【正文】 用方法及用量 ， 確定功能學(xué)試驗(yàn)劑量設(shè)計(jì)是否合理 。 ：心肝脾無(wú)毒性損傷 ， 兩個(gè)產(chǎn)品 ， 兩份報(bào)告來(lái)自同一檢測(cè)單位； A4紙寫(xiě)了一大篇 ， 詳細(xì)描述了病理組織結(jié)構(gòu) ， 沒(méi)有一點(diǎn)異常 ， 四個(gè)產(chǎn)品 、 四份報(bào)告來(lái)源同一檢驗(yàn)單位；寫(xiě)一小段也比較詳細(xì)的描述了病理組織結(jié)構(gòu) ，亦無(wú)任何異常三個(gè)產(chǎn)品 、 三份報(bào)告亦來(lái)源于同一檢驗(yàn)單位 。 ：相當(dāng)于推薦量 （ 以 g/Kg BW計(jì) ） 的 、 26和105倍 ， 這是先設(shè)計(jì)再做試驗(yàn) ， 還是先做試驗(yàn)再設(shè)計(jì) ？ 18%， 袋泡茶摻入飼料給予動(dòng)物 。 177。 177。 6 7 8 9 10 177。 177。 177。 （ 正?；温蕿?%） 。 ， 而不進(jìn)行除組氨酸的前處理 。 24小時(shí) 。 5. 配方中僅有單一成分 ， 如人參 、 西洋參 、 蜂王漿不必進(jìn)行全部二階段毒理試驗(yàn) 。 存在的問(wèn)題 ? 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的選擇 1. 配方中含有僅限局部地區(qū)人群食用而又不在 “ 51號(hào) ”名單上的原料 ， 只對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行了兩階段毒理試驗(yàn) ，而未對(duì)原料本身按要求進(jìn)行毒理學(xué)評(píng)價(jià) ， 有的進(jìn)行了評(píng)價(jià)但給予動(dòng)物受試物的方式與實(shí)際食用方式不一樣 ， 如袋泡茶摻在飼料中給予動(dòng)物 。 。 第四部分 保健食品安全性毒理學(xué) 評(píng)價(jià)中存在的問(wèn)題 存在的問(wèn)題 鑒于制訂此程序的歷史背景與目前情況有所不同 ， 因此 ， 對(duì)保健食品的安全性評(píng)價(jià)時(shí) ， 出現(xiàn)了選擇毒理試驗(yàn)的項(xiàng)目 、 劑量 、 樣品前處理等問(wèn)題 ， 現(xiàn)就上述問(wèn)題一并提出供討論 。 新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)要求 新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)要求 新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)項(xiàng)目的選擇 ⑤ 微生物類(lèi)新原料除按上述要求進(jìn)行安全性毒理學(xué)試驗(yàn)外，還應(yīng)進(jìn)行以下試驗(yàn)： 1）菌種毒力試驗(yàn)； 2）耐藥性試驗(yàn)； 3）有可能產(chǎn)生抗菌素、真菌毒素或其他活性物質(zhì)的菌種，應(yīng)進(jìn)行有關(guān)抗菌素、真菌毒素或其他活性物質(zhì)的檢測(cè)； 4）菌種代謝產(chǎn)物分析及其不產(chǎn)生有毒有害作用的試驗(yàn)。 保健食品新原料定義 在已批準(zhǔn)的保健食品中使用過(guò)，或衛(wèi)生部已批準(zhǔn)為新資源食品的原料，符合以下情況的仍按新原料進(jìn)行管理： ?未列入國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局公布的可用于保健食品的物品名單； ?尚未列入衛(wèi)生部公布或批準(zhǔn)的食品新資源或新資源食品名單內(nèi)； ?衛(wèi)生部已批準(zhǔn)為食品新資源或新資源食品，但保健食品注冊(cè)申請(qǐng)人與食品新資源或新資源食品生產(chǎn)批件中載明的申報(bào)單位不一致。 （ 5）未按規(guī)定提供安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)資料的。 （ 1）毒理學(xué)評(píng)價(jià)的結(jié)果表明產(chǎn)品在推薦劑量下對(duì)人體具有一定的毒性，存在安全性問(wèn)題。 ，補(bǔ)充資料后建議批準(zhǔn)： （ 1）檢驗(yàn)報(bào)告格式不規(guī)范，需要重新出具檢驗(yàn)報(bào)告毒理學(xué)試驗(yàn)報(bào)告。 在對(duì)保健食品進(jìn)行最后評(píng)價(jià)時(shí)，必須綜合考慮受試物的原料來(lái)源、理化性質(zhì)、毒性大小、代謝特點(diǎn)、蓄積性、接觸的人群范圍、食品中的使用范圍、人的可能攝入量及保健功能等因素，確保其對(duì)人體健康的安全性。 對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的某些指標(biāo)的異常改變，在結(jié)果分析評(píng)價(jià)時(shí)應(yīng)注意區(qū)分是乙醇本身還是其它成分的作用。 對(duì)實(shí)驗(yàn)中某些指標(biāo)的異常改變，在結(jié)果分析時(shí)要注意區(qū)分是生理學(xué)表現(xiàn)還是受試物的毒性作用。 符合以上三項(xiàng)中的情況之一，并經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可認(rèn)為致癌試驗(yàn)陽(yáng)性。 其它試驗(yàn)結(jié)果判斷 ? 慢性毒性試驗(yàn) ： 以 LD50或 30天喂養(yǎng)試驗(yàn)的最大未觀察到有害作用劑量設(shè)計(jì)受試物各劑量組，未見(jiàn)有毒性作用。在 50倍至 100倍之間需進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)，小于 50倍需放棄。 30天喂養(yǎng)試驗(yàn) 試驗(yàn)結(jié)果的判定 ： 對(duì)于只要求進(jìn)行一、二階段試驗(yàn)者，最大未觀察到有害作用劑量 ≥ 人可能攝入量的 100倍，綜合其它試驗(yàn)結(jié)果可初步做出安全性評(píng)價(jià)。每周1次體重及 2次食物攝入量，計(jì)算食物利用率。低劑量應(yīng)不出現(xiàn)任何毒作用，同時(shí)在這二劑量之間設(shè)幾個(gè)中間劑量組。染毒期間每日密切觀察動(dòng)物的毒性反應(yīng)，染毒結(jié)束后進(jìn)行大體解剖、血生化及病理檢查，以此觀察重復(fù)喂食不同劑量的受試物對(duì)動(dòng)物引起的有害作用。 遺傳毒性試驗(yàn)組合 試驗(yàn)結(jié)果的判定 ： 如三項(xiàng)致突變?cè)囼?yàn)（ Ames試驗(yàn)，微核或骨髓細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)，精子畸形或睪丸染色體畸變?cè)囼?yàn)）中，體外或體內(nèi)有一項(xiàng)或以上陽(yáng)性，一般應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。第 12～ 14d采樣，以觀察作用于前細(xì)線期引起的精母細(xì)胞染色體畸變效應(yīng)。 小鼠精子畸形試驗(yàn) 時(shí)間周期 ：一般為 7周 35天適應(yīng)期 小鼠經(jīng)口連續(xù)染毒 5天，于首次給樣后的 35天處死動(dòng)物 取兩側(cè)附睪，收集精子，滴片，染色，鏡檢 劑量設(shè)計(jì) ：同骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn) 小鼠精子畸形試驗(yàn) 觀察及評(píng)價(jià)指標(biāo) ： 每只動(dòng)物檢查 1000個(gè)精子 ，記錄精子畸形數(shù)目及類(lèi)型。 小鼠精子畸形試驗(yàn) 目的 ： 檢測(cè)整體動(dòng)物體內(nèi)精子畸形發(fā)生率，以評(píng)價(jià)受試物對(duì)體內(nèi)生殖細(xì)胞的致突變作用。 哺乳動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn) 時(shí)間周期 ：一般為 3周 35天適應(yīng)期 小鼠或大鼠經(jīng)口染毒 24次，每次間隔 24h，在末次染毒 1824h進(jìn)行取材（取材前 24h，腹腔注射秋水仙素）。 哺乳動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn) 目的 ：檢測(cè)受試物對(duì)整體動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變的致突變性，以評(píng)價(jià)其致突變的可能性。同時(shí)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照組和溶劑對(duì)照組。 骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn) 時(shí)間周期 ：一般為 2周 35天適應(yīng)期 小鼠經(jīng)口染毒， 30h給受試物法 取胸骨或股骨，收集骨髓，涂片，染色，鏡檢 劑量設(shè)計(jì) ：至少設(shè)置 3個(gè)劑量，最高劑量組為動(dòng)物出現(xiàn)嚴(yán)重中毒表現(xiàn)和 /或個(gè)別動(dòng)物出現(xiàn)死亡的劑量。 結(jié)果評(píng)價(jià)（摻入法）： 受試物組回變菌落數(shù)增加一倍以上（即回變菌落數(shù)≥2 未處理對(duì)照組數(shù)），并有劑量反應(yīng)關(guān)系或有可重復(fù)的陽(yáng)性反應(yīng)，即可判試驗(yàn)陽(yáng)性。最低劑量為 ；最高劑量為 5mg/皿，或最大溶解劑量，最大飽和劑量以及最小毒性劑量。 大體尸檢結(jié)果：如果發(fā)生死亡動(dòng)物 急性毒性（ LD50）劑量分級(jí)表 級(jí) 別 大鼠口服 LD50， mg/kg 相當(dāng)于人的致死量 mg/kg g/人 極毒 1 稍嘗 劇毒 150 5004000 中等毒 51500 400030000 5 低毒 5015000 30000250000 50 實(shí)際無(wú)毒 500115000 250000500000 500 無(wú)毒 15000 500000 2500 急性經(jīng)口毒性試驗(yàn) 試驗(yàn)結(jié)果的判定： 1. LD50＜人可能攝入量的 100倍，放棄；反之繼續(xù)下一步試驗(yàn)。 原理： 急性毒性：經(jīng)口一次性、 24h內(nèi)多次給予，短時(shí)間內(nèi)的毒性反應(yīng)。 （ 2）大豆蛋白、乳清蛋白 如質(zhì)量、工藝等符合食品標(biāo)準(zhǔn)和安全要求，允許去除。 按工藝要求。 《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》 清潔級(jí)或清潔級(jí)以上 動(dòng)物合格證號(hào)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室合格證號(hào) 大鼠： 10 ml/kg?BW（若以水為溶劑，推薦 20 ml/kg?BW） 小鼠： 20ml/kg?BW 樣品的預(yù)處理原則 應(yīng)選擇適合于受試動(dòng)物的溶劑、乳化劑、助懸劑，要求無(wú)毒、與受試物不發(fā)生反應(yīng)、穩(wěn)定性好。保健食品毒理和功能 檢驗(yàn)及評(píng)價(jià) 仲 偉 鑒 上海市疾病預(yù)防控制中心 主要內(nèi)容提綱 ? 中國(guó)保健食品簡(jiǎn)介 ? 保健食品安全性毒理學(xué)檢驗(yàn)與評(píng)價(jià) ? 保健食品新原料安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)原則 ? 保健食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)中存在的問(wèn)題 ? 保健食品功能性檢驗(yàn)與評(píng)價(jià) ? 保健食品功能評(píng)價(jià)方法更改情況 第一部分 中國(guó)保健食品簡(jiǎn)介 第二部分 保健食品安全性毒理學(xué) 檢驗(yàn)及評(píng)價(jià) 主 要 內(nèi) 容 ? 檢驗(yàn)評(píng)價(jià)依據(jù) ? 審評(píng)基本要求 ? 選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的基本原則 ? 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇 ? 樣品的預(yù)處理原則 ? 毒理學(xué)試驗(yàn)項(xiàng)目要點(diǎn)介紹 ? 毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)時(shí)應(yīng)考慮的問(wèn)題 ? 審評(píng)結(jié)論的判定 毒性及功能檢驗(yàn)評(píng)價(jià)依據(jù) 1996年 3月衛(wèi)生部《保健食品的管理方法》 保健食品的標(biāo)準(zhǔn)、功能評(píng)價(jià)、審批程序和監(jiān)督管理辦法 1996年 7月 GB15193《食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和方法》 衛(wèi)生部《保健食品功能學(xué)評(píng)價(jià)程序和檢驗(yàn)方法》 僅包含了 12項(xiàng)功能檢驗(yàn)及評(píng)價(jià)方法 2023年 7月 衛(wèi)生部《保健食品功能學(xué)評(píng)價(jià)程序和檢驗(yàn)方法》 可受理和評(píng)價(jià)的功能調(diào)整到 31項(xiàng) 2023年 2月衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》 將功能學(xué)、毒理學(xué)、功效成分及衛(wèi)生指標(biāo)檢驗(yàn)評(píng)價(jià)方法三者合一 審評(píng)的基本要求 1. 配方 原（輔）料、用量、理化性質(zhì) 2. 劑量 食用方法及用量 3. 工藝 規(guī)格化產(chǎn)品 符合配方、工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 4. 批號(hào) 注意批號(hào)是否一致 ,益生菌、奶制品等保質(zhì)期短的除外 1. 毒理學(xué)評(píng)價(jià)的四個(gè)階段 第一階段：急性毒性試驗(yàn) 經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)： LD50，聯(lián)合急性毒性，一次最大耐受量試驗(yàn) 第二階段：遺傳毒性試驗(yàn)， 30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，傳統(tǒng)致畸試驗(yàn) 遺傳毒性試驗(yàn)：原核細(xì)胞和真核細(xì)胞，體內(nèi)試驗(yàn)和體外試驗(yàn)相結(jié)合 Ames或基因突變?cè)囼?yàn)；微核試驗(yàn)或染色體畸變?cè)囼?yàn)；精子畸變?cè)囼?yàn)等 第三階段：亞慢性毒性試驗(yàn) 90天喂養(yǎng)試驗(yàn)、繁殖試驗(yàn)、代謝試驗(yàn) 第四階段：慢性毒性試驗(yàn)（包括致癌試驗(yàn)） 選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的基本原則 ? 以普通食品和衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源物質(zhì)為原料生產(chǎn)的； 1）以傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)且食用方式與傳統(tǒng)方式相同的 2）以水提物配制生產(chǎn)、服用量為原料常規(guī)用量，且資料未提示具有不安全性 ? 用已列入營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑或營(yíng)養(yǎng)素補(bǔ)充劑名單的營(yíng)養(yǎng)素化合物為原料的，如其原料來(lái)源、生產(chǎn)工藝和產(chǎn)品質(zhì)量均符合國(guó)家有關(guān)要求； 選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的基本原則 3. 需進(jìn)行一階段和三項(xiàng)致突變毒性試驗(yàn)的保健食品 屬于普通食品和衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源的物質(zhì)且用水提以外的其它常用工藝生產(chǎn)的： （ 1）服用量與常規(guī)用量相同 急性毒性、三項(xiàng)致突變?cè)囼?yàn) （ 2）服用量大于常規(guī)用量 還需加做 30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)和第三階段毒性試驗(yàn) 選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的基本原則 選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的基本原則 4. 需進(jìn)行一、二階段毒性試驗(yàn)的保健食品 ? 以普通食品和衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源物質(zhì)以及允許用作保健食品的物質(zhì)以外的動(dòng)植物或動(dòng)植物提取物、微生物、化學(xué)合成物等為原料生產(chǎn)的保健食品，原則上須進(jìn)行第一、二階段的毒性試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行下一階段的毒性試驗(yàn)。使 ? 用說(shuō)明書(shū)等有關(guān)資料 ? 受試物應(yīng)符合既定配方和生產(chǎn)工藝的規(guī)格化產(chǎn)品 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇及給樣量 ，合理選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 常用大鼠和小鼠，品系不限，推薦使用近交系。 濃縮方法不應(yīng)破壞其有效成份，常用的有 60℃ ～ 70℃ 減壓或常壓蒸發(fā)、冷凍干燥。 （ 1）有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值：按設(shè)計(jì)量進(jìn)行飼料的營(yíng)養(yǎng)成份調(diào)整，提供詳細(xì)的說(shuō)明。了解毒性強(qiáng)度、性質(zhì)和可能的靶器官，為進(jìn)一步的毒性試驗(yàn)提供劑量和觀察指標(biāo)的選擇依據(jù)。 急性經(jīng)口毒性試驗(yàn) 時(shí)間周期 ：一般為 3周 35天，