生物免疫分析技術(shù)ppt課件-免費(fèi)閱讀
【正文】 ? 將標(biāo)記抗原（ Ag*）和未標(biāo)記抗原（ Ag）與特異性抗體（ Ab）相混合，結(jié)果形成標(biāo)記的和未標(biāo)記的抗原抗體復(fù)合物。 例如乙肝病毒中的表面抗原（ HBsAg）、 e抗原（ HBeAg）和核心抗體（ HBcAg），雖來源于同一病毒，但僅與其相應(yīng)的抗體結(jié)合，而不與另外兩種抗體反應(yīng)。 特點(diǎn) 特點(diǎn)一：靈敏性 該測(cè)定法的靈敏度來自酶。 間接法是檢測(cè)抗體最常用的方法，其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測(cè)已與固相結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。測(cè)定的對(duì)象可以是抗體也可以是抗原。 免疫的原理 Ag + Ab Ag－ Ab 特異性、靈敏性 在 Ag， Ab反應(yīng)中，用容易示蹤的化學(xué)物質(zhì)標(biāo)記一種反應(yīng)物，以了解反應(yīng)是否發(fā)生，發(fā)生部位，以及發(fā)生的程度（即對(duì)未知成分的樣品進(jìn)行定性、定位及定量分析）。 酶聯(lián)免疫法 ? 免疫酶技術(shù)： 把抗原抗體的免疫反應(yīng)和酶的高效催化作用原理有機(jī)地結(jié)合起來。 在這種測(cè)定方法中有 3種必要的試劑： ①固相的抗原或抗體（ 免疫吸附劑） ②酶標(biāo)記的抗原或抗體（ 標(biāo)記物） ③酶作用的底物（ 顯色劑） ? 測(cè)量時(shí)，抗原（抗體）先結(jié)合在固相載體上，但仍保留其免疫活性， ? 然后加一種抗體（抗原）與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物（標(biāo)記物），此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性， ? 當(dāng)偶聯(lián)物與固相載體上的抗原（抗體）反應(yīng) 結(jié)合后，再加上酶的相應(yīng)底物，即起催化水解或氧化還原反應(yīng)而呈顏色。 （二）間接法 步驟： A 將已知可溶性抗原吸附于載體（聚苯乙烯板或聚乙苯乙烯小珠），經(jīng)溫育后清洗； B 加入待檢稀釋血清，若血清中有相應(yīng)特異性抗體存在則與吸附的抗原結(jié)合，溫育后清洗； C 加入酶標(biāo)記的抗球蛋白抗體，此時(shí)酶標(biāo)記抗抗體與吸附的抗原抗體復(fù)合物結(jié)合，溫育后清洗； D 加入酶作用底物（或稱基質(zhì)），酶分解底物并顯色，用光電比色計(jì)測(cè)定底物顯色深淺，即可推知抗體量。眾所周
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