《生物分離工程電泳》ppt課件-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 分離膠 12% 濃縮膠 5% 加樣 電泳 染色、脫色 凝膠干燥 確定分子量 27 樣品分子量的確定 ? M為蛋白質(zhì)分子量、 m相對(duì)遷移率、 b為斜率、 K為截距。 16 Example 1 計(jì)劃在 ，用 凝膠電泳 的方法將 兩種胞外蛋白質(zhì) 分離開來，這兩種蛋白質(zhì)的 遷移率 分別為 ?105和 ?105cm2/。 聚丙烯酰胺凝膠 常用。 ? 能破壞蛋白質(zhì)分子之間及與其他分子間的非共價(jià)鍵，形成帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì) SDS復(fù)合物，使蛋白質(zhì)喪失了原有電荷狀態(tài)，形成僅保持原有分子大小為特征的負(fù)離子團(tuán)。 29 三種不同性質(zhì)蛋白質(zhì)的電泳比較 Molecular Weight pI Native PAGE SDS PAGE Mobility Protein Quaternary Structure X Y Z Tetramer (40,000)x4 Monomer 88,000 Monomer 60,000 Fast Slow Medium Slow Upward Fast X Y Z + 30 單元體分子量的測(cè)定 ： SDSPAGE kD 330 220 67 60 36 kD 94 67 43 30 Mol mass kD 300 200 100 80 60 50 40 30 20 10 Migration (Rf) Pharmacia: Molecular Markers for electrophoresis
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