都是 α氨基酸 ， 除 甘氨酸 外 ， α碳原子 均為 不對稱碳原子 ， 具有 立體異構(gòu)現(xiàn)象 ， 均是L型氨基酸 。 分類： （ 1） 根據(jù)氨基酸在 酸性 、中性及堿性 氨基酸三類 。 （ 2） 化學(xué)通性： α氨基酸 共同的化學(xué)反應(yīng)有 兩性解離 及 林海定反應(yīng)(ninhyding reactiong) 、 ?；?、 烷基化 、 酯化 、 酰氯化 、 酰胺化 、 疊氮化 、 脫羧及脫氨反應(yīng) 、 肽鍵結(jié)合反應(yīng)及與甲醛和亞硝酸的反應(yīng) 等 。 許多氨基酸尚有其特定的藥理效應(yīng) 。 氨基酸 （ 精氨酸及組氨酸 ） 合成速度較低 ， 通常難以滿足需求 ， 需由外界補(bǔ)充一部分 。 蛋白質(zhì)水解方法 目前蛋白質(zhì)水解分為 酸水解法、堿水解法及酶水解法三種。 此法優(yōu)點(diǎn)為反應(yīng)條件溫和 ， 無需特殊設(shè)備 ， 氨基酸不破壞 ， 無消旋作用 。 （ 3） 吸附法 是利用吸附劑對不同氨基酸吸附力的差異進(jìn)行分離的方法 。 （ 二 ） 用水解法生產(chǎn)氨基酸的品種及工藝 絕大多數(shù)氨基酸均可采用 酸水解法 生產(chǎn) ， 但目前由于發(fā)酵方法及酶工程技術(shù)的迅速發(fā)展 ， 僅有幾種氨基酸仍采用酸水解法生產(chǎn) 。 可被 還原為 L半胱氨酸 。 臨床上用于治療輻射損傷 、 重金屬中毒 、 慢性肝炎 、 牛皮癬及病后或產(chǎn)后繼發(fā)性脫發(fā) 。 濾取沉淀并用 2倍體積 （ w／ v） 去離子水?dāng)嚢柘礈靸纱?， 抽濾壓干得亮氨酸磺酸鹽 。 工業(yè)上 ， 發(fā)酵 實(shí)質(zhì)上是利用微生物細(xì)胞中酶的作用 ，將培養(yǎng)基中有機(jī)物轉(zhuǎn)化為細(xì)胞或其它有機(jī)物的過程 。 發(fā)酵結(jié)束 ， 除去菌體 ， 清液用于 提取 、 分離純化和精制 有關(guān)氨基酸 ， 其分離純化 、 精制方法及過程與水解法相同 。 二級種子培養(yǎng)：接種量 ％ ， 培養(yǎng) 8h， 如此逐級 放大培養(yǎng)得足夠量菌種 。 如此重復(fù)三次 。 （ 5） 作用與用途 LIle為必需氨基酸 ， 是復(fù)方氨基酸輸液的重要成份之一 。 如此逐級擴(kuò)大培養(yǎng) 。 （ 二 ） 酶轉(zhuǎn)化法生產(chǎn)的氨基酸品種及工藝 目前醫(yī)藥工業(yè)中 ， 用酶工程法生產(chǎn)的氨基酸已有 十多種 。 ② L丙氨酸（ LAlanine，簡稱 LAla）的結(jié)構(gòu)與性質(zhì) LAla存在于所有蛋白質(zhì)分子中 ,為 中性氨基酸 。 物理吸附 是通過 氫鍵 、 疏水鍵和 π－電子親和力 等物理作用力將酶固定于 不溶性載體 的方法 。 （ 1） 膠格包埋 最常用的包埋劑是 聚丙烯酰胺凝膠 ，它以 丙烯酰胺 為單體、 N， N亞甲基雙丙烯酰胺為交聯(lián)劑 聚合而成。 德阿昆哈假單胞菌（ Pseudomonas dacunhae） 68變異株的培養(yǎng) 斜面培養(yǎng)基組成（％）為 蛋白胨 ，牛肉膏 ，酵母膏 ， NaC1 ，瓊脂 。 于