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生物化學(xué)簡(jiǎn)明教程第四版第五章酶-全文預(yù)覽

2025-02-06 13:37 上一頁面

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【正文】 力( specific activity,也稱比活性) 比活力: 指每 mg蛋白質(zhì)所具有的酶活力 ,一般用 U/mg蛋白質(zhì) 來表示,比活力說明酶的純度。 比活力 = 酶活力( U/ml) /蛋白質(zhì)濃度( mg/ml) 比活力有時(shí)也可用每 g或每 ml酶含多少個(gè)活力單位來表示。 抑制劑 (inhibitor)的影響 抑制作用 ( inhibition) :使酶的必需基團(tuán)的化學(xué)性質(zhì)改變而降低酶活力甚至使酶完全喪失去活性的物質(zhì) 不可逆抑制作用 (irreversible inhibition) 可逆抑制作用 (reversible inhibition) ( 2)非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 (nonpetitive inhibition) ( 1)競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 (petitive inhibition) 不可逆抑制作用( irreversible inhibition) E + I → EI 例 : DFP( DIFP)對(duì)胰凝乳蛋白酶的抑制 抑制劑與酶分子上的某些基團(tuán)共價(jià)結(jié)合 可逆抑制作用 (reversible inhibition) ( 1)競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用( petitive inhibition) E+I EI 例 : 丙二酸對(duì)琥珀酸脫氫酶的抑制作用 抑制劑的結(jié)構(gòu)與某種底物的結(jié)構(gòu)類似 競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用動(dòng)力學(xué)方程 E + S E S E + Pk 1k 2k 3+Ik i 2k i 1E IEI+S → no reaction 推導(dǎo)出的方程 )K ]I[1(KK]S[K ]S[Vvimmmm ax ??????競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用動(dòng)力學(xué)方程的特征 當(dāng) [ I ]→0 時(shí),方程還原成米氏方程。 因?yàn)樗耸艿降孜锏姆N類、溫度、時(shí)間等的影響外、還受底物濃度、酶濃度等因素的影響。 定向效應(yīng) 張力效應(yīng)和底物形變( strain and distortion) 酸堿催化( acidbase catalysis) 共價(jià)催化( covalent catalysis) 共價(jià)催化 親電子催化 親核催化 酶促反應(yīng)速度的測(cè)定 酶促反應(yīng)的動(dòng)力學(xué) 測(cè)定的反應(yīng)時(shí)間越長(zhǎng)越好嗎? 應(yīng)該測(cè)定反應(yīng)的初速度 研究影響酶促反應(yīng)速度的因素 即底物的消耗量很?。ㄒ话阍?5﹪ 以內(nèi))時(shí)的反應(yīng)速度 酶濃度與反應(yīng)速度的關(guān)系 v [E] 當(dāng) [S]足夠大時(shí),則 v=k[E] 底物濃度與反應(yīng)速度的關(guān)系 當(dāng)?shù)孜餄舛容^低時(shí) 反應(yīng)速度與底物濃度成正比;反應(yīng)為一級(jí)反應(yīng)。 酶催化作用的機(jī)理 活化分子(處于過渡態(tài)的分子) 活化能 降低反應(yīng)所需的活化能 E+S ES EP P+E 中間產(chǎn)物學(xué)說 光譜吸收帶 645 583 561 548 530 498 E + + + + E+H2O2 + + E+H2O2+AH2 + + + + E:過氧化物酶 中間絡(luò)合物的證據(jù) H2O2 + AH2 A + 2H2O 過氧化物酶 鎖鑰學(xué)說( lock and Key theory) 1894年 Fischer 提出 誘導(dǎo)契合學(xué)說( inducedfit theory) 1958年 Koshland提出 羧肽酶的誘導(dǎo)契合模式 底物 鄰近定向效應(yīng); “張力”和“形變”; 酸堿催化; 共價(jià)催化 。 寡聚酶 由幾個(gè)亞基組成的酶,亞基之間以非共價(jià)鍵連接。如其中一個(gè)底物為水時(shí),水可略去。2H 例: 乳酸 丙酮酸 C O O HC HC H 3H O + N A D +C O O HC OC H 3+ N A D H + H +乳 酸 脫 氫 酶乳酸脫氫酶( EC , L乳酸: NAD+氧化還原酶) 2.轉(zhuǎn)移酶類( transferases) 催化基團(tuán)的轉(zhuǎn)移 A R + B B RA +谷丙轉(zhuǎn)氨酶( GPT)( EC , L丙氨酸: α— 酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶) 例: 3.水解酶類( hydrolases) AB + H2O A 2A 酶的概念 酶的化學(xué)本質(zhì) 絕大多數(shù)是蛋白質(zhì) 后來發(fā)現(xiàn)有些核酸也具有催化活性 如: L19RNA,核糖核酸酶 P ribozyme :核酶 酶的催化特性 催化效率高; 對(duì)環(huán)境因素敏感; 酶的活性具有調(diào)節(jié)性 。 1946年 Sumner和 Northrop獲得諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。 1878年 Kuhne提出了 enzyme,源于希臘語的酵母中 (in yeast),中文:酵素 酶 1897年 Buchner兄弟用不含酵母細(xì)胞的提取液完成了發(fā)酵,證明酶無生命,只是一種化學(xué)物質(zhì)。 1857年 Pasteur認(rèn)為酒的發(fā)酵是酵母 (yeast)細(xì)胞生命活動(dòng)的結(jié)果,細(xì)胞破裂則失去發(fā)酵作用。 1930年 Northrop得到胃蛋白酶結(jié)晶。 The Nobel Prize in Chemistry 1907 for his biochemical researches and his discovery of cellfree fermen
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