第十六章細(xì)胞因子與細(xì)胞粘附因子的測(cè)定-文庫(kù)吧在線文庫(kù)
【正文】 間不同(2) MTT 比色法細(xì)胞株 /原代細(xì)胞 細(xì)胞終濃度（細(xì)胞數(shù) /ml） 加入 MTT前溫育時(shí)間（ h） 檢測(cè)細(xì)胞因子B9， MH60,BSF2,TTD1 510 4/210 5 96/48 IL6B911 510 4 96 IL11B913 510 4 96 IL13KYM1D4 210 3 72MV3D9 510 3 120 TGFβWEHI164/clone13 210 3 72 TNF32D/Mp110S 110 3 44L929 210 5 56 TNFCTLL2 105 2224 IL2小鼠基質(zhì)細(xì)胞 , 32DCL27 10 5 72 IL3細(xì)胞增殖或抑制活性檢測(cè)的 MTT比色法常用靶細(xì)胞 對(duì)指示細(xì)胞具有破壞作用的細(xì)胞因子，若與細(xì)胞共育將會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。 RNA印跡法216。 DNA擴(kuò)增法216。在細(xì)胞的增殖過程中， DNA合成的增加使得指示細(xì)胞對(duì)核苷或堿基的需求增多，若將核苷標(biāo)記上可以示蹤的同位素（ 3H/125I ），通過檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的同位素含量，則可反映細(xì)胞增殖的程度 。本法常用于 TNF等的測(cè)定二、細(xì)胞毒活性測(cè)定法基本原理252。抑制病毒蝕斑形成或抑制病毒的產(chǎn)量三、抗病毒活性測(cè)定法常用于檢測(cè)抗病毒活性的細(xì)胞株常用于攻擊細(xì)胞的病毒檢測(cè)抗病毒活性的方法216。 MTT染色時(shí)，必須考慮待檢樣品中有無(wú)激活靶細(xì)胞的因素。216。區(qū)分不同分泌特性的細(xì)胞亞群： Th1細(xì)胞 IFNγ Th2細(xì)胞 IL4216。機(jī)體免疫狀態(tài)的評(píng)估216。常用臨床標(biāo)本：抗凝全血，并分離獲得單個(gè)核細(xì)胞216。舉例：182。? 細(xì)胞因子和粘附分子檢測(cè)的臨床意義。 三、評(píng)估機(jī)體的免疫狀態(tài)、判斷治療效果及預(yù)后 ※ 機(jī)體免疫應(yīng)答的強(qiáng)弱可通過細(xì)胞因子或粘附分子的表達(dá)水平來反映，其過高或過低表達(dá)均系免疫調(diào)節(jié)異常的結(jié)果※ 細(xì)胞因子和粘附分子的水平，作為觀察治療效果和判斷預(yù)后的重要指標(biāo)※ 接受治療的患者進(jìn)行細(xì)胞因子水平的監(jiān)測(cè)，對(duì)保證治療效果具有指導(dǎo)意義。療效觀察和預(yù)后判斷：疾病急性期和恢復(fù)期雙份標(biāo)本進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀測(cè)216。182。優(yōu)點(diǎn)： 特異性高 操作簡(jiǎn)便、快速，無(wú)需依賴細(xì)胞株 影響因素較少且易控制，重復(fù)性好，方法容易標(biāo)準(zhǔn)化。 ELISA法不僅可以用于細(xì)胞因子檢測(cè)，也可用于可溶性細(xì)胞因子受體或可溶性粘附因子的測(cè)定 敏感性偏低不能判斷細(xì)胞因子的生物學(xué)活性。 該法操作復(fù)雜、影響因素較多，在試驗(yàn)前應(yīng)對(duì)所用的病毒進(jìn)行滴定。 若選用 L929細(xì)胞，其不宜生長(zhǎng)過密。A549252。死、活細(xì)胞情況可用同位素 51Cr釋放法判斷，或應(yīng)用臺(tái)盼蘭染色死細(xì)胞后直接計(jì)數(shù)。 一、促進(jìn)細(xì)胞增殖和增殖抑制測(cè)定法216。第 十六 章 細(xì)胞因子與細(xì)胞粘附因子的測(cè)定第一節(jié) 生物學(xué)測(cè)定方法 一、促進(jìn)細(xì)胞增殖和抑制細(xì)胞增殖測(cè)定法 二、細(xì)胞毒活性測(cè)定法 三、抗病毒活性測(cè)定法 四、趨化活性測(cè)定法 五、生物學(xué)活性測(cè)定
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