第十六章細(xì)胞因子與細(xì)胞粘附因子的測(cè)定(文件)
【正文】 00%)6 4 4/(73%)7 4 (27%)8 0 0 0 8 0/8(0%)細(xì)胞病變抑制法結(jié)果判斷舉例 * *結(jié)果： CPEI50稀釋度介于 4647之間，距離比例為 (7350)/(7327) =，效價(jià)為 ；同法計(jì)算 IFN標(biāo)準(zhǔn)品的 CPEI50稀釋度，將 IFN效價(jià)換算成國(guó)際單位， IFN國(guó)際單位 =樣品 CPEL50的稀釋度 /標(biāo)準(zhǔn)品CPEI50稀釋度 標(biāo)準(zhǔn)品的單位?；瘜W(xué)增活性 (chemokinesis)： 細(xì)胞因子增強(qiáng)細(xì)胞的隨機(jī)運(yùn)動(dòng)能力的特性 ,可采用瓊脂糖小滴化學(xué)動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)檢測(cè)。ELISA特異、簡(jiǎn)便易于推廣和標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)可同時(shí)檢測(cè)大量標(biāo)本且試驗(yàn)廢棄物便于處理細(xì)胞因子測(cè)定的首選方法二、流式細(xì)胞分析法 流式細(xì)胞分析法，是基于熒光抗體染色技術(shù)并借助流式細(xì)胞儀敏感的分辨力所建立的方法。細(xì)胞表面的粘附分子或細(xì)胞因子受體： 單克隆抗體技術(shù) 直接或間接熒光抗體染色 無(wú)需作細(xì)胞固定和非特異性結(jié)合位點(diǎn)的封閉 待測(cè)細(xì)胞是新鮮分離或培養(yǎng)的活細(xì)胞，保持良好狀態(tài)三、酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn) (ELISPOT或 ElisaSpot) 在包被有待測(cè)細(xì)胞因子抗體的微孔板上，加入可分泌相應(yīng)細(xì)胞因子的待測(cè)細(xì)胞，經(jīng)在有或無(wú)刺激物存在的條件下培養(yǎng)，待測(cè)細(xì)胞分泌細(xì)胞因子于其周?chē)?，并被板上的特異性抗體捕獲。216。臨床疾病治療效果的監(jiān)測(cè)和指導(dǎo)用藥216。 高敏感性方法：特異性的降低、廢棄物難處理182。炎癥局部細(xì)胞因子的水平：局部分泌液216。免疫熒光染色和流式細(xì)胞分析：注意待檢細(xì)胞的活性和狀態(tài)，以保 證結(jié)果的特異性（二）標(biāo)本的適當(dāng)選取216。 T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和上皮樣細(xì)胞分泌相應(yīng)細(xì)胞因子的 功能： IL IL IFNγ 和 GMCSF182。 1．細(xì)胞因子和細(xì)胞粘附分子的特性是什么？可分為幾類(lèi)？2．基于促進(jìn)細(xì)胞增殖生物學(xué)活性，檢測(cè) IL ILIL TNF等方法所使用的細(xì)胞依賴(lài)株與檢測(cè)原則是什么？3．細(xì)胞因子生物活性測(cè)定法的種類(lèi)，各用于哪些細(xì)胞因子的檢測(cè)，主要優(yōu)缺點(diǎn)？4． ELISA法在細(xì)胞因子和粘附分子檢測(cè)可應(yīng)用于哪些方面？5． ELISPOT的原理、用途、與 ELISA的異同是什么？思考題6．在應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞因子時(shí)，需要哪些靶細(xì)胞活化劑？各自的作用是什么？7．與細(xì)胞因子的生物活性測(cè)定法相比，免疫測(cè)定法的優(yōu)勢(shì)是什么？如何看待其現(xiàn)有的劣勢(shì)？試推測(cè)解決現(xiàn)存的不足和改進(jìn)方法的可能途徑。對(duì)某些特定疾病具有診斷價(jià)值；對(duì)細(xì)胞因子治療具有監(jiān)測(cè)和指導(dǎo)用藥的意義；對(duì)機(jī)體的免疫狀態(tài)具有評(píng)價(jià)作用。? 細(xì)胞因子或粘附分子的檢測(cè)方法包括生物學(xué)測(cè)定法和免疫測(cè)定法兩大類(lèi)。相關(guān)粘附分子的檢測(cè)有助于此類(lèi)疾病的診斷。 有助于提供有效的疾病診斷和機(jī)體免 疫狀態(tài)信息216。相應(yīng)細(xì)胞因子的基因和 mRNA表達(dá)：相應(yīng)細(xì)胞216。 基因分析法：利于細(xì)胞內(nèi)定位分析、操作煩瑣（一）方法的聯(lián)合應(yīng)用216。 細(xì)胞因子的檢測(cè)方法多種多
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