第十六章細(xì)胞因子與細(xì)胞粘附因子的測(cè)定-全文預(yù)覽
【正文】 樣，各有利弊。特定疾病的輔助診斷216。 一個(gè)斑點(diǎn)代表一個(gè)細(xì)胞因子分泌細(xì)胞，斑點(diǎn)的顏色深淺程度與細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子量相關(guān) 基本原理四、免疫學(xué)測(cè)定方法學(xué)評(píng)價(jià)216。 1．分離和培養(yǎng)待檢細(xì)胞 2．細(xì)胞固定 3．封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn) 4．染色與分析 基本步驟使用流式細(xì)胞分析法，可以：216。根據(jù)抗體性質(zhì)和特異性不同，夾心法 ELISA可分為：1. PcAb與 McAb夾心法2. McAb與 PcAb夾心法 3. 雙 McAb夾心法4. 細(xì)胞、 McAb夾心法一、 ELISA方法ELISA法是應(yīng)用最為廣泛的非均相酶標(biāo)免疫分析技術(shù)，一步或多步的抗原抗體反應(yīng)和一步酶促反應(yīng)構(gòu)成 ELISA的基本步驟，可作定性或定量分析。趨化性 (chemotaxis)： 誘導(dǎo)細(xì)胞向由 趨化因子低濃度出向 趨化因子高濃度處作定向移動(dòng)的特性 ,可采用瓊脂糖和微孔小室趨化試驗(yàn)。根據(jù)病變程度找出 CPEI50的標(biāo)本稀釋范圍，并以此計(jì)算出距離比例和確定 IFN效價(jià)。182。 TNF活性測(cè)定靶細(xì)胞：小鼠成纖維細(xì)胞株 L92 LM、 注意：182。細(xì)胞病變效應(yīng) (CPE)、216。Ratec 大鼠干擾素252。應(yīng)用系列稀釋的細(xì)胞因子標(biāo)準(zhǔn)品，制作其活性與劑量關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線，以此作為待測(cè)品活性的定量測(cè)定的基礎(chǔ)。試驗(yàn)時(shí)，與細(xì)胞增殖或抑制方法一樣，以已知活性的細(xì)胞因子標(biāo)準(zhǔn)品為對(duì)照。細(xì)胞 代謝產(chǎn)物測(cè)定法 代謝產(chǎn)物熒光強(qiáng)度測(cè)定法和指示細(xì)胞表面標(biāo)記或可溶性分子測(cè)定法細(xì)胞增殖檢測(cè)方法分類 通過(guò) 檢測(cè)細(xì)胞 DNA合成的增加或減少來(lái)判斷細(xì)胞增殖的方法。 核酸酶保護(hù)分析 測(cè) 定法 生物學(xué)測(cè)定法分類根據(jù) 細(xì)胞因 子特 定的生物學(xué)活性 ,應(yīng)用相應(yīng)的指示系統(tǒng) ,同時(shí)與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比測(cè)定 ,從而得知樣品中細(xì)胞因子的活性水平 ,一般以活性單位 (U/ml)表示生物活性測(cè) 定 法 原理有助于細(xì)胞因子檢測(cè)的活性作用刺激細(xì)胞增殖或集落形成的活性維持細(xì)胞生長(zhǎng)和存活的特性抑制細(xì)胞生長(zhǎng)或破壞細(xì)胞的效應(yīng)促進(jìn)細(xì)胞趨化或抗病毒作用以 細(xì)胞因子依賴性細(xì)胞株為靶向 ，通過(guò)觀察特定的細(xì)胞因子刺激或抑制依賴性細(xì)胞株增殖來(lái)評(píng)估細(xì)胞因子的活性水平。 第一節(jié) 生物學(xué)測(cè)定 方法 DNA檢測(cè)的分子生物學(xué)測(cè)定法：216。 細(xì)胞因子細(xì)胞粘附因子 是介導(dǎo)細(xì)胞間及細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)間粘附作用的分子，其化學(xué)本質(zhì)為糖蛋白，可以細(xì)胞膜表面表達(dá)和可溶性兩種形式存在。 原位雜交法216。細(xì)胞 代謝活性測(cè)定方法 3HTdR、 125IUdR摻入法或 MTT等比色法216。因此，待測(cè)細(xì)胞因子作一系列稀釋后加至指示細(xì)胞培養(yǎng)體系，以檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞的死細(xì)胞數(shù)作為判斷指標(biāo)，死細(xì)胞數(shù)量與細(xì)胞因子的活性呈正比。死細(xì)胞數(shù)、 51Cr釋放量越高或比色測(cè)定的吸光值越低，表明待測(cè)細(xì)胞因子的細(xì)胞毒活性則越高。L929 小鼠干擾素252。 VSV、 EMCV及 Sindb
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