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生物免疫分析技術(shù)ppt課件-免費閱讀

2025-06-05 12:35 上一頁面

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【正文】 ? 將標記抗原( Ag*)和未標記抗原( Ag)與特異性抗體( Ab)相混合,結(jié)果形成標記的和未標記的抗原抗體復合物。 例如乙肝病毒中的表面抗原( HBsAg)、 e抗原( HBeAg)和核心抗體( HBcAg),雖來源于同一病毒,但僅與其相應的抗體結(jié)合,而不與另外兩種抗體反應。 特點 特點一:靈敏性 該測定法的靈敏度來自酶。 間接法是檢測抗體最常用的方法,其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體,故稱為間接法。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。 免疫的原理 Ag + Ab Ag- Ab 特異性、靈敏性 在 Ag, Ab反應中,用容易示蹤的化學物質(zhì)標記一種反應物,以了解反應是否發(fā)生,發(fā)生部位,以及發(fā)生的程度(即對未知成分的樣品進行定性、定位及定量分析)。 酶聯(lián)免疫法 ? 免疫酶技術(shù): 把抗原抗體的免疫反應和酶的高效催化作用原理有機地結(jié)合起來。 在這種測定方法中有 3種必要的試劑: ①固相的抗原或抗體( 免疫吸附劑) ②酶標記的抗原或抗體( 標記物) ③酶作用的底物( 顯色劑) ? 測量時,抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,但仍保留其免疫活性, ? 然后加一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標記物),此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性, ? 當偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應 結(jié)合后,再加上酶的相應底物,即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。 (二)間接法 步驟: A 將已知可溶性抗原吸附于載體(聚苯乙烯板或聚乙苯乙烯小珠),經(jīng)溫育后清洗; B 加入待檢稀釋血清,若血清中有相應特異性抗體存在則與吸附的抗原結(jié)合,溫育后清洗; C 加入酶標記的抗球蛋白抗體,此時酶標記抗抗體與吸附的抗原抗體復合物結(jié)合,溫育后清洗; D 加入酶作用底物(或稱基質(zhì)),酶分解底物并顯色,用光電比色計測定底物顯色深淺,即可推知抗體量。眾所周
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