《生物分離工程電泳》ppt課件-全文預(yù)覽
【正文】 式塑料外殼 膠體 1 mm 厚 度 20 不連續(xù)凝膠電泳系統(tǒng)組成 1 電泳系統(tǒng) pH 膠體濃度 緩沖液 上 層 (負極 ) 緩沖液 2 樣 本溶液 3 濃縮層膠體 4 分 離層膠體 膠 體 5 下 層 (正 極 ) 緩沖液 TrisHCl TrisHCl Trisglycine Trisglycine Trisglycine 5% ~20% ● 膠體不連續(xù)性有濃縮樣品的作用 21 濃縮層內(nèi)的等速電泳 22 濃縮層膠體中的三個主要作用角色 Glycine: Negative charged No charge Chloride ion: Proteins: 小分子 大分子 23 SDS Gel Elecrtophoresis 24 SDSPAGE測定蛋白質(zhì)相對分子量 ? PAGE凝膠電泳分離、檢測蛋白質(zhì) 根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小、形狀及凈電荷 在 PAGE中加入一定量的 SDS 蛋白質(zhì)分子的遷移速度主要取決于分子量大小 25 SDSPAGE測定蛋白質(zhì)相對分子量 ? SDS：陰離子去污劑、水溶液中以單體和分子團存在。 lgMw=b*mR+K 蛋白質(zhì)分子量在 15000202200之間時，電泳遷移率與分子量的對手呈線性關(guān)系： 28 樣品分子量的確定 相對遷移距離 =蛋白質(zhì)遷移距離 /燃料遷移距離 以標準蛋白質(zhì)相對分子量的對數(shù) (lgMr)為縱座標，相對遷移距離為橫座標作圖，得到標準曲線。 26 SDSPAGE測定蛋白質(zhì)相對分子量 ? 操作：
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