【正文】 39批 1344萬(wàn)支。 第二代乙肝疫苗， 將編碼乙型肝炎表面抗原的基因在哺乳動(dòng)物細(xì)胞或酵母菌中高效表達(dá)，得到乙肝基因工程疫苗，接種者中約有 10%不產(chǎn)生應(yīng)答反應(yīng)；另有 5%～ 15%接種者屬低應(yīng)答者，低應(yīng)答者不能獲得完全保護(hù)作用。 5 疫苗的研制策略 ?當(dāng)代疫苗 ?滅活疫苗 ?殺死的病原體 ?減活疫苗 ?活的，無(wú)毒力的病原體 生產(chǎn)過(guò)程 ?組織培養(yǎng)病原體 ?純化病原體 ?失活或減活 ?并沒失去激發(fā)免疫的能力 局限性 ?不是所有的病原體都能用組織培養(yǎng) ?細(xì)胞培養(yǎng)價(jià)格昂貴 ?產(chǎn)量、生產(chǎn)率低 ?需要特殊的安全預(yù)防措施 ?失活或減活都必須 100％ ?保存期限短，需低溫保藏 ?不能預(yù)防所有的疾病 rDNA技術(shù)對(duì)疫苗研究的促進(jìn) ?減活疫苗通過(guò)清除致病基因?qū)崿F(xiàn) ?基因工程疫苗，無(wú)致病性載體攜帶致病病原體的抗原性決定簇 ?非組織培養(yǎng)，克隆基因和過(guò)量表達(dá)蛋白作為疫苗（亞單位疫苗） 多種基因工程疫苗研制策略 ?亞單位疫苗 ?肽疫苗 ?減活疫苗 ?DNA疫苗 亞單位疫苗 ?通常是整個(gè)病原體制備減活或滅活疫苗 ?免疫反應(yīng)的激發(fā)通常是通過(guò)病原體的外 殼蛋白起作用 動(dòng)物病毒 ？ 是不是需要完整的病原體 亞單位疫苗 ?激發(fā)免疫反應(yīng)僅僅需要病原體外殼蛋白 ?利用病原體的某些成分而不是整個(gè)病原體是“亞基”疫苗。從疫苗的角度看是由疫苗的抗原決定的。目前常用的有 鋁佐劑 和 油制佐劑 。 抗原 ，是疫苗最主要的有效活性成分，它決定了疫苗的特異免疫原性。 ? 凡是用細(xì)菌免疫馬或其他大動(dòng)物所取得的免疫血清，稱為抗菌血清。 乙型肝炎表面抗原的各種合成肽段 ? 4）基因工程疫苗 利用基因工程構(gòu)建重組基因序列，表達(dá)免疫原性強(qiáng)、無(wú)毒性的多肽制成的疫苗。 ? ? 1）疫苗 （ 1）活疫苗：減毒活疫苗（卡介苗） （ 2）死疫苗（百日咳、霍亂等） ? 2）類毒素 破傷風(fēng)類毒素、白喉類毒素 ? 3）自身疫苗 由病人自身病灶中分離出的病原體制成的死疫苗。 2）抗病毒血清 用病毒作抗原免疫動(dòng)物制備的含有抗體的 血清 生物制品。 ?３ ８０年代病毒野毒株 HN蛋白基因有漂移，其中 H蛋白和疫苗株相比有５６個(gè)核苷酸變異， N蛋白和疫苗株相比有７６個(gè)核苷酸變異。因此疫苗生產(chǎn)單位已經(jīng)適應(yīng)這種情況。 甲肝滅活疫苗 ?甲肝病毒分離后用細(xì)胞株增殖，再用甲醛滅活、純化。 ?20世紀(jì) 80年代后制成增效脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗，接種 3個(gè)劑量后中和抗體達(dá) 99100%。 ?滅活疫苗是將病原體培養(yǎng)繁殖后殺死病原體，再進(jìn)行純化處理使之完全失去感染性，保留病原體的免疫原性。 ?它引起機(jī)體感染但不發(fā)生臨床癥狀。 2 用于健康人群，尤其是兒童。如果將多種病原體的有關(guān)基因插入載體，則成為可表達(dá)多種保護(hù)性抗原的多價(jià)疫苗。 重組抗原疫苗 (rebinant antigen vaccine) 是利用 DNA重組技術(shù)制備的只含保護(hù)性抗原的純化疫苗。 優(yōu)點(diǎn)：免疫效果高， 不良反應(yīng)少 （ 2）合成肽疫苗 (synthetic peptide vaccine) 將具有保護(hù)性免疫力的人工合成肽與適當(dāng)載體結(jié)合后，再加入佐劑制成的疫苗。 優(yōu)點(diǎn)：一次免疫即可獲得長(zhǎng)久免疫力，類似自然狀態(tài)下的輕型或隱性感染。 人工自動(dòng)免疫類生物制品 疫苗 （ Vaccine）：細(xì)菌，病毒，螺旋體，立克次體和類毒素 等抗原性生物制品統(tǒng)稱為疫苗。主動(dòng)免疫包括體液免疫（抗體）細(xì)胞免疫，如麻疹疫苗、脊髓灰質(zhì)炎疫苗、百白破疫苗等。 自 然 自 動(dòng) 免 疫：患 傳 染 病，隱 性 感 染自 動(dòng) 免 疫人 工 自 動(dòng) 免 疫：接 種 疫 苗，類 毒 素自 然 被 動(dòng) 免 疫：經(jīng) 胎 盤，初 乳特 異 性 免疫 被 動(dòng) 免 疫人 工 被 動(dòng) 免 疫：注射抗毒素，丙種球蛋白，細(xì)胞因子人工免疫 人為的給機(jī)體輸入抗原以調(diào)動(dòng)機(jī)體的免疫系統(tǒng)，或直接輸入免疫血清，使獲得某種特殊抵抗力，用以預(yù)防或治療某些疾病者，稱 人工免疫 。 免疫學(xué)基礎(chǔ) 機(jī)體的抗感染免疫 ? 1)先天性免疫 （非特異性免疫） 包括： ① 體表屏障 ，如皮膚粘膜屏障； ② 血腦屏障 ，防御病原微生物及其毒性產(chǎn)物從血流侵入腦組織； ③ 細(xì)胞吞噬作用 ； ④ 正常體液和組織中的抗菌物質(zhì) 。 ?(2)毒素 有內(nèi)毒素和外毒素兩種，均有強(qiáng)烈毒性。 ? ： 如人血白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血因子（天然或重組的）、紅細(xì)胞濃縮物等。 ? 第三代疫苗 —— 核酸疫苗，調(diào)動(dòng)細(xì)胞免疫和體液免疫兩個(gè)系統(tǒng)，追求最佳效果。巴斯德將此歸納為對(duì)動(dòng)物接種什么細(xì)菌就可以使其不受該病菌感染的 免疫接種原理 ，從而奠定了疫苗的理論基礎(chǔ)。 ? 最早的弱毒活病毒疫苗。 ? 包括各種 疫苗、抗血清、抗毒素、類毒素、免疫調(diào)節(jié)劑、診斷試劑 等。第九章 生物制品 ?目的要求： 掌握生物制品概念和分類，疫苗定義和制造方法、研制策略；熟悉生物制品的一般制造方法、質(zhì)量要求與檢定；了解重要生物制品的制備方法，核酸疫苗的制備方法。 ?一、生物制品概述 ?二、疫苗研究及其研制策略 ?三、生物制品的一般制造方法、質(zhì)量要求 與檢定 ?四、重要生物制品的制備 ?五、核酸疫苗 第一節(jié)：生物制品概述 ?1 概念及發(fā)展沿革 ?2 生物制品的分類 ?3 制造生物制品的生物學(xué)及免疫學(xué)基礎(chǔ) 1 概念及發(fā)展沿革 ? 概念 ? 凡是從微生物及其代謝產(chǎn)物、原蟲、動(dòng)物毒素、人或動(dòng)物的血液或組織直接加工制成，或用現(xiàn)代生物技術(shù)、化學(xué)方法制成，作為預(yù)防、治療、診斷特定傳染病或其他有關(guān)疾病的 免疫制劑 。經(jīng)過(guò)多次實(shí)驗(yàn)，琴納于 1796年從一擠奶女工感染的痘皰中，取出皰漿，接種于 8歲男孩的手臂上，然后讓其接種天花膿皰液，結(jié)果該男孩并未染上天花，證明其對(duì)天花確實(shí)具有了免疫力。 ? 1870年 ，法國(guó)科學(xué)家 巴斯德 發(fā)明了第一個(gè)細(xì)菌減毒活疫苗 —— 雞霍亂疫苗。 天然或重組成分為主。 ? ： 由特定抗原免疫動(dòng)物所得血漿制成的抗毒素或免疫血清，如破傷風(fēng)抗毒素、抗狂犬病血清等，用于治療或被動(dòng)免疫預(yù)防。 ?(1)熱原質(zhì) 主要是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的脂多糖，注入體內(nèi)能引起發(fā)熱反應(yīng)。 ?常用的幾個(gè)概念： 消毒；滅菌；無(wú)菌；防腐。 包括自動(dòng)免疫和被動(dòng)免疫。 主動(dòng)免疫和被動(dòng)免疫互補(bǔ)性免疫方法 ?主動(dòng)免疫：抗原接種人體產(chǎn)生主動(dòng)免疫，一般一個(gè)月內(nèi)產(chǎn)生，持續(xù)數(shù)年。如抗狂犬血清（免疫蛋白）、破傷風(fēng)抗毒素（ TAT）、丙種球蛋白、乙肝高效價(jià)丙球。 優(yōu)點(diǎn)：主要誘導(dǎo)特異性抗體產(chǎn)生，安全 缺點(diǎn)：不能繁殖，需多次刺激，注射局部和全身反應(yīng)嚴(yán)重 2）減毒活疫苗 （ liveattenuated Vaccine） 用人工定向變異或從自然界篩選得到的 毒力高度減弱或基本無(wú)毒 的病原微生物制成的預(yù)防制劑。 白百破：白喉類毒素 + 百日