第十六章細胞因子與細胞粘附因子的測定-wenkub
2022-08-29 13:26:49 本頁面
【正文】 因 子 3HTdR摻 入 檢 測 法 所 需 細 胞 及 參 考 試 驗 條 件細 胞 株 所需濃度 （細胞數(shù) /ml） 3HTdR前培養(yǎng)時間 3HTdR后培養(yǎng)時間 檢測細胞因子 210 5 48 1820 IL1L929 210 5 56 16 IL1CTLL2 105 24 46 IL2FDCP1,32DCL27 510 4 24 48 IL3 105 24 46 IL4CH12 510 3 48 6 IL5B13 510 4 36 12 IL5T88M 110 5 24 12 IL5BCL1 105 72 6 IL5CloneK,IN/2bx 105 24 46 IL7TS1 310 4 66 6 IL9T10 105 72 6 IL11UT7 10 5 72 6 SCF（干細胞因子）CCL64* 510 8 72 8 TGFβ, IF 510 4 24 48 GMCSFM14/ 510 4 24 48 MCSF/GCSF特點：不使用放射性核素， 以細胞代謝變化為增殖指征 指示細胞的增殖情況與線粒體代謝活性相關(guān) 測定步驟類似與同位素摻入法相比摻入物： MTT而非 3HTdR；反應(yīng)條件：選用的細胞及其濃度、 培養(yǎng)時間不同(2) MTT 比色法細胞株 /原代細胞 細胞終濃度（細胞數(shù) /ml） 加入 MTT前溫育時間（ h） 檢測細胞因子B9， MH60,BSF2,TTD1 510 4/210 5 96/48 IL6B911 510 4 96 IL11B913 510 4 96 IL13KYM1D4 210 3 72MV3D9 510 3 120 TGFβWEHI164/clone13 210 3 72 TNF32D/Mp110S 110 3 44L929 210 5 56 TNFCTLL2 105 2224 IL2小鼠基質(zhì)細胞 , 32DCL27 10 5 72 IL3細胞增殖或抑制活性檢測的 MTT比色法常用靶細胞 對指示細胞具有破壞作用的細胞因子，若與細胞共育將會導(dǎo)致細胞死亡。也可通過結(jié)晶紫、萘酚藍黑、 MTT、 NBB等著染活細胞，再用脫色液脫出染料后酶標儀比色測定吸光值。Wish 、 Hep2/c 人干擾素252。MDBK 多種族的 IFNα和 IFNγ本法常用于 IFN等的測定 ， IFN可誘導(dǎo)細胞產(chǎn)生抑制病毒RNA和 DNA合成的酶，保護細胞不受病毒感染，產(chǎn)生細胞病變效應(yīng)（ CPE）。 TNFα 和 TNFβ 與同一受體結(jié)合，故兩者生物學(xué)活性相似216。182。細胞毒活性測定法常用于 TNF等的測定252。 標本稀釋度log4兩孔平均CPE細胞病變抑制程度細胞病變抑制積累細胞病變積累細胞病變抑制率3 0 4 16 0 16/16(100%)4 0 4 12 0 12/12(100%)5 0 4 8 0 8/8(1
語文相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1