【正文】 五 、 作用與用途 對代謝旺盛的病人及嚴(yán)重消耗性病人的蛋白質(zhì)合成有促進作用。 其處方中每升溶液里各氨基酸的量分別為 （ g） ： LLeu ， LIle ， L， LThr ， LVa1 ， LMet ， LTrp ， LLys ， LArg ， LHis Gly 6． 0。 （ 3） 脫色與灌封 上述溶液加 ％ ～ ％ （ w／ v） 的活性炭 ， 攪拌 30min， 濾除活性炭 ， 再用分子量截留值為 1萬～ 2萬的超濾膜濾器 過濾 ， 濾液分裝于 250ml或500ml輸液瓶中 ， 按常規(guī)操作壓蓋后 ， 于 105℃ 流動蒸氣滅菌 30min即得成品 。活性炭對芳香族氨基酸吸附力強 ， 引起損失 ， 使其含量下降 ， 故配料時需將芳香族氨基酸用量 增加 20%以彌補損失 ， 或?qū)⒒钚蕴肯扔?1％ 苯丙氨酸 吸附飽和后再應(yīng)用 。 國內(nèi) 氨基酸輸液的 總含氮量為 ％～ ％。 （ 二 ） 處方中氨基酸的組成與比例 氨基酸的構(gòu)型 最理想的情況是全部使用 L氨基酸配制輸液 。 （ 一 ） 組方原理 體內(nèi)蛋白質(zhì)處于連續(xù) 分解與合成的動態(tài)平衡狀態(tài) ， 故氨基酸輸液以被患者的 有效利用為度 。 氨基酸輸液可直接注入進食不足者的血液中 ， 促進蛋白質(zhì) 、 酶及肽類激素的合成 ，提高血漿蛋白濃度與組織蛋白含量 ， 維持 氮平衡 ， 調(diào)節(jié)肌體正常代謝 。 反應(yīng)過程為： （ 3）工藝路線 拆分 取 72L去離子水 、 20kg DLThr精品及 DTHr于 200L反應(yīng)罐中 ， 攪拌下迅速升溫到 95℃ 至全溶 ， 再迅速降溫至 40℃ ， 投入 225g DThr結(jié)晶 ， 緩緩降溫至 29～ 30℃ ， 迅速過濾 ， 濾餅于 80℃ ， 烘干得 DThr粗品 。 在堿液中不穩(wěn)定 ， 受熱易分解為甘氨酸和乙醛 。 反應(yīng)過程 （ 3）工藝路線 五氯酚乙醇溶液得復(fù)鹽沉淀。 極易溶于水，不溶于乙醇及乙醚。 （ 二 ） 化學(xué)合成法生產(chǎn)的氨基酸品種及工藝 理論上 所有氨基酸皆可由化學(xué)合成法制造 ， 但在目前 ， 只有當(dāng)采用其它方法生產(chǎn)很不 經(jīng)濟 時才采用化學(xué)合成法生產(chǎn) ， 如甘氨酸 、 DL蛋氨酸及 DL丙氨酸等 現(xiàn)僅介紹 L脯氨酸及 L蘇氨酸 的化學(xué)合成及其分離純化工藝 。 一般合成法 和 不對稱合成法 兩大類 。 ～ +176。 母液濃縮回收 LPhe結(jié)晶 ， 所得結(jié)晶如上法重結(jié)晶一次 ， 得藥用 L－ Phe。 ④ 分離純化 上述濾液用 6mol／ L HCl調(diào)至 ～， 減壓 濃縮 至 35L左右 ， 濃縮液于 0℃ 結(jié)晶 過夜 ，濾取結(jié)晶并用 10L冷乙醇洗滌三次 ， 抽干 ,于 80℃ 烘3~4h， 得 L－ Phe粗品 。 另取培養(yǎng) 40～ 50h的 米曲擴大曲 用 6倍量去離子水分兩次抽提 ， 濾去殘渣 。 （ 2） 酶拆分 DLPhe的原理： DLPhe與 醋酸酐反應(yīng)生成 乙酰 DLPhe（ AcDLPhe） ， 氨基?；缚蓪Ｒ恍运?AcLPhe的酰胺鍵生成 LPhe， 而 不水解AcDPhe酰胺鍵 ， 再 利用 LPhe與 AcDPhe在水中溶解度的差異進行分離 。 1%水溶液 pH為 ～ 。 （ 5）檢驗 （ 6）作用與用途 LAsp有助于鳥氨酸循環(huán)，促進氨和 CO2生成尿素，降低血中氨和 CO2,增強肝功能，消除疲勞，用于治療慢性肝炎、肝硬化及高血氨癥。 產(chǎn)品純化與精制 生物反應(yīng)堆 Ⅰ 轉(zhuǎn)化液經(jīng)過濾澄清 ，攪拌下用 1mol／ L HCl調(diào) ， 5℃ 結(jié)晶 過夜 ， 濾取結(jié)晶 ， 用少量冷水洗滌抽干 ， 105℃ 干燥 得 LAsp粗品 。 假單胞菌體固定 取濕菌體 20kg， 加生理鹽水?dāng)噭虿⑾♂屩?40L，另取溶于生理鹽水的 5％ 角叉菜膠 溶液 85L， 兩液均保溫至 45℃ 后混合 ， 冷卻至 5℃ 成膠 。培養(yǎng)結(jié)束后用 1mol／ LHCl調(diào) pH至 ， 于 30℃ 保溫1h， 用轉(zhuǎn)筒式高速離心機離心收集菌體 （ 含 L天冬氨酸 β脫羧酶 ） ， 備用 。 種子培養(yǎng)基 與斜面培養(yǎng)基相同，唯不加瓊脂，250ml三角燒瓶中培養(yǎng)基裝量為 40m1。 氨水調(diào) ,煮沸后過濾 ，500ml三角燒瓶中培養(yǎng)基裝量 50～ 100m1。 （ 2） 微囊型包埋 是用直徑幾十到幾百微米 、 厚約25nm的 半透膜 將酶分子進行包埋固定化的方法 。 常用的 載體 有：纖維素 、 葡聚糖凝膠 、 瓊脂糖 、 聚丙烯酰胺 、 多聚氨基酸 、 乙烯與順丁烯二酸酐共聚物 、聚苯乙烯 、 尼龍等；還有無機載體如多孔玻璃等 。 常用的 載體 有：皂土、硅膠、氧化鋁、磷酸鈣膠和微孔玻璃等無機吸附劑，纖維素、膠原、 賽珞玢 以及火棉膠等 有機吸附劑 。 （ 2） LAsp和 LAla的酶轉(zhuǎn)化反應(yīng) （ 3） 工藝路線 固定化酶 凡限制在一定的空間范圍內(nèi)并能連續(xù)反復(fù)的使用的酶都稱為 固定化酶 。分子式為 C3H7NO2，分子量為 ，結(jié)構(gòu)式為： LAla自水和乙醇中形成菱形結(jié)晶 ， 等電點為 ，分解點為 297℃ ， 在 25℃ 水中溶解度為 ， 在 75℃水中為 ， 在 20℃ 乙醇中為 ， 不溶于丙酮及乙醚 。 〔 α〕 25D 為 +176。 DL蛋氨酸、 DL纈氨酸、 DL苯丙氨酸、 DL色氨酸、 DL丙氨酸及 DL蘇氨酸等分別經(jīng) 氨基?；覆鸱?獲得了相應(yīng)的 L氨基酸，并已投入了工業(yè)化生產(chǎn)。 酶工程法 與直接發(fā)酵法生產(chǎn)氨基酸之反應(yīng) 本質(zhì)相同 ，皆屬酶轉(zhuǎn)化反應(yīng)，但前者為 單酶或多酶的高密度轉(zhuǎn)化 ，而后者為 多酶低密度 轉(zhuǎn)化。 ② 滅菌 、 發(fā)酵 發(fā)酵培養(yǎng)液成分 （ ％ ） 為 淀粉水解糖 ，磷酸二氫鉀 ，硫酸鎂 ，硫酸銨 ，尿素 ，玉米漿 ，毛發(fā)水解廢液 ，甘蔗糖蜜 ， ，滅菌前加甘油聚醚 lL（指 5m3發(fā)酵罐）。 種子培養(yǎng)基成分（ %）為 : 葡萄糖 ，磷酸氫二鉀 ，硫酸鎂 ，硫酸銨 ，玉米漿 ，毛發(fā)水解廢液 ， ～ ， CaCO3 。 L賴氨酸 （ LLysine， LLys） 的制備 （ 1） L賴氨酸的結(jié)構(gòu)和性質(zhì) L賴氨酸存在于所有蛋白質(zhì)中 ， 為 人體必需氨基酸之一 。 次日過濾收集結(jié)晶 ， 抽干 ，于 105℃ 烘房中烘干得 L異亮氨酸成品 。 ⑥ 脫色 、 濃縮 、 中和 上述濃縮物加去離子水至原體積的 1／ 4， 攪拌均勻 ，加 2mol／ L鹽酸調(diào) ， 加上 1％ （ w／ v） 活性炭 ，70℃ 攪拌脫色 1h。 ③ 除菌體 、 酸化 發(fā)酵結(jié)束后 ， 發(fā)酵液加熱至 100℃ 并維持 10min， 冷卻過濾 ， 濾液加工業(yè)硫酸和草酸至 ， 過濾除沉淀 。 滅菌、發(fā)酵 發(fā)酵培養(yǎng)液組成（ %）為 : 硫酸銨 豆餅水解液 ，玉米漿 碳酸鈣 ，淀粉水解還原糖初糖濃 度 。 （ 2） 工藝路線 （ 3） 工藝過程 ① 菌種培養(yǎng) 種子培養(yǎng)基組成（ %）為： 葡萄糖 2 尿素 玉米漿 豆餅水解液 （以干豆餅計） 。 （ 二 ） 發(fā)酵法生產(chǎn)的氨基酸品種及工藝 構(gòu)成動物 、 植物及微生物體所有蛋白質(zhì)的氨基酸種類與構(gòu)型 均無任何差異 ， 但植物體內(nèi)所有氨基酸皆由CO 氨和水合成 ， 動物體除 8種必需氨基酸需從外界攝取外 ， 其余非必需氨基酸均可通過體內(nèi)氨基酸之間的轉(zhuǎn)化或碳水化合物中間代謝物而合成 ， 而 微生物利用碳源 、 氮源及鹽類幾乎可合成所有氨基酸 。 現(xiàn)代生物工程采用 細(xì)胞融合 技術(shù)及 基因重組 技術(shù)改造微生物細(xì)胞，已獲得多種 高產(chǎn)氨基酸 雜種菌株及基因工程菌 。 ★ 初生氨基酸： 微生物通過 固氮作用 、 硝酸還原 及自外界吸收氨使 酮酸氨基化 成相應(yīng)的氨基酸 ， 或微生物通過 轉(zhuǎn)氨酶 作用 ， 將一種氨基酸的氨基轉(zhuǎn)移到另一種 酮酸 上 ， 生成的新氨基酸也稱為 初生氨基酸 。 （ 4） 檢驗 應(yīng)為白色片狀結(jié)晶 ， 含量 ％ ～ %，干燥失重不超過 ％ ， 熾灼殘渣不超過 ％ ， 氯化物不超過 ％ ， 鐵鹽不超過 %， 重金屬不超過％ ， 砷鹽不超過 。 濾餅加 2倍體積 （ w／ v） 去離子水?dāng)噭?， 用 6mol/L 氨水中和至 pH6～ 8， 70～ 80℃ 保溫攪拌 1h， 冷卻過濾 。 加 50L水稀釋后 ， 再濃縮至糊狀 ， 如此 趕酸 三次 ， 冷卻至室溫濾除殘渣 。 L亮氨酸 （ LLeucine， Lleu） 的制備 （ 1） L亮氨酸的結(jié)構(gòu)與性質(zhì) L亮氨酸存在于所有蛋白質(zhì)中，以 玉米麩質(zhì)及血粉 中含量最豐富，其次在 角甲、棉籽餅和雞毛 中含量也較多。 ④ 精制 中和 升溫至 70℃ ， 加活性炭 ～ ， 85℃攪