【正文】 文。確定實驗設(shè)備，實驗藥品以及實驗環(huán)境條件，即：主要實驗試劑：Ca(OH)鹽酸、乙酸乙酯、酒石酸顯色溶液、。八、指導(dǎo)教師審查意見指導(dǎo)教師（簽字）： 年 月 日Ⅱ長江大學(xué)工程技術(shù)學(xué)院畢業(yè)設(shè)計(論文)指導(dǎo)教師審查意見學(xué)生姓名專業(yè)班級畢業(yè)設(shè)計(論文)題目指導(dǎo)教師職 稱審查日期審查參考內(nèi)容：畢業(yè)設(shè)計(論文)的研究內(nèi)容、研究方法及研究結(jié)果，難度及工作量，質(zhì)量和水平，存在的主要問題與不足。評語：評閱教師簽名： 評定成績（百分制）：_______分（注：此頁不夠，請轉(zhuǎn)反面）Ⅳ長江大學(xué)工程技術(shù)學(xué)院畢業(yè)設(shè)計(論文)答辯記錄及成績評定學(xué)生姓名專業(yè)班級畢業(yè)設(shè)計(論文)題目答辯時間 年 月 日 ～ 時答辯地點一、答辯小組組成答辯小組組長：成 員：二、答辯記錄摘要答辯小組提問（分條摘要列舉）學(xué)生回答情況評判三、答辯小組對學(xué)生答辯成績的評定（百分制）：_______分 畢業(yè)設(shè)計(論文)最終成績評定(依據(jù)指導(dǎo)教師評分、評閱教師評分、答辯小組評分和學(xué)校關(guān)于畢業(yè)設(shè)計(論文)評分的相關(guān)規(guī)定)等級(五級制)：_______答辯小組組長(簽名) ： 秘書(簽名)： 年 月 日系答辯委員會主任(簽名)： 系 (蓋章)中文摘要茶樹花多酚的提取方法研究學(xué) 生：唐秋萍 化學(xué)工程系指導(dǎo)教師：胡 達 化學(xué)工程系[摘要]本文在水提沉淀法提取茶樹花多酚的前提下，采用正交實驗法對提取茶樹花多酚的因素進行了探討，通過對不同的提取溫度、提取時間、提取料液比測得的多酚含量來衡量提取效果的優(yōu)劣。10月中下旬至11月中旬為盛花期。由于茶花開花時間、外界環(huán)境影響及花粉活力等多方面的原因，茶樹的結(jié)實率一般都很低，具有“花期長、開花多、結(jié)實小”的特點。茶樹開花結(jié)果會爭奪茶葉養(yǎng)分，致使茶葉產(chǎn)量下降、質(zhì)量降低，因此茶農(nóng)每年都人工采摘或使用除花劑除掉茶樹花，茶樹花被認為是茶葉生產(chǎn)中的“廢物”。以茶樹花為原料加工成茶樹花茶或茶樹花飲料，主要有直接制茶、拼制花茶、發(fā)酵碎紅茶等方式，其加工技術(shù)已較為成熟。從現(xiàn)有的研究結(jié)果看，茶樹花中最具開發(fā)潛力的成分是茶多酚、茶多糖和SOD。目前，常用茶末或低檔茶葉來提取茶多酚，而利用茶樹花提取實用多酚的研究報道卻很少。其中兒茶素類化合物為花多酚的主體成分，占茶花干重的12%~24%、花多酚總量的70%~80%?；ǘ喾幽軈⑷肫渌袡C物（主要是食品）中，能夠延長貯存期，防止食品退色，提高纖維素穩(wěn)定性，有效保護食品各種營養(yǎng)成份。充分利用廢棄的茶樹花資源提取多酚類抗氧化物質(zhì)，可大大降低這類產(chǎn)品的成本，提供綠色安全醫(yī)藥、食品添加劑。有機溶劑提取方法是傳統(tǒng)提取花多酚的一種方法，也是使用最為廣泛的方法，過程比較簡單。浸提、除雜和萃取為必不可少的共同性步驟，常用的去雜質(zhì)方法有氯仿除雜法、活性碳脫色法、石油醚除色素或通過低溫靜止除雜法等方法。綜上所述，溶劑法的改進主要應(yīng)以簡化工藝、降低成本、提高有效成份含量和提取率等為目標。1962年Bate Smith定義“單寧是分子量500～3000的能沉淀生物堿、明膠及蛋白質(zhì)的水溶性酚類化合物”。它包括了單寧及與單寧有生源關(guān)系的化合物。茶多酚又名茶單寧、茶鞣質(zhì)，是茶葉所含的一類多羥基類化合物的總稱。它們的結(jié)構(gòu)至少包括A、B、C3個環(huán)核，酯化后，還有D環(huán)，是2苯基苯并吡喃的衍生物。 酚酸類:茶葉中含有多種酚酸和縮酚酸類化合物，后者多為沒食子酸（3，4，5三羥基苯甲酸）、咖啡酸、雞納酸的縮合衍生物。在葡萄籽與葡萄皮中，葡萄糖多酚的含量較高，有資料表明，紅葡萄的果皮中，多酚含量可達25%～50%，種籽中則可達50%～70%。葡萄酒中的花色苷類化合物主要來源于葡萄皮，隨發(fā)酵時間的延長，其含量會相應(yīng)的增加。此外，還含有微量的黃烷酮醇類，如3位結(jié)合鼠李糖苷的二氫莰非醇和二氫槲皮苷。紅葡萄酒中的兒茶素含量低于100mg/L，在白葡萄酒中更低。原花色素類化合物是葡萄籽及果皮中的主要成分物質(zhì)。蘋果多酚蘋果多酚為棕紅色粉末，其20%的水溶液呈紅褐色；液狀及粉狀蘋果多酚產(chǎn)品均略帶蘋果的風味，稍帶苦味，易溶于水和乙醇?；ǘ喾涌捎糜谑称繁ｕr防腐，無毒副作用，食用安全同時配上植酸防腐效果更佳。諸多的醫(yī)學(xué)實驗已經(jīng)證明，花多酚有極強的清除有害自由基，阻止脂質(zhì)過氧化的作用；誘導(dǎo)人體內(nèi)代謝酶的活性的增高，促進致癌物的解毒；抑制和阻斷人體內(nèi)源性亞硝化反應(yīng)，防止癌變和基因突變。水提取法以水為溶劑，采用水浴加熱提取多次，合并提取液后用氯仿萃取，分出氯仿相后改用乙酸乙酯多次萃取，合并乙酸乙酯相并減壓蒸餾濃縮，將其干燥（真空、冷凍或噴霧干燥）后用去離子水重結(jié)晶即得產(chǎn)品。常用的溶劑有水、甲醇、乙醇、丙酮和乙酸乙酯，一般為回流提取。從國內(nèi)外有關(guān)溶劑提取法的文獻可看出:溶劑提取法的優(yōu)點是穩(wěn)定、可靠；缺點是花多酚用水提取則提取率低（一般提取率為 5～6）、產(chǎn)品純度低、產(chǎn)品易氧化，且含大量雜質(zhì)（如植物多糖、茶棕色素、色素、咖啡堿和樹脂等）；而用有機溶劑提取，提取率雖可有所提高，可達到10～15，但浸提液中不但含有花多酚，而且還含有茶色素和咖啡堿等雜質(zhì)，要得到精品，還須反復(fù)除雜精制，工序多，工藝繁瑣復(fù)雜，萃取工序一般需經(jīng)3級錯流萃取；需多次蒸餾，加熱時間長；需用大量有機溶劑，有的有機溶劑回收困難，有毒、易燃，不利于安全生產(chǎn)。萃取劑最終殘留量是多酚產(chǎn)品的主要技術(shù)指標。茶花經(jīng)熱水浸透后，加入沉淀劑即可得到多酚與金屬離子的結(jié)晶性沉淀物，由于沉淀劑的選擇性較高，產(chǎn)品的純度較好，可達85％以上。利用微波和離子沉淀法，%。 CO2超臨界萃取法引入CO2超臨界萃取技術(shù)，將茶花浸透，粗濾，經(jīng)過超濾脫果膠，納濾或反滲透脫水濃縮，再經(jīng)真空濃縮制得粉狀提取物。樹脂法提取茶多酚的研究1998年以后才有文獻報道，其分離原理是用吸附樹脂對多酚類有機物有選擇性吸附的特性。這一名稱能更全面地概括這類天然產(chǎn)物的特點，也符合各學(xué)科領(lǐng)域的實際研究情況。植物多酚的科學(xué)分類方法直到1920年才提出，即根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)不同，植物多酚分為水解單寧、酸酯類多酚、和縮合單寧、黃烷醇類多酚或原花色素，前者主要是酸及其衍生物與多元醇以酯鍵或甙鍵形成，可細分為單寧和鞣花單寧兩類，后者主要是羥基黃烷醇類單體的縮合物。1967年到1971年間關(guān)于多酚生理活性的研究論文僅占總數(shù)的1%，%，數(shù)接近80倍。隨著植物多酚更多的生理活性被逐漸發(fā)現(xiàn)，研究者們認識到，生理活性對多酚的立體化學(xué)結(jié)構(gòu)、構(gòu)型和構(gòu)象、具有嚴格的要求，而具有較強收斂性的多酚往往也同時具有較強的自由基清除能力，從而也具有較強的藥理活性，在所研究的各種多酚中，鞣花單寧，如老鸛草素、仙鶴草素、玫瑰素、地榆素、柯子酸等的生理活性和藥理活性最引人矚目，這與鞣花單寧分子中酚羥基多分子量較大密切相關(guān)。因為傳統(tǒng)的提取方法特別是工業(yè)化生產(chǎn)，如栲膠的生產(chǎn)是把多酚甚至很多非多酚的物質(zhì)一起提取出來作為一個整體利用，而且為了提高得率。但由于帶有大量的親水的酚羥基或其他親水基團，使整個分子顯示較強的親水性，從而難以透過細胞膜的雙磷脂分子層，對充分發(fā)揮其生理活性是不利的。加強其衍生化方面的研究，極有希望得到生理活性更強、實用價值更大的化合物。也可以通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)或克隆技術(shù)來提高其產(chǎn)率，以適應(yīng)其廣泛應(yīng)用的需要。利用有機合成的方法對一些已經(jīng)被證明具有重要應(yīng)用價值的植物多酚進行人工合成也是很有意義的研究工作。其具體實驗過程用正交實驗方進行優(yōu)化設(shè)計。為了研制新產(chǎn)品，提高產(chǎn)品的質(zhì)量和數(shù)量，降低原材料消耗，都需要做試驗。“正交試驗法”應(yīng)用的范圍非常廣泛，現(xiàn)已成為比較簡便、易行的一種應(yīng)用數(shù)學(xué)方法。第二部分應(yīng)用正交實驗法對提取條件進行了優(yōu)化，得到很好的試驗結(jié)果，大大加快了試驗的進程，并節(jié)約了試驗的耗材。2) 抽濾，得提取液。實驗中把浸提溫度A、浸提料液比B、浸提溫度C作為茶樹花多酚提取的三個主要因素，每個因素比較三個不同的條件?；ǘ喾右兹苡谒坝袡C溶液，可用沸水先將花多酚從茶花中提取出來，沉淀法的原理是利用花多酚在一定的介質(zhì)條件下可以和某些物質(zhì)絡(luò)合形成沉淀物的性質(zhì)，使其從浸提液中分離出來，從而與水溶液中咖啡堿、單糖、氨基酸等組分分離，來提取花多酚?！剖醽嗚F分光光度法(1) 檢測原理在一定pH條件下，酒石酸亞鐵與茶樹花多酚類物質(zhì)形成藍紫色的絡(luò)合物，在波長 540 nm處出現(xiàn)最大吸收，在適當?shù)臐舛确秶鷥?nèi)，茶樹花多酚的量與呈色的深淺成正比，可用分光光度法定量。pH ： Na2HPO4 結(jié)果與討論 標準曲線繪制標準曲線的記錄數(shù)據(jù)及標準曲線見表3和圖4。R為極差，是k1，k2，k3中最大值與最小值之間差的絕對值，每一列算出的極差大小，反映了該列所排因素選取的水平變動對指標影響的大小。2) 每個因素水平的確定這應(yīng)該由k值決定，k值越大最終產(chǎn)率與含量越高，所以A因素取A1，B因素應(yīng)該取B3，C因素應(yīng)該取C2，因此從表4得出結(jié)論，要得到最高含量的最佳實驗條件是A1 B3 C2。2. 物料比為1:20，1:30，1:40。所以最佳提取時間是30min。展望5展望多酚不僅是一種新型的天然抗氧化劑，具有保鮮防腐，無毒副作用，食用安全。開發(fā)出在食品、油脂、日用化工中的作用后，人們一直致力于研究它在醫(yī)藥衛(wèi)生保健方面的新作用。但技術(shù)相對滯后，大多進行粗提取和粗加工，花多酚的精加工特別是在醫(yī)藥中的應(yīng)用還處于研究開發(fā)階段。在利用茶葉為原料提取制備粗花多酚的工藝中，溶劑提取法和沉淀法是使用最廣泛的傳統(tǒng)提取方法。同時，隨著對花多酚的抗氧化、防突變等功能的認識，對高純度花多酚產(chǎn)品的需求也會越來越多，如何進一步提高得率是花多酚提取過程中面對的一個重要問題。希望更多的人進行多酚類物質(zhì)提取工藝的優(yōu)化，從而用最優(yōu)的條件得到盡可能多的產(chǎn)品。幾個月來，胡老師不僅在學(xué)業(yè)上給我以精心指導(dǎo)，同時還在思想、生活上給我以無微不至的關(guān)懷，在此謹向胡老師致以誠摯的謝意和崇高的敬意。在論文即將完成之際，我的心情無法平靜，從開始進入課題到論文的順利完成，有多少可敬的師長、同學(xué)、朋友給了我無言的幫助，在這里請接受我誠摯的謝意!最后我還要感謝培養(yǎng)我長大含辛茹苦的父母，謝謝你們！。 他嚴肅的科學(xué)態(tài)度，嚴謹?shù)闹螌W(xué)精神，精益求精的工作作風，深深地感染和激勵著我。在這些提取花多酚的方法中，每種方法都有它各自的針對性和使用范圍，使用時要根據(jù)各自的情況而定。其提取率一般在15%以下，而茶葉花多酚的含量一般為20%～30%，有的高達30%以上，由此可見其提取率還是較低的。尤其是老茶葉、茶葉枝條、茶樹根以及茶葉生產(chǎn)過程中的副產(chǎn)品以及下腳材料等沒有多少市場價值的為可再生綠色資源，如果進行深加工為其它高附加值產(chǎn)品，不僅可以得到較高的利潤，而且對于資源的成分利用也有著深遠的意義?；ǘ喾忧∏】梢詽M足人們的這一要求。茶有其鮮明的抗衰老，保健作用，“飲茶”也已成為一種潮流。在溫度為80℃，物料比是1:40，提取時間為30min因素條件下進行實驗，超過其他各組花多酚含量。3. 提取時間是20min，30min，40min。當提取溫度從75℃提高到80℃時含量有所提高，而提高到85℃時含量反而有所下降。第一列A較大，第三列C較小，這反映了因素A水平變動時，指標波動最大，因素C的水平變動時，指標波動很小。數(shù)據(jù)見表4。(3) 標準曲線的制備，用蒸餾水溶解移入250ml的容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻。7H2O）(C4H4O6NaK實驗選擇浸提溫度A、料液比B、提取時間C，作為花多酚提取的三個主要因素，見表1和表2。在一定pH條件下，酒石酸亞鐵與茶樹花多酚類物質(zhì)形成藍紫色的絡(luò)合物，在波長540 n