【正文】 入一個(gè)適當(dāng)?shù)娜萘科恐?，混合均勻；?）制備一個(gè)25%樣本池，將等量的低值及中值樣本加入一個(gè)適當(dāng)?shù)娜萘科恐校旌暇鶆?；?）在同一批測(cè)定中分析所有標(biāo)本，先按濃度升高順序排列標(biāo)本，再按降低順序排列標(biāo)本，以平衡系統(tǒng)誤差；（9）計(jì)算低值樣本池分析物的平均濃度，把其他的測(cè)量結(jié)果減去此值，將所有的分析結(jié)果列表。當(dāng)數(shù)據(jù)呈非線性分布時(shí)，任一干擾物質(zhì)濃度下的干擾程度可通過(guò)圖直接得到，還可利用非線性回歸分析的二次多項(xiàng)式模型計(jì)算得出。相對(duì)于對(duì)照標(biāo)本，存在偏倚的實(shí)驗(yàn)標(biāo)本結(jié)果提示有干擾存在。（1）實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的選擇原則：來(lái)自具有相關(guān)疾病的病人標(biāo)本；服用相關(guān)藥物的病人標(biāo)本；尿毒癥患者的標(biāo)本；具有其他成分的標(biāo)本等。將分析結(jié)果列表，計(jì)算每個(gè)標(biāo)本兩次測(cè)量結(jié)果的平均值及平均偏倚（被評(píng)價(jià)方法的結(jié)果減去參考方法的結(jié)果），以參考方法所測(cè)得分析物濃度為X軸，以偏倚為Y軸，作圖。 如果可以測(cè)量干擾物質(zhì)的濃度，繪制偏倚相對(duì)于可疑干擾物質(zhì)濃度圖，以觀察可疑干擾物質(zhì)的濃度是否與偏倚相關(guān)。同時(shí)，本指南亦可指導(dǎo)臨床實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行試劑穩(wěn)定性評(píng)定，以期確定試劑穩(wěn)定性范圍或?qū)υ噭┱f(shuō)明書標(biāo)稱穩(wěn)定性范圍的驗(yàn)證由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí)對(duì)本指南進(jìn)行修訂。，質(zhì)控物應(yīng)有可靠的來(lái)源，穩(wěn)定性應(yīng)在一年以上，應(yīng)盡可能采用人血清基質(zhì)，可選用定值或非定值質(zhì)控品，質(zhì)控物的使用（儲(chǔ)存、復(fù)溶）應(yīng)嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明，質(zhì)控物的定值與靶值的確定應(yīng)按照本室的標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行。，如果發(fā)現(xiàn)冰箱溫度可能存在問(wèn)題，應(yīng)該及時(shí)調(diào)整冰箱溫度，以符合試劑保存的要求，如果不能調(diào)整，應(yīng)該及時(shí)轉(zhuǎn)移冰箱內(nèi)的試劑。 測(cè)定穩(wěn)定期末試劑工作液的空白值： 兩組平均值之間的一致性實(shí)驗(yàn)的樣本要求（1）臨床樣本（人血清）：可避免基質(zhì)效應(yīng)對(duì)結(jié)果的影響，力求新鮮，但不可選用含有對(duì)測(cè)定方法具有明確干擾作用物質(zhì)的樣本，如溶血、脂血、黃疸或含有某些特定藥物的樣本。每個(gè)濃度水平樣本重復(fù)測(cè)定至少6次，計(jì)算平均值。表1：穩(wěn)定性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)記錄表評(píng)價(jià)試劑盒名稱/批號(hào)：實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目：樣本名稱/批號(hào)/采集的日期：儀器：試劑廠家：試劑保存溫度：校準(zhǔn)品/批號(hào)：操作者：審核者：測(cè)定日期：樣本號(hào)新配制的工作液穩(wěn)定期末的工作液測(cè)定1測(cè)定2……均值測(cè)定1測(cè)定2……均值12空白吸光度空白測(cè)定值 結(jié)果判斷：（1）兩組平均值之間的一致性（t檢驗(yàn)法） 按下式計(jì)算t值： 式中：新配制試劑工作液測(cè)量數(shù)據(jù)的平均值 穩(wěn)定期末試劑工作液測(cè)量數(shù)據(jù)的平均值 新配制試劑工作液測(cè)量數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差 穩(wěn)定期末試劑工作液測(cè)量數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差 新配制試劑工作液測(cè)量次數(shù) 穩(wěn)定期末試劑工作液測(cè)量次數(shù)注：為了保證平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差的準(zhǔn)確度，和均≥6若t顯著性水平a(通常a=)，自由度為+2的臨界值，則兩個(gè)平均值之間無(wú)顯著性差異。本指南基于國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）》（以下簡(jiǎn)稱《辦法》）的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)參考值（參考區(qū)間）的有關(guān)定義、實(shí)驗(yàn)所需材料、實(shí)驗(yàn)過(guò)程及實(shí)驗(yàn)結(jié)果處理進(jìn)行了原則性要求，包括建立參考區(qū)間的方法學(xué)和程序。二、定義 ：根據(jù)設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)篩選出進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的個(gè)體（確定一個(gè)人的健康狀況通常是非常重要的）。主題特異性參考個(gè)體在本指導(dǎo)文件中不包含在內(nèi)。：通過(guò)測(cè)定，并用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行處理。如：GLU：～ mmol/L。每一項(xiàng)研究均有不同的健康標(biāo)準(zhǔn)。表1列出了基本的排除標(biāo)準(zhǔn)，此表并沒(méi)有囊括所有的排除標(biāo)準(zhǔn)，每個(gè)項(xiàng)目應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況細(xì)化排除標(biāo)準(zhǔn)。各個(gè)項(xiàng)目可根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整。許多情況下，年齡相關(guān)的參考區(qū)間更適用于臨床診斷。調(diào)查問(wèn)卷的內(nèi)容詳見(jiàn)圖1。生物學(xué)因素包括代謝和血液動(dòng)力學(xué)，方法學(xué)因素包括樣品收集和處置等。不應(yīng)使用溶血、脂血、黃疸的血清或血漿樣本。應(yīng)注意體液收集的時(shí)間段。 四、參考值（參考區(qū)間）評(píng)估的方法和結(jié)果報(bào)告1. 新的分析物質(zhì)或分析方法 方法描述此方法適用于新分析物、新分析方法及以前的分析物參考值的建立。（3）參加參考區(qū)間實(shí)驗(yàn)的參考個(gè)體應(yīng)簽署書面同意協(xié)議，并完成調(diào)查問(wèn)卷。（7） 用被分析物檢測(cè)的常規(guī)方法，對(duì)被選擇的參考個(gè)體進(jìn)行采樣。（10）檢測(cè)數(shù)據(jù)，設(shè)計(jì)圖表，以評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)分布。 結(jié)果分析 參考區(qū)間包括兩個(gè)值，即參考上限和參考下限。 所需最少的參考個(gè)體數(shù)：120個(gè)觀測(cè)值可以滿足90%的置信限，153個(gè)觀測(cè)值可以滿足95%的置信限，198個(gè)觀測(cè)值可以滿足99%的置信限。 離群值的處理：設(shè)定比值D/R，其中D=最大值次大值，或D=最小值次小值，R為所有觀測(cè)值的極差。 參考值分組：對(duì)不同性別、不同年齡之間參考區(qū)間的差異應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證，每一組至少應(yīng)選擇120個(gè)參考個(gè)體。每一組平均值的顯著性差別應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)檢驗(yàn)。或者是否小于3。測(cè)量系統(tǒng)之間的可比性可以通過(guò)相應(yīng)的方法進(jìn)行驗(yàn)證。 參考值（參考區(qū)間）確認(rèn)：有三種方法可用于參考值（參考區(qū)間）轉(zhuǎn)移可接收性的評(píng)價(jià)。在此研究中，整個(gè)過(guò)程應(yīng)與首次研究保持一致。如果初始參考值（參考區(qū)間）的研究資料詳細(xì)，接收實(shí)驗(yàn)室的上述條件均與初始參考值（參考區(qū)間）研究相同，參考值（參考區(qū)間）可以直接進(jìn)行轉(zhuǎn)移，不需要進(jìn)行確認(rèn)實(shí)驗(yàn)?？山邮盏霓D(zhuǎn)移條件應(yīng)視具體情況而定： 使用相同的分析系統(tǒng)（方法和儀器）：（1）在相同的實(shí)驗(yàn)室里；（2）從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室；①檢測(cè)主體來(lái)自相同的地區(qū)或相同的人口統(tǒng)計(jì)學(xué)總體；②檢測(cè)主體來(lái)自不同的地區(qū)或不同的人口統(tǒng)計(jì)學(xué)總體； 使用不同的分析系統(tǒng)（不同的方法和不同的儀器）：（1）在相同的實(shí)驗(yàn)室里；（2）從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室； ①檢測(cè)主體來(lái)自相同的地區(qū)或相同的人口統(tǒng)計(jì)學(xué)總體； ②檢測(cè)主體來(lái)自不同的地區(qū)或不同的人口統(tǒng)計(jì)學(xué)總體； 如果首次參考值（參考區(qū)間）的測(cè)定已經(jīng)完成，則不同參考值（參考區(qū)間）的轉(zhuǎn)移應(yīng)著重注意兩個(gè)事項(xiàng)：即分析系統(tǒng)的結(jié)果可比性和樣本總體的可比性。 方法描述此方法適用于將已知的有效參考值（參考區(qū)間）從供給實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)移到接收實(shí)驗(yàn)室。但如果原始數(shù)據(jù)分布的偏倚十分明顯，則應(yīng)進(jìn)行l(wèi)og轉(zhuǎn)換，轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)分布盡可能接近高斯分布，然后再應(yīng)用Z檢驗(yàn)，對(duì)轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行檢驗(yàn)。兩組之間平均值差異應(yīng)用z檢驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。當(dāng)兩三個(gè)離群值處在數(shù)據(jù)分布的一側(cè)時(shí)，D≥1/3R規(guī)律常常不能識(shí)別出極值是否是具有顯著水平的異常值。如果實(shí)驗(yàn)分組，每一組至少需要120個(gè)參考個(gè)體數(shù)。有時(shí)，只有參考上限具臨床意義。（12）選擇估計(jì)方法、估計(jì)參考限和參考區(qū)間，對(duì)參考區(qū)間進(jìn)行分析。（9）按照被評(píng)價(jià)方法分析樣品，收集數(shù)據(jù)。（5）根據(jù)排除標(biāo)準(zhǔn)或體檢結(jié)果，從參考樣品組排除不符合要求的參考個(gè)體。（1）根據(jù)醫(yī)學(xué)科技文獻(xiàn)，建立適宜的生物變異和分析干擾的項(xiàng)目列表。通常情況下，樣本在采集后，應(yīng)盡快進(jìn)行處置和檢測(cè)，盡量減少放置時(shí)間。樣本需要抗凝時(shí)，應(yīng)選擇抗凝劑，應(yīng)明確樣本的采集方法。選擇適宜的采血管，采血管不能引入外源性干擾。 項(xiàng)目ID 樣本ID 姓名： 電話： 地址： 年齡： 性別： 民族： 身高： 體重： 職業(yè)： 醫(yī)師姓名： 您認(rèn)為自己健康嗎？ 是 否 您進(jìn)行規(guī)律性的鍛煉嗎？ 如果是，練習(xí)時(shí)間（小時(shí)/星期）： 練習(xí)強(qiáng)度：（輕）1 2 3 4 5 6 7 8 9 10（重） 最近曾經(jīng)生??？ 是 否 如果是，生病時(shí)間： 疾病名稱： 您正在服藥嗎？ 是 否 如果是，服用哪些藥品： 您是否高血壓？ 是 否 您是否服用維他命營(yíng)養(yǎng)品？ 是 否 如果是，服用哪些營(yíng)養(yǎng)品： 您在工作是否接觸危險(xiǎn)化學(xué)品？ 是 否 如果是，接觸哪些化學(xué)品： 您是否吸煙？ 是 否 如果是，香煙種類： 吸煙頻度： 您是否有特殊飲食習(xí)慣？ 是 否 如果是，請(qǐng)描述： 您是否飲酒？ 是 否 如果是，酒品種類： 飲酒頻度： 您是否正在接受醫(yī)生治療？ 是 否 如果是，原因： 您近期是否曾經(jīng)住院治療？ 是 否 如果是，原因： 地點(diǎn)： 您是否有家族遺傳病？ 是 否 如果是，遺傳病描述： 您近期是否服用阿司匹林或其他止痛藥？ 是 否 如果是，原因： 時(shí)間： 您近期是否服用抗酸藥或其他胃病藥？ 是 否 如果是，原因： 時(shí)間： 您近期是否服用減肥藥？ 是 否 女性調(diào)查者： 是否月經(jīng)？ 是 否如果是，上次月經(jīng)期的時(shí)間： 如果否，是否接受荷爾蒙調(diào)節(jié)治療？ 是 否 是否在哺乳期？ 是 否是否懷孕期？ 是 否如果是，預(yù)產(chǎn)期時(shí)間： 您近期是否使用口服或植入的避孕藥物？ 是 否圖1 采樣調(diào)查問(wèn)卷（接上表）2. 分析前和分析中需考慮的因素 項(xiàng)目準(zhǔn)備：對(duì)所有的分析前條件，包括項(xiàng)目準(zhǔn)備、樣品收集和處理、分析方法、儀器，應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格限定，限定條件應(yīng)可同時(shí)應(yīng)用于參考個(gè)體和患者人群。除非特別需要（嬰兒、老年人），參考個(gè)體通常不應(yīng)是臨床病人。調(diào)查問(wèn)卷常只需要回答“是”或“否”即可確定，也可與體檢同時(shí)進(jìn)行。最常用的分組標(biāo)準(zhǔn)是年齡和性別。用于參考值研究的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)具有詳細(xì)的描述和證明，實(shí)驗(yàn)操作者根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)來(lái)判定參考樣品組的健康狀態(tài)，調(diào)查問(wèn)卷可用于評(píng)價(jià)每個(gè)參考個(gè)體的健康狀態(tài)。：病人樣本的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果，與參考值、參考值分布、參考限、參考區(qū)間作比較。：源自參考值的分布，用于描述部分參考值的位置（小于或等于、大于或等于、下限/上限。：經(jīng)過(guò)對(duì)一定數(shù)量參考個(gè)體的測(cè)量和觀查，所獲得的檢測(cè)結(jié)果。（參考人群的數(shù)量通常是未知的，因此它是一個(gè)假定的實(shí)體。同時(shí)，本指南亦可指導(dǎo)臨床實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行參考值（參考區(qū)間）的確定或轉(zhuǎn)移。 具體格式不要求，但應(yīng)包含以下內(nèi)容，可參考下表：穩(wěn)定性試劑評(píng)價(jià)報(bào)告試劑名稱： 委托單位： 通訊地址：聯(lián)系人： 聯(lián)系方式： 電話： 傳真：評(píng)價(jià)內(nèi)容評(píng)價(jià)依據(jù)所用儀器評(píng)價(jià)系統(tǒng)質(zhì)控物質(zhì)臨床標(biāo)本評(píng)價(jià)結(jié)果： 結(jié)論：評(píng)價(jià)人： 技術(shù)負(fù)責(zé)人： 評(píng)價(jià)負(fù)責(zé)人： 報(bào)告日期：實(shí)驗(yàn)室（蓋章）備注：以上檢測(cè)結(jié)果僅對(duì)所檢測(cè)的樣品有效 實(shí)驗(yàn)室地址：附件10：體外診斷試劑分析性能評(píng)估指導(dǎo)原則——參考值（參考區(qū)間）（征求意見(jiàn)稿） 一、概述參考值（參考區(qū)間）是體外診斷試劑的重要指標(biāo)之一，也是臨床使用中判斷被檢測(cè)樣本是否正常的重要依據(jù)。 數(shù)據(jù)記錄可參考表1進(jìn)行數(shù)據(jù)記錄。（2）質(zhì)控品：選擇易得到的、有可靠來(lái)源，穩(wěn)定性好的定值或非定值質(zhì)控物、此質(zhì)控物至少要有兩個(gè)濃度水平。三、穩(wěn)定性的評(píng)估及數(shù)據(jù)處理方法： 測(cè)定新配制的試劑工作液和穩(wěn)定期末試劑工作液兩組平均值之間的一致性。試劑應(yīng)存放在說(shuō)明書規(guī)定的條件下。能定期（包括：每日、每周、每月、每季度……）對(duì)所用儀器進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng)，按儀器說(shuō)明書所要求定期更換易損零配