不可忽視的細(xì)節(jié)—血液基因組提取-全文預(yù)覽
【正文】 體積），細(xì)胞裂解液將紅細(xì)胞裂解的同時(shí)可以裂解白細(xì)胞，得到的為細(xì)胞核沉淀，更方便基因組 DNA的提取。 樣本保存和前處理－ 口拭子 /漱口水 保存 口拭子：干燥后室溫保存 漱口水： 4℃ 保存或離心得到沉淀 20℃ 或 70℃ 保存 樣本前處理 1. 拭子將拭子棉頭剪入到離心管里，加入緩沖液直接進(jìn)行提取。 樣本保存和前處理－ 微量血液 /干血點(diǎn) /羊水 /胸水 保存 微量血液：抗凝血液 20或 70℃ 保存； 干血點(diǎn)：干燥后室溫或 4℃ 保存； 羊水： 20或 70℃ 保存。盡量避免樣本反復(fù)凍融。 4. 采用白膜層提取核酸時(shí)，所用到的提取溶液體積需按照全血體積進(jìn)行操作。 樣本前處理 1. 白膜層是將全血離心取中間層所得。 樣本前處理 1. 凍存的血凝塊使用前應(yīng)在 37℃ 水浴溶解，輕柔顛倒混勻。 2. 抗凝血提取前需要徹底混勻后再吸取實(shí)驗(yàn)所需的體積。但肝素對(duì)酶反應(yīng)有可能起阻害作用 ,采血時(shí)如沒有特殊要求 ,請(qǐng)使用檸檬酸或 EDTA處理血樣。不可忽視的細(xì)節(jié) — 血液基因組提取 天根生化科技（北京）有限公司 DNA提取的原則 基因組提取方法 樣本保存和前處理 基因組提取流程 DNA保存及檢測(cè)方法 試劑選擇原則 內(nèi)容 沒有嚴(yán)格要求 : ? PCR ? Southern Blots ? RFLP 嚴(yán)格要求片段長(zhǎng)度 : ? 構(gòu)建文庫(kù) ? PFGE(脈沖場(chǎng)凝膠電泳 ) DNA Length DNA提取原則 1： DNA片段長(zhǎng)度 ? 沒有嚴(yán)格要求 ? 常規(guī) PCR ? 嚴(yán)格要求產(chǎn)物純度 ? 存檔、產(chǎn)物長(zhǎng)期保存 ? Southern雜交 ? 熒光定量 PCR ? SNP Microarray ? CGH (比較基因組雜交 ) DNA提取原則 2： DNA產(chǎn)物純度 DNA提取的原則 基因組提取方法 樣本保存和前處理 基因組提取流程 DNA保存及檢測(cè)方法 試劑選擇原則 內(nèi)容 基因組提取方法 溶液鹽析法： 無需酚氯仿，樣本量靈活可變，得率高 硅
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1