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正文內(nèi)容

常用培養(yǎng)基制備、滅菌與消毒-微生物分離、純化及培養(yǎng)技術(shù)-全文預(yù)覽

  

【正文】 基內(nèi)菌絲 和伸出培養(yǎng)基表面的 氣生菌絲 。根據(jù)細(xì)菌個(gè)體形態(tài)觀察的不同要求,可將染色分為 3種類(lèi)型:簡(jiǎn)單染色、鑒別染色、特殊染色。細(xì)菌形態(tài)受培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基成分、濃度、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間等發(fā)生變化。 冷凍真空干燥法 ( 1)凍干管的準(zhǔn)備:中性硬制玻璃,烘干,滅菌。 用真空泵抽干水分后火焰封口 (也可用橡皮塞或棉塞塞住試管口 )。 (4)無(wú)菌檢查 每 10支砂土管隨機(jī)抽 1支 , 將砂土倒入肉湯培養(yǎng)基中 , 30℃ 培養(yǎng)40h, 若發(fā)現(xiàn)有微生物生長(zhǎng) , 所有砂土管則需重新滅菌 , 再作無(wú)菌試驗(yàn) ,直至證明無(wú)菌后方可使 用 。倒去鹽酸溶液,用自來(lái)水沖洗至中性,最后一次用蒸鎦水沖洗,烘干后用 40目篩子過(guò)篩,棄去粗顆粒,備用。 此法實(shí)用且效果較好。霉菌、放線菌及芽孢菌保存 2- 4個(gè)月移種一次,酵母菌間隔兩個(gè)月,普通細(xì)菌一個(gè)月,假單胞菌兩周傳代一次。 冷凍真空干燥法是將要保藏的微生物樣品先經(jīng)低溫預(yù)凍,然后在低溫狀態(tài)下進(jìn)行減壓干燥。包括低溫法和液氮法。 常用的載體有土壤、砂土、硅膠、明膠、麩皮、磁珠和濾紙片等。 劃線方法 稀釋混合平板法 : 先加菌 倒平板時(shí)注意培養(yǎng)基溫度 混合均勻 微生物培養(yǎng)技術(shù) 斜面接種 液體培養(yǎng)基接種 穿刺接種 將已接種的斜面、半固體和液體培養(yǎng) 基放置培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 將生長(zhǎng)好的菌種用牛皮紙包好,置 4℃冰箱中保存。 涂布:將上述每種培養(yǎng)基平板底面標(biāo)記稀釋度 , 然后用無(wú)菌吸管從最后三種稀釋度 , 即 10 105和 106的試管中吸取 , 用玻棒涂布 。 為什么要進(jìn)行純培養(yǎng):平板上的單一菌落并不一定保證是一種菌 。 化學(xué)藥品滅菌 : 原理:應(yīng)用化學(xué)制劑破壞細(xì)菌代謝機(jī)能。距照射物 。 輻射滅菌 : 原理:紫外線波長(zhǎng)在 200- 300nm,具有殺菌作用,以 265266殺菌力強(qiáng)。 設(shè)備 :蔡氏過(guò)濾器,濾膜過(guò)濾器。 C和 28s對(duì)牛乳和其它液態(tài)食品。 注意事項(xiàng): 1) 冷空氣徹底排除; 2)加水; 3)壓力降為 “ 0”時(shí)方可打開(kāi)。 濕熱法 : 原理:因?yàn)闈駸嶂芯w吸水,蛋白質(zhì)容易凝固,因蛋白質(zhì)含水量增加,所需凝固溫度降低;濕熱的蒸氣有潛熱存在。原理加熱使蛋白質(zhì)變性,與水的含量有關(guān),當(dāng)環(huán)境和細(xì)胞含水量越大,凝固越快。如重金屬離子,磺胺類(lèi)藥物及抗生素等。要求:應(yīng)具備 6大營(yíng)養(yǎng)要素;物質(zhì)比例合適;必須滅菌。 營(yíng)養(yǎng)物:具有營(yíng)養(yǎng)功能的物質(zhì) 。 是生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ) ,是生命活動(dòng)的起點(diǎn) 。 營(yíng)養(yǎng)要素:碳源 、 氮源 、 能源 、 生長(zhǎng)因子 、 無(wú)機(jī)鹽和水 培養(yǎng)基:人工配制、適合微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)
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