【正文】 Th1/Th2細胞平衡狀態(tài)： IL IL IL10和 IFNγ（三）細胞因子的聯(lián)合檢測二、特定疾病診斷的輔助指標(biāo) 許多疾病過程均可出現(xiàn)粘附分子和細胞因子表達的異常改變，高表達、低表達或是缺陷均可與某些特定疾病密切關(guān)聯(lián)，同時還可反映疾病的進程 （一）細胞因子檢測在特定疾病診斷中的意義（二）粘附分子檢測在特定疾病診斷中的意義粘附分子有可溶性和膜結(jié)合性兩種形式，均與機體的免疫狀態(tài)和疾病的發(fā)生有關(guān)，在炎癥、腫瘤轉(zhuǎn)移和器官移植排斥反應(yīng)中發(fā)揮著重要的作用。疾病預(yù)防一、臨床應(yīng)用原則 細胞因子和粘附分子的 異質(zhì)性 、 功能交叉性 和 多樣性、來源的復(fù)雜性 和 組織細胞的非特異性 ，決定了在進行這些分子檢測時，必須對方法選擇和結(jié)果判斷作出綜合考慮。趨化因子誘導(dǎo)細胞移動的方式四、趨化活性測定法敏感性較高特異性不高操作繁瑣易受干擾五、生物學(xué)活性測定方法學(xué)評價第二節(jié) 免疫學(xué)測定法 細胞因子 (或受體 )與相應(yīng)的特異性抗體 ( 單克隆抗體或多克隆抗體 )結(jié)合，通過同位素、熒光或酶等標(biāo)記技術(shù)加以放大和顯示， 從而定性或定量顯示細胞因子 (或受體 )的水平。 用 TNFα 與 TNFβ 特異性中和抗體作阻斷試驗，以區(qū)別兩類 TNF216。因此，待測細胞因子作一系列稀釋后加至指示細胞培養(yǎng)體系，以檢測培養(yǎng)細胞的死細胞數(shù)作為判斷指標(biāo)，死細胞數(shù)量與細胞因子的活性呈正比。 第一節(jié) 生物學(xué)測定 方法 DNA檢測的分子生物學(xué)測定法：216。應(yīng)用系列稀釋的細胞因子標(biāo)準品，制作其活性與劑量關(guān)系的標(biāo)準曲線，以此作為待測品活性的定量測定的基礎(chǔ)。182。 1．分離和培養(yǎng)待檢細胞 2．細胞固定 3．封閉非特異性結(jié)合位點 4．染色與分析 基本步驟使用流式細胞分析法，可以：216。 基因分析法：利于細胞內(nèi)定位分析、操作煩瑣（一）方法的聯(lián)合應(yīng)用216。? 細胞因子或粘附分子的檢測方法包括生物學(xué)測定法和免疫測定法兩大類。免疫熒光染色和流式細胞分析：注意待檢細胞的活性和狀態(tài)，以保 證結(jié)果的特異性（二）標(biāo)本的適當(dāng)選取216。216。 標(biāo)本稀釋度log4兩孔平均CPE細胞病變抑制程度細胞病變抑制積累細胞病變積累細胞病變抑制率3 0 4 16 0 16/16(100%)4 0 4 12 0 12/12(100%)5 0 4 8 0 8/8(100%)6 4 4/(73%)7 4 (27%)8 0 0 0 8 0/8(0%)細胞病變抑制法結(jié)果判斷舉例 * *結(jié)果： CPEI50稀釋度介于 4647之間，距離比例為 (7350)/(7327) =，效價為 ；同法計算 IFN標(biāo)準品的 CPEI50稀釋度，將 IFN效價換算成國際單位， IFN國際單位 =樣品 CPEL50的稀釋度 /標(biāo)準品CPEI50稀釋度 標(biāo)準品的單位。MDBK 多種族的 IFNα和 IFNγ本法常用于 IFN等的測定 ， IFN可誘導(dǎo)細胞產(chǎn)生抑制病