選修課臨床檢驗(yàn)9熒光定量pcr在臨床實(shí)驗(yàn)室診斷中的應(yīng)用(文件)
【正文】 方法：取胃活檢標(biāo)本 口腔標(biāo)本 意義： HP感染的診斷 探討 HP載量與治療的關(guān)系 FQ— PCR技術(shù)對(duì)性傳播疾病的檢測 一、梅毒螺旋體（ TP） 二、淋球菌（ NG） 三、沙眼衣原體、解脲脲原體（ CT、 UU） 四、單純庖疹病毒（ HSV） 五、乳頭瘤病毒（ HPV） 六、人類免疫缺陷病毒（ HIV） 七、其它病原體 FQ— PCR技術(shù)檢測 CT、 UU 發(fā)病率最高的性傳播疾病 治療與淋病完全不同 FDA批準(zhǔn)的 PCR檢測試劑盒 意義：可作為首選方法 FQ— PCR技術(shù)檢測 HIV HIV載量與感染的發(fā)展和愈后 Bagnarell:(92) HIV量高 ,免疫缺陷癥狀嚴(yán)重、潛伏期短 Pantaleo(95) HIV量低，潛伏期長，癥狀輕 根據(jù) HIV量預(yù)測發(fā)病時(shí)間和預(yù)后 FQPCR在腫瘤研究和診斷中的應(yīng)用 一、病毒感染與腫瘤 二、腫瘤相關(guān)基因的檢測 :常見癌基因 CerbB cmyc、 Nmyc、 Kras、 int Nras、 Mdm Cfas、 Ksam、 Met. 三、腫瘤標(biāo)志物的 mRNA表達(dá) 關(guān)于結(jié)核桿菌等 5項(xiàng)檢測的 具體應(yīng)用 概 述 用于臨床 PCR常規(guī)檢測三條件： ? SDA批準(zhǔn)使用的試劑盒 ?國家批準(zhǔn)符合要求的實(shí)驗(yàn)室 ?經(jīng)行政部門同意并培訓(xùn)后持證上崗 ? 結(jié)核分枝桿菌 (TB) 靶序列來源 : a. 單抗檢出的 TB抗原旦白編碼基因 b. TB特異性核酸片段克隆 c. 插 入序列 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)特點(diǎn) ?結(jié)核的 PCR臨床主要應(yīng)用 臨床評(píng)價(jià) ? 沙眼衣原體 (Ct) 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)特點(diǎn) 靶及引物選擇 ?外膜蛋白基因 (MOMPOMPI) ? 隱蔽性基因質(zhì)?？截? ? 16srRNA基 因 臨床評(píng)價(jià) ?細(xì)胞培養(yǎng) McCoy. Hela229金標(biāo)準(zhǔn) ? ELA法 ? PCR法 .專家希望 此法為新金標(biāo) ? HBVDNA 臨床評(píng)價(jià)： 般臨床靠免疫標(biāo)志 ， 但無法明確時(shí)可測 、阿德福韋及干擾素治療監(jiān)測 ? HCVRNA 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)特點(diǎn) ? 需擴(kuò)增二次 ? 低溫啟動(dòng) UDG系統(tǒng) RNA不穩(wěn)定性 注意事項(xiàng) 防止 RNase污染 杜絕溶血 臨床評(píng)估： ? 定性用于診斷 (只憑抗 HCV，無法 決定病毒存在狀況） ? 定量用于治療監(jiān)測 ? 基因分型 ? HLA 方法 : 免疫學(xué) 分子生物學(xué)： PCR SSCP RFLP 基因芯片 I 類 (A,B,C) 與疾病發(fā)生頻率有關(guān) II 類 (DR,DQ,DP) 等 移植配型 PCR 在臨床檢驗(yàn)應(yīng)用中的局限性 差之毫厘，失之千里 ，影響因素多，嚴(yán)格遵守操作規(guī)范
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