《薄層色譜法概述》ppt課件-全文預(yù)覽
【正文】 1 29 ? 溶劑優(yōu)化規(guī)則： ? 增加溶劑強(qiáng)度 ，使 Rf值增大，但也可能降低分離能力。 ? 混合流動(dòng)相組分之間（或雜質(zhì)）可能發(fā)生相互作用。 ?溶劑強(qiáng)度也可用其在水中的溶解度參數(shù) ? 來(lái)表示。 2022/5/31 25 ? 溶劑強(qiáng)度參數(shù)和選擇性 ?溶劑的強(qiáng)度參數(shù) ?定義：溶劑強(qiáng)度參數(shù)用 ??表示。 W 2022/5/31 22 ? R= ? 由上式， Rf與 R之間存在著如圖所示關(guān)系 n 4 ⊿Rf Rf1 Rf1 R 0 Rf=,R最高 Rf在 ,R變化不大 Rf﹤ 或 ﹥ ,R下降 2022/5/31 23 流動(dòng)相與展開(kāi)體系 ? 液 固吸附 ——在該色譜中，溶質(zhì)的保留和分離選擇性決定于三個(gè)因素： 溶 解 能 力 流動(dòng)相 溶質(zhì) 吸附 劑 相互作用 競(jìng)爭(zhēng) 2022/5/31 24 ? 液 液分配 ? 基于組分在互不相溶的兩相間的溶解度不同而實(shí)現(xiàn)分離的一種展開(kāi)系統(tǒng)。 Rx=Ls/Lr 2022/5/31 19 ?分離效能參數(shù) ?理論塔片數(shù) n=16[Ls/W] 2 ，考慮靜態(tài)擴(kuò)散引起的起始斑點(diǎn)半峰寬的影響引入真實(shí)塔片數(shù)（ n真實(shí) ） ?n真實(shí) =[Ls/（ b0 ） ] 2 ? ， b0樣品起始斑點(diǎn)半峰寬。 ， 原點(diǎn) S R W Ls L。放置時(shí)間不宜太長(zhǎng)，否則背景吸附劑也吸附碘，使信噪比降低。 薄層被刮掉部分 溶劑前沿 2022/5/31 16 ? 檢測(cè) ? 物理方法 ——紫外光下顯示熒光或熒光淬滅 ? 化學(xué)方法 ——加化學(xué)試劑顯色，要求顯色穩(wěn)定、持久、專屬、靈敏、線性良好。 原點(diǎn) 1 2 2022/5/31 15 ? 離心展開(kāi) ——薄層板以適當(dāng)轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)時(shí)，流動(dòng)相以適當(dāng)速率轉(zhuǎn)移到薄層上。 2022/5/31 14 ? 連續(xù)展開(kāi) ——使到達(dá)薄層上緣的溶劑不斷蒸發(fā)，連續(xù)展開(kāi)以增加展開(kāi)距離。 2022/5/31 13 ? 展開(kāi)方式 ?多數(shù)采用直線形上行展開(kāi)，薄層板水平角度以 75? 為最佳。 2022/5/31 12 ? 自動(dòng)點(diǎn)樣 ? Limomat IV 噴樣儀 ——樣品溶液通過(guò)氣流成霧狀噴向薄層，移動(dòng)板臺(tái)，使在薄層上流下樣品條帶。不同薄層活化條件略有不同，如： ?硅膠 110℃ 1h ?氧化鋁 110℃ 30min 2022/5/31 11 ? 點(diǎn)樣 ?要求配制樣品的溶劑高度揮發(fā)性和盡可能非極性，否則易使斑點(diǎn)擴(kuò)展。 ?硅膠或硅膠 G ——以 CMC為黏合劑。 ?在 366nm有熒光的指示劑如彩藍(lán)等。薄層強(qiáng)度差。要求光滑、平整、洗凈后不附水珠。 ?表面改性纖維素 ——乙?；w維素 ?藥典收載的固定相有 ：硅膠類、硅藻土類、氧化鋁類、微晶纖維素類等。 ?對(duì)污染物抗受力強(qiáng) ?TLC——顆粒物質(zhì)、腐蝕性物質(zhì)、不可逆吸附物質(zhì)均無(wú)影響。 而 HPLC是在封閉的系統(tǒng)內(nèi)，流動(dòng)相流量靠泵控制，溶劑選擇受檢測(cè)器限制，固定相需再生。 ? 因 TLC法設(shè)備簡(jiǎn)單，分析速度快，分離效率高，結(jié)果直觀，很快被用作定性和半定量的方法。 1965年德國(guó)化學(xué)家出版了 “ 薄層色譜法 ” 一書(shū)，推動(dòng)了這一技術(shù)的發(fā)展。 2022/5/31 3 ? 薄層色譜與高效液相色譜的差別（ 特點(diǎn) ） ?固定相和流動(dòng)相 ?TLC——流動(dòng)相流動(dòng)靠毛細(xì)作用力，流動(dòng)相選擇較少受限制，固定相不用再生。 ? HPLC一次只能分離一個(gè)樣品，通常采用反相 色譜，色譜后衍生化受限制。 2022/5/31 6 ?表面改性固定相 ?疏水改性硅膠 ——化學(xué)鍵合烷基 ?親水改性硅膠 ——引入氨基、氰基、二羥基等，薄層板極性介于極性吸附劑和疏水改性劑之間（ 極性次序：硅膠 ﹥ 氨基 ﹥ 氰基 ﹥ 二羥基 ﹥ 反相 ）。然后充分漂洗干凈，干燥，置干燥器中備用。無(wú)機(jī)黏結(jié)劑的優(yōu)點(diǎn)是：耐高溫，耐酸堿，但涂鋪薄板動(dòng)作要快，否則勻漿易凝固。 ?熒光黏結(jié)劑 ——在吸附劑中添加某種熒光指示劑，常用的熒光指示劑 ?在 254nm紫外光下發(fā)藍(lán)色熒光的有鈉熒光素、硫化鎘、陰極綠等。例： ?硅膠板（粒度 10 ～ 40um） ?硅膠 G——將硅膠置研缽中，加入少量水，研磨均勻，至無(wú)結(jié)塊和氣泡，再加
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