第十六章細胞因子與細胞粘附因子的測定(存儲版)
【正文】 子分泌細胞，斑點的顏色深淺程度與細胞分泌的細胞因子量相關 基本原理四、免疫學測定方法學評價216。 細胞因子的檢測方法多種多樣，各有利弊。相應細胞因子的基因和 mRNA表達：相應細胞216。相關粘附分子的檢測有助于此類疾病的診斷。對某些特定疾病具有診斷價值；對細胞因子治療具有監(jiān)測和指導用藥的意義；對機體的免疫狀態(tài)具有評價作用。 T細胞、巨噬細胞和上皮樣細胞分泌相應細胞因子的 功能： IL IL IFNγ 和 GMCSF182。炎癥局部細胞因子的水平：局部分泌液216。臨床疾病治療效果的監(jiān)測和指導用藥216。細胞表面的粘附分子或細胞因子受體： 單克隆抗體技術 直接或間接熒光抗體染色 無需作細胞固定和非特異性結合位點的封閉 待測細胞是新鮮分離或培養(yǎng)的活細胞，保持良好狀態(tài)三、酶聯(lián)免疫斑點試驗 (ELISPOT或 ElisaSpot) 在包被有待測細胞因子抗體的微孔板上，加入可分泌相應細胞因子的待測細胞，經(jīng)在有或無刺激物存在的條件下培養(yǎng)，待測細胞分泌細胞因子于其周圍，并被板上的特異性抗體捕獲?；瘜W增活性 (chemokinesis)： 細胞因子增強細胞的隨機運動能力的特性 ,可采用瓊脂糖小滴化學動力學試驗檢測。細胞毒活性測定法常用于 TNF等的測定252。 TNFα 和 TNFβ 與同一受體結合，故兩者生物學活性相似216。Wish 、 Hep2/c 人干擾素252。結果 客觀易于自 動化；適 用于大標本量 的測定 方法的特異性受依賴細胞株影響；放射性污染(1) 放射性核素摻入法常 見 細 胞 因 子 3HTdR摻 入 檢 測 法 所 需 細 胞 及 參 考 試 驗 條 件細 胞 株 所需濃度 （細胞數(shù) /ml） 3HTdR前培養(yǎng)時間 3HTdR后培養(yǎng)時間 檢測細胞因子 210 5 48 1820 IL1L929 210 5 56 16 IL1CTLL2 105 24 46 IL2FDCP1,32DCL27 510 4 24 48 IL3 105 24 46 IL4CH12 510 3 48 6 IL5B13 510 4 36 12 IL5T88M 110 5 24 12 IL5BCL1 105 72 6 IL5CloneK,IN/2bx 105 24 46 IL7TS1 310 4 66 6 IL9T10 105 72 6 IL11UT7 10 5 72 6 SCF（干細胞因子）CCL64* 510 8 72 8 TGFβ, IF 510 4 24 48 GMCSFM14/ 510 4 24 48 MCSF/GCSF特點：不使用放射性核素， 以細胞代謝變化為增殖指征 指示細胞的增殖情況與線粒體代謝活性相關 測定步驟類似與同位素摻入法相比摻入物： MTT而非 3HTdR；反應條件：選用的細胞及其濃度、 培養(yǎng)時
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