《生物免疫分析技術(shù)》ppt課件-全文預(yù)覽
【正文】 物＆寄生蟲抗原、激素、維生素、酶、藥物等），而標(biāo)記抗原使將已知的上述物質(zhì)標(biāo)記上放射性同位素，具有示蹤作用。然后將熒光素標(biāo)記的抗體作為標(biāo)準(zhǔn)試劑，用于鑒定未知的抗原，可在熒光顯微鏡下檢查呈現(xiàn)熒光的特異性抗原抗體復(fù)合物及其存在部位。標(biāo)記和未標(biāo)記的抗原競爭與抗體進(jìn)行結(jié)合的現(xiàn)象，成為競爭性抑制作用。缺點(diǎn)是需要特殊的儀器設(shè)備和一定的防護(hù)條件，而且有些同位素標(biāo)記物的半衰期較短以及試驗廢物難以處理，對環(huán)境造成放射性污染?？乖贵w反應(yīng)的這種特異性使免疫測定能在一非常復(fù)雜的蛋白質(zhì)化合物（例如血清）中測定某一特定的物質(zhì)，而不需先分離待檢物。 特點(diǎn)二：特異性 其特異性來自抗體或抗原的選擇性。眾所周知 , 酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng) ，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。 對照管由于只加酶標(biāo)抗原，與固相抗體充分結(jié)合，故分解底物顯色深；測定管的顯色程度則隨待測抗原和酶標(biāo)抗原與固相抗體競爭結(jié)合的結(jié)果而異。 （二）間接法 步驟： A 將已知可溶性抗原吸附于載體（聚苯乙烯板或聚乙苯乙烯小珠），經(jīng)溫育后清洗； B 加入待檢稀釋血清，若血清中有相應(yīng)特異性抗體存在則與吸附的抗原結(jié)合，溫育后清洗； C 加入酶標(biāo)記的抗球蛋白抗體，此時酶標(biāo)記抗抗體與吸附的抗原抗體復(fù)合物結(jié)合，溫育后清洗； D 加入酶作用底物（或稱基質(zhì)），酶分解底物并顯色，用光電比色計測定底物顯色深淺，即可推知抗體量。 酶及其底物 酶結(jié)合物是酶與抗體或抗原 , 半抗原在交聯(lián)劑作用下聯(lián)結(jié)的產(chǎn)物。 在這種測定方法中有 3種必要的試劑： ①固相的抗原或抗體（ 免疫吸附劑） ②酶標(biāo)記的抗原或抗體（ 標(biāo)記物） ③酶作用的底物（ 顯色劑） ? 測量時，抗原（抗體）先結(jié)合在固相載體上，但仍保留其免疫活性， ? 然后加一種抗體（抗原）與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物（標(biāo)記物），此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性， ? 當(dāng)偶聯(lián)物與固相載體上的抗原（抗體）反應(yīng) 結(jié)合后，再加上酶的相應(yīng)底物，即起催化水解或氧化還原反應(yīng)而呈顏色。
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