《分離工程第六章》ppt課件-全文預覽
【正文】 孔結構，用于抗生素，維生素 B12分離濃縮。通常遵循以下規(guī)律： ? 非極性吸附劑可從極性溶劑中吸附非極性溶質(zhì)； ? 極性吸附劑可從非極性溶劑中吸附極性物質(zhì)； ? 中等極性吸附劑兼有以上兩種能力 吸附劑對溶質(zhì)的吸附作用按吸附作用力區(qū)分主要有三類： 物理吸附：吸附劑、吸附質(zhì)之間范德華力。 大孔網(wǎng)狀吸附樹脂的種類 非極性吸附樹脂 ：苯乙烯交聯(lián)而成，交聯(lián)劑為二乙烯苯，又稱芳香族吸附劑。 活性炭稱吸附劑。 特點 ? 優(yōu)點 ?采用恒定洗脫法，操作條件溫和，收率接近 100％； ?介質(zhì)不需清洗或再生，易實施循環(huán)操作，提高產(chǎn)品純度； ?脫鹽比透析速度快，精度高；比超濾剪應力小，活性收率高； ?分離機理簡單，操作參數(shù)少，規(guī)模放大容易。 ?還可用于醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)中無熱原水的制備及低分子生物制劑中抗原性雜質(zhì)的除去。 ? 空隙體積：層析柱中凝膠之間空隙的體積。 ? 凝膠粒徑：多用篩目或微米表示。 ? 其他 ?TSK凝膠，利用親水性高分子合成制備，機械強度較高，經(jīng)化學修飾后也常用于IEC和 AC； ?Superdex凝膠，將葡聚糖共價交聯(lián)到高度交聯(lián)的瓊脂糖珠體上制備的剛性凝膠，分離精度高，用于高效液相層析； ?Superose凝膠，瓊脂糖經(jīng)二次交聯(lián)制備的剛性凝膠，常用于高效 IEC和 AC。 操作 ? 一般采用恒定洗脫法，即采用組成一定的洗脫液進行洗脫展開。如果溶質(zhì)的特性非常相似或非常不同這種形式的洗脫很少用，這種情況，有一些組分會快速洗脫而另一些會強烈地阻滯。 迎頭分析（前流分析法） 將混合物溶液（料液）連續(xù)通過色譜柱，只有吸附力最弱的組分以純品狀態(tài)最先自柱中流出，其它各組分都不能達到分離。 固定相分配系數(shù)大的后被洗脫。 應用 ? 物質(zhì)成分的定量分析與檢測； ? 生物物質(zhì)的制備、分離和純化。 初步純化技術： 超濾，離心，沉淀，溶劑萃取，膜分離，吸附等。屬高度純化技術。 氣相色譜 液相色譜 特點 ? 分離精度高、設備簡單、操作方便。 色譜系統(tǒng)的基本組成 生物分離主要用柱層析，柱層析處理量大。 ? ?? ?? ?????? ?M P aM P aM P a40~~高壓中壓低壓?主要用于成分分析常用于大量制備分離???分離操作方式 根據(jù)分離操作方式不同分為 : ?????頂替展開迎頭分析洗脫展開洗脫展開（洗脫層析） 料液中的溶質(zhì)根據(jù)其在固定相和流動相間分配行為的不同，在層析柱出口處被展開形成相互分離的層析峰。 頂替展開 可以選用不同的洗脫方案 最簡單的是無梯度洗脫：即在整個色層分離中，使用一種恒定組分的洗脫液（恒定的洗脫能力）。 分配機理 根據(jù)溶質(zhì)與固定相之間的相同作用機理，液相層析法可分為： ? ?? ?? ?? ????????H I CRPCI E CG F C疏水性相互作用層析反相層析離子交換層析凝膠過濾層析第二節(jié) 凝膠過濾層析 一、原理與操作 原理 ? 利用凝膠粒子（凝膠過濾介質(zhì)）為固定相，根據(jù)料液中溶質(zhì)相對分子質(zhì)量的差別進行分離的液相層析法。 ? 瓊脂糖凝膠 ?Sepharose，常用，但機械強度較低； ?Sepharose CL，用環(huán)氧氯丙烷交聯(lián)制備，機械強度較高； ?此類凝膠經(jīng)化學修飾后用于 IEC、HIC和 AC。 ?溶脹率：溶脹后每克干凝膠吸收水分的百分數(shù)。 ? 床體積： 1g干凝膠溶脹后所占有的體積。 ?用于蛋白質(zhì)、多肽、脂質(zhì)、抗生素、糖類、核酸及病毒等生物物質(zhì)的分離純化。 ?凝膠主體還可以加入其它交換基團，如磺酸基，羧甲基，二乙基氨基乙基等，這些物質(zhì)既有分子篩效應又具有一定的交換性能 Desalting proteins proteins salts ? 相對分子質(zhì)量的測定 ?在分級范圍內(nèi)蛋白質(zhì)的分配系數(shù)（或洗脫體積）與相對分子質(zhì)量的對數(shù)成正比 . ?m(v)=ablgMr. ?故 GFC可用于未知蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的測定。 活性炭：脫色，除臭等。 但價格昂貴，吸附效果易受流速以及溶質(zhì)濃度等因素的影響。 大孔吸附樹脂的吸附機理 非離子型共聚物，借助于 范德華力 從溶液中吸附各種有機物，其吸附能力與樹脂的化學結構、物理性能以及與溶質(zhì)、溶劑的性質(zhì)有關。離子交換的吸附可通過調(diào)節(jié) pH或提高離子強度的方法洗脫。 具體又可以分為：強陽、弱陽
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