【正文】 40~125小時， 20℃ ； 125~165小時， 25℃ 。 ? 在這個范圍內 ， 每種微生物都有自己的生長溫度三基點 ，即最低 、 最適 、 最高生長溫度 。 ?影響細胞膜的流動性：溫度高，流動性大，有利于物質的運輸，溫度低，流動性降低，不利于物質運輸。 ?缺點：菌種易于退化；易于遭到雜菌污染；營養(yǎng)物利用率低于單批培養(yǎng)。 ?應用范圍：實驗室科學研究。 單批培養(yǎng) 恒濁法 恒化法 單批培養(yǎng) 連續(xù)培養(yǎng) 時間 連續(xù)流入 新鮮培養(yǎng)液 lg細胞數（個/ml） 連續(xù)培養(yǎng) 連續(xù) 培養(yǎng)器 按控制方式分 按培養(yǎng)器的級數分 按細胞狀態(tài)分 按用途分 內控制（控制菌體密度）：恒濁器 外控制（控制培養(yǎng)液流速、以控制生長速率）：恒化器 單級連續(xù)培養(yǎng)器 多級連續(xù)培養(yǎng)器 一般連續(xù)培養(yǎng)器 固定化細胞連續(xù)培養(yǎng)器 實驗室科研用：連續(xù)培養(yǎng)器 發(fā)酵生產用：連續(xù)發(fā)酵罐 連續(xù)培養(yǎng)器 ?特點：基質過量，微生物始終以最高速率進行生長，并可在允許范圍內控制不同的菌體密度；但工藝復雜，煩瑣。 衰退期 :菌絲體干重下降，到一定時期不再變化。 生長特點 成因 菌體特征 應用及其它 調整期 對數期 穩(wěn)定期 衰亡期 不立即繁殖 繁殖速度 最快 出生率等于死亡率 ,活菌數最大 ,代謝產物大量積累 死亡超過 繁殖 適應新環(huán)境 條件適宜 生存條件 開始惡化 生存條件 極度惡化 代謝活躍 ,體積增長較快 個體形態(tài)和 生理特性穩(wěn)定 有些種類 出現芽孢 出現畸變 與菌種和培養(yǎng)條件有關 生產用菌種 科研材料 改善和控制條件 ,延長穩(wěn)定期 細胞裂解 釋放產物 單細胞微生物生長的四個時期 四、絲狀微生物的群體生長 ?絲狀微生物的純培養(yǎng)采用孢子接種，在液體培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)或深層通氣加攪拌培養(yǎng)，菌絲體通過斷裂繁殖不形成產孢結構。 應用 （ 1）對以生產菌體或菌體生長相平行的代謝產物的最佳收獲期； （ 2）是對維生素、堿基、氨基酸等物質進行生物測定的最佳測定時期； （ 3）通過對穩(wěn)定期到來原因的研究，促進了連續(xù)培養(yǎng)原理的提出和工藝、技術的創(chuàng)建。 （ 3）菌體產量與營養(yǎng)物質的消耗間呈現出有規(guī)律的比例關系。 （ 1）用作代謝、生理等研究的良好材料； （ 2）是增殖噬菌體的最適宿主； （ 3）是發(fā)酵工業(yè)中用種子的最佳材料。 ? （ 2）營養(yǎng)成分：同一種微生物，在營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上生長時，其代時較短，反之則長。 （二）指數期 特點： ? 生長速率常數 R最大，即代時最短 。 ?對外界不良條件反應敏感（如氯化鈉濃度、溫度、抗生素等理、化學藥物）。 單細胞微生物的典型生長曲線 延滯期 指數期 穩(wěn)定期 衰亡期 又稱：停滯期、調整期、適應期 －“ 萬事開頭難 ” 特點： ?生長速率常數 R= 0。 生長曲線的制作 ：接種 適溫培養(yǎng) 定時取樣測定生長量三、單細胞微生物的典型生長曲線 ? 將少量純種單細胞微生物接種到恒容積的液體培養(yǎng)基中后 ，在適宜的溫度 、 通氣 （ 厭氧菌除外 ） 等條件下 ， 它們的群體會有規(guī)律地生長起來 。 化學誘導物理誘導誘導法過濾法區(qū)帶密度梯度離心法膜洗脫法篩選法同步培養(yǎng)法獲得同步生長的方法 ? 獲得同步生長的方法主要有兩類： （ 1）環(huán)境條件誘導法：抗生素、變換溫度、光線、培養(yǎng)基等，造成與正常細胞周期不同的周期變化。 ? 方法：稀釋倒平板法；劃線法。 ?特點：快速 、 簡便 。 一般干重為濕重的 10%～ 20%， 而一個細菌細胞一般重約 1012～ 1013g。 群體內各個個體的進一步生長 群體的生長 第一節(jié) 測定微生物生長繁殖的方法 ?微生物生長的測定：個體計數、群體重量測定和群體生理指標測定。 同化作用的速度超過了異化作用 個體的生長 原生質的總量（重量、體積、大小）就不斷增加 如果各細胞組分是按恰當的比例增長時，則達到一定程度后就 會發(fā)生繁殖，引起個體數目的增加。 （一）直接法（精確的稱干重法； 粗放的測體積法 ） （二）間接法（比濁法，生理指標法） （ 一 ） 直接法 ? 將一定量的菌液中的菌體通過離心或過濾分離出來 ， 然后烘干 （ 干燥溫度可采用105℃ 、 100℃ 或 80℃ ） 、 稱重 。 ?原理：在一定范圍內 ， 菌懸液中的細胞濃度與混濁度成正比 ， 即與光密度成正比 ， 菌數越多 ， 光密度越大 。 二、計繁殖數 （單細胞微生物細胞個體數目的檢測法） （一）直接法：血球計數板 （二）間接法：（活菌）平板菌落計數法、厭氧菌培養(yǎng) 血球計數板法 : （一）直接法 細胞密度＝（ 4個大格細胞總數 /4） 104個 /ml ； （二）間接法（活菌計數法） ①平板菌落計數法 ② 膜過濾培養(yǎng)法 微生物生長測定方法比較 測定細胞數目 方法 特點與應用 血球計數板法 較快速簡便，但較費時 薄膜過濾染色法 快速簡便， 適于含菌數很低的空氣、水等中的總菌計數 平皿菌落計數法 簡易價廉，但花費時間較長，不能立刻知道結果 測定物質量 比濁法 快速簡便，敏感度低，適于不發(fā)酵液或液體中的快速 總細胞數估計，但需事先標定 細胞濕重法 較為簡便，但含水量不定，準確度差 細胞成分含量法 如測定蛋白質、核酸、還原糖的含量等 細胞干重法 較為費時，易受顆粒雜質干擾，敏感度低 第二節(jié) 微生物的生長規(guī)律 一、獲得微生物純培養(yǎng)的方法 ? 概念：從一個細胞得到的后代稱為純培養(yǎng)。 進行同步分裂的細胞稱為同步細胞 。 硝酸纖維素膜法 細菌細胞會粘附于具有相反電荷的硝酸纖維微孔濾膜上。 ? 生長曲線代表了單細胞微生物在新的環(huán)境中從開始 生長 、分裂 直至 死亡 的整個動態(tài)變化過程 。 ?合成代謝活躍（核糖體、酶類、 ATP合成加快），易產生誘導酶 。 ③調整培養(yǎng)基的成分，應適當豐富，且發(fā)酵培養(yǎng)基成分盡量與種子培養(yǎng)基的成分接近。 x2 x1 t2 t1 t2 t1 (lgx2lgx1) ?生長速率常數 R= t2 t1 (lgx2lgx1) ?代時 G= ?繁殖代數 n=(lgx2lgx1) 指數期中的的 三個重要參數 一 些 細 菌 的 代 時 菌名 培養(yǎng)基 培養(yǎng)溫度 代時 E. coli（大腸桿菌） 肉湯 37℃ 17min E. coli 牛奶 37 Enterobacter aerogenes（產氣腸細菌） 肉湯或牛奶 37 16~18 E. aerogenes 組合 37 29~44 B. Cereus（蠟狀