【正文】 甲醇定容于100 mL 容量瓶中 ，得濃度為 500 μg/ mL 的姜黃素標準液。按下式計算姜黃素得率和收率： R= Vt/Vb； K= Ct/Cb； 收率 Yt= 1/ ( 1+ 1/RK) 姜黃素得率 =Ct Vt 106 /W 式中 R: 雙水相體系上下相的體 積比， Vt : 雙水相體系上相體積 ( mL)， Vb : 雙水相體系下相體積 ( mL) ， K： 姜黃素雙水相體系分配系數(shù)， Ct： 雙水相系統(tǒng)上相姜黃素的質(zhì)量濃度 （ μg/ mL)， Cb： 雙水相系統(tǒng)下相姜黃素的質(zhì)量濃度 （ μg/ mL)， Yt： 姜黃素的收率， W：為稱取姜粉粉末重量（ g） 。 雙水相體系的確定 分別選用 乙醇 ∕ K2HPO4（ 鉀 乙） 、 異丙醇 ∕ K2HPO4（ 鉀 異） 、 乙醇 /(NH4)2SO4（ 銨 乙） 、 乙醇 /NaH2PO4（ 鈉 乙） 、 異丙醇 ∕ NaH2PO4（ 鈉 異） 作為 雙水相 萃取體系， 稱取 姜粉 ，加入 無機鹽的質(zhì)量 為 4 g，醇水比為 1∶ 1，加入總量為 20 mL，40℃ 水浴 1h， 150 w 超聲提取 30 min， 20xx r/min 離心 5 min， 讀取 上下 兩相溶液體積，并于 425 nm 處測吸光度， 根據(jù)分相能力、姜黃素的收率 Yt 及上相提取率 ，確定最佳萃取體系。 結(jié)果見圖 2： 圖 2 固液比對姜黃素提取的影響 固 液比指樣品質(zhì)量與雙水相體系總體積之比 ，本實驗固定雙水相的體積，通過姜粉質(zhì)量改變固液比，固液比越大 表示相同 體積雙水相體系萃取的姜粉越多。 K2HPO4 質(zhì)量對姜黃素提取的影響 選取加入 K2HPO4 的質(zhì)量 為 4 g、 6 g、 8 g、 10 g、 12 g 的 雙水相體系 ， 按上述 最佳條件 提取姜黃素， 計算姜黃素的收率 Yt 及上相提取率。 結(jié)果見圖 4： 生姜中姜黃素的提取工藝研究 第 12 頁（共 21 頁） 圖 4 乙醇體積 對姜黃素提取的影響 姜黃素分配系數(shù)和體積比與乙醇量有一定的相關(guān)性。 超聲波時間 對姜黃素提取的影響 控制超聲波提取時間為 15 min、 30 min、 45 min、 60 min、 75 min， 按上述最佳條件提取姜黃素， 計算姜黃素的收率 Yt 及上相提取率 。故試驗超聲時間選擇 30 min。 17 個實驗點分為析因點和零點 ， 其中析因點為自變量取值在 A、 B、 C 所構(gòu)成的三維頂點 ， 零點為區(qū) 域的中心點 ， 零點實驗重復 5 次 ， 用以估計實驗誤差。 對比三因素的 F 值可看出，超聲波時間對姜黃素提取的影響最大，其次為提取溫度和乙醇體積。 結(jié)果與分析 第 17 頁（共 21 頁） 圖 8 乙醇體積與 提取溫度 對姜黃素 交互作用的響應面與等值線圖 由圖 8 可看出， 兩因素 的 交互作用顯著，在提取溫度 50～ 60℃ 與乙醇體積 ～ mL 的范圍內(nèi)，有較大的響應值 。 從響應面的最高點和等值線可以看出 ， 在所選的范圍內(nèi)存在極值 ， 既是響應面的最高點 ， 同時也是等值線最小橢圓的中心點。 4 結(jié)論 （ 1） 配置不同濃度的姜黃素溶液，于 425 nm測定吸光度，以姜黃素濃度為縱坐標，吸光度為橫坐標，繪制標準曲線，得回歸方程 C=－ ，相關(guān)系數(shù)r2=。 本實驗采用超聲波協(xié)同雙水相提取姜黃素，該方法簡單快速，提取率較高。尤其要強烈感謝我的論文指導老師 —馬靜 老師， 從課題的選擇到項目的最終完成 ， 她對我進行了無私的指導和幫助，不厭其煩的幫助進行論文的修改和改進 ， 在此謹向 馬 老師致以誠摯的謝意和崇高的敬意 。感謝我的同學和朋友，在 我寫論文的過程中給予我了很多你問素材，還在論文的撰寫和排版燈過程中提供熱情的幫助。在此向幫助和指導過我的各位老師表示最中心的感謝！感謝這篇論文所涉及到的各位學者。 參考文獻 [1] 韓婷，宓鶴鳴 . 姜黃的化學成分及藥理活性研究進展 [J]. 解放軍藥學學報， 20xx， 17（ 2）：95～ 97 [2] 中華人民共和國衛(wèi)生部 . GB276020xx食品安全國家標準食品添加劑使用標準 [S]. 北京：中國標準出版社， 20xx [3] 張衛(wèi)，張保軍，李富華 . 姜黃色素市場與產(chǎn)品開發(fā) [J].中國食品添加劑， 20xx（ 3） ： 48～ 50 [4] 張保軍，李春林 . 天然姜黃素及其在果蔬飲料中的應用 [J].飲料工業(yè)， 20xx， 6（ 5）： 38～40 [5] 張保軍，張衛(wèi) . 姜黃素的生理功能及其在方便面中的應用 [J]. 中國食 品添加劑， 20xx（ 4）： 37～ 39 [6] 牛生洋，郝峰鴿，許秋亞 . 姜黃素的提取及應用研究進展 [J].河南科技學院學報， 20xx， 36（ 4）： 58～ 61 [7] Deshpande Shailesh S. Effict of curcuma in on the form ation of benzo（ a） pyrene derived DNA adducts in vitro[J].Cancer Lett， 1995， 96（ 1） .71 [8] Huang MT， Lou YR， MaW， eta . Inhibitory effects of dietary curcuma in on fore stomach， duodenal and colon carcinogenesis in mice[J]. Chanceries， 1994， 54： 5841～ 5847 [9] Rao CV， Raven A， Simi B， eta. Chemoprevention of colon. carcinogenesis by dietary urcumm 生姜中姜黃素的提取工藝研究 第 20 頁（共 21 頁） maturally occurring plant phenolic pound[J]. Cancer Res， 1995， 55： 259～ 266 [10] Conney AH， Lysz T， Ferraro T. Inhibitory effect of curicum in and some related dietary pounds on tumor promotion and arachidonic acid metabolism in mouse skin[J]. Adv Enzyme Regul， 1991， 31： 385～ 389 [11] 陳 進，陳衛(wèi)東，崔玉杰 . 姜黃素滴丸制備工藝的研究 [J] .中國藥物 與臨床， 20xx， 02（ 7）： 135～ 137 [12] Krishnasw amy K. Retardation of experimental tumori genesis and reduction in DNA adducts by turm eric and urcumm[J]. utr Cancer， 1998， 30（ 2）： 163～ 166 [13] Huang MT. Inhibitory effects of urcumm on um or in itiation benzo（ a） pyrene and 7，12dimethylbenz（ a） anthracene[J]. Carcino genesis， 1992， 13（ 11）： 2183～ 2186 [14] 秦煒，鄭濤，原永輝 等 . 超聲場對姜黃素提取過程的強化 [J]. 清華大學學報 (自然科學版 )， 1998， 38（ 6） ： 46～ 48 [15] Francine S Antelo， Andr233。 （ 2） 影響姜黃素 提取率 的 變化有 % 來源于所選變量 ， 即 乙醇體積、提取溫度和超聲 時間，且影響大小為 : 超聲時間﹥提取溫度﹥乙醇體積。 模型驗證試驗 為檢驗 RSA 法的可靠性 ， 采用上述最 優(yōu)提取條件 ： 乙醇體積 mL、提取溫度 ℃ 、超聲時間 min， 姜黃素 提取 率的 實 測值 為 %， 與 理論預 測值%基本吻合 ，此時姜黃素 收 率為 %， 因此 ， 利用響應面分析法對 姜黃素 提取條件優(yōu)化是可行的 ， 得到的 姜黃素 提取條件真實可靠 ， 具有實用價值 。 圖 9 乙醇體積與 超聲波時間 對姜黃素 交互作用的響應面與等值線圖 圖 9 表明了乙醇體積與超聲波時間對姜黃素的交互作用 不顯著 ， 較高的乙醇體積和 超聲時間反而使提取率有下降的的趨勢。 等值線圖和三維響應面分析圖 借助 Design Expert 軟件來繪制交互作用分析圖 ， 見圖