【正文】 地理位置 選擇參考個(gè)體：健康參考值的參考個(gè)體不要求是健康年青人，他們應(yīng)與疾病人群相似。 排除和分組排除標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了準(zhǔn)參考個(gè)體的非健康狀態(tài)，用于排除非健康參考樣本。：參考值低限和高限之間。參考人群也可以由一個(gè)人組成，例如為自身或其他人做參考。參考值（參考區(qū)間）評(píng)估資料是評(píng)價(jià)擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，也是產(chǎn)品注冊(cè)所需的重要申報(bào)資料之一。、試劑空白值實(shí)驗(yàn)的樣本要求生理鹽水（開瓶時(shí)間在三個(gè)月內(nèi)）應(yīng)該透明清澈如出現(xiàn)沉淀或者混濁應(yīng)及時(shí)更換。工作液配制應(yīng)嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明進(jìn)行，試劑瓶上要標(biāo)注打開的日期及開瓶后的失效日期并簽上名或縮寫，要注意配制好的工作液是否需要避光保存。其目的是為生產(chǎn)企業(yè)進(jìn)行穩(wěn)定性評(píng)估及準(zhǔn)備穩(wěn)定性研究資料提供原則性指導(dǎo)，也為注冊(cè)管理部門審核穩(wěn)定性研究資料提供技術(shù)參考。繪制偏倚相對(duì)于參考方法的分析物濃度圖。（三）以病人標(biāo)本評(píng)價(jià)干擾效果被評(píng)價(jià)的測(cè)量程序與參考程序或其他有比較資格的測(cè)量程序共同分析兩組病人標(biāo)本（實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組）。（1）基礎(chǔ)樣本池；（2）儲(chǔ)存溶液；（3）高值樣本池：基礎(chǔ)樣本池稀釋儲(chǔ)存溶液以達(dá)到所需濃度；（4）低值樣本池：準(zhǔn)備一個(gè)干擾物質(zhì)濃度接近臨床標(biāo)本平均濃度的樣本池。（5）分析物實(shí)驗(yàn)濃度：分析物實(shí)驗(yàn)濃度應(yīng)選擇兩個(gè)濃度水平。使用適當(dāng)純度的分析物將樣本池中分析物的濃度調(diào)整到醫(yī)學(xué)決定水平，但要避免引入其它的干擾物質(zhì)。在一些測(cè)量程序中，采用標(biāo)本前處理、樣本空白、血清基質(zhì)校正物和因子校正等手段以減少這些干擾物質(zhì)在平均濃度下的影響，只有當(dāng)患者樣本中干擾物質(zhì)濃度高于或低于平均水平時(shí)，由于干擾物質(zhì)引起的誤差才會(huì)顯現(xiàn)出來。其目的是為生產(chǎn)企業(yè)進(jìn)行干擾實(shí)驗(yàn)評(píng)估及準(zhǔn)備干擾實(shí)驗(yàn)評(píng)估資料提供原則性指導(dǎo)，也為注冊(cè)管理部門審核該部分分析性能評(píng)估資料提供技術(shù)參考。l 檢驗(yàn)批次數(shù)。如接近一致，按下列公式計(jì)算出F值，以批間精密度為例： F=Srr2/σrr2將計(jì)算出的F值和根據(jù)二組自由度從表6中查到的F值(p=)進(jìn)行比較，如計(jì)算F值小于查表得出F值，雖然實(shí)驗(yàn)室得到的標(biāo)準(zhǔn)差大于聲稱值，但在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無差異。置信區(qū)間與所測(cè)次數(shù)相關(guān)，次數(shù)愈多，可信限愈小。除補(bǔ)充由于質(zhì)控失控而增加的測(cè)試外，應(yīng)在進(jìn)行數(shù)據(jù)分析前，檢查數(shù)據(jù)中有無由于偶然差錯(cuò)引起的離群值(outlier)，可用下述剔除值的標(biāo)準(zhǔn)；從實(shí)施段已收集的40對(duì)均值的數(shù)據(jù)計(jì)算出總均值和標(biāo)準(zhǔn)差，出現(xiàn)下列任何一種情況都可認(rèn)為是離群值：（1）任何一對(duì)均值和總均值的差超過4倍標(biāo)準(zhǔn)差（2）任何一對(duì)中二個(gè)結(jié)果的絕對(duì)差值超過4倍標(biāo)準(zhǔn)差離群值不用于精密度的計(jì)算。在實(shí)施此項(xiàng)評(píng)估工作時(shí)，必須由同一個(gè)或一組操作者在同一臺(tái)儀器上進(jìn)行，應(yīng)該使用相同的校準(zhǔn)品、相同種類和批號(hào)的試劑。除補(bǔ)充由于質(zhì)控失控而增加的測(cè)試外，還應(yīng)再增加由于離群值不用于精密度的計(jì)算所需增加的檢驗(yàn)次數(shù)。四、精密度評(píng)估的方法和數(shù)據(jù)處理 試劑和校準(zhǔn)品：應(yīng)使用同一種類、同一批號(hào)的試劑和校準(zhǔn)物,如可能,只進(jìn)行一次校準(zhǔn)。所選樣本濃度應(yīng)在測(cè)量范圍內(nèi)有醫(yī)學(xué)意義，即至少有一個(gè)濃度在醫(yī)學(xué)決定水平(medical decision levels)左右。同時(shí)，本指南亦可指導(dǎo)臨床實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行定量檢測(cè)方法的精密度評(píng)估。X的誤差可以由數(shù)據(jù)范圍給以適當(dāng)補(bǔ)償，并且簡(jiǎn)單的線性回歸可以用來評(píng)價(jià)斜率和截距。 記錄測(cè)定結(jié)果（Xii和Yjj）。 在具有臨床意義范圍內(nèi)即醫(yī)學(xué)決定水平范圍內(nèi)，評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)樣品方法，通?；緩牡陀趨⒖挤秶牡拖薜礁哂趨⒖挤秶母呦蕖＃簩?duì)于比較、對(duì)方法，采用符合生產(chǎn)廠家要求的實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)行方法，或采用公認(rèn)的參考方法。對(duì)于開放檢測(cè)系統(tǒng)，也應(yīng)該對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行驗(yàn)證，其中最重要的一項(xiàng)便是準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)，準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)可以通過方法學(xué)比對(duì)來實(shí)現(xiàn)，利用兩種方法的比對(duì)對(duì)非配套系統(tǒng)的準(zhǔn)確度進(jìn)行評(píng)估是評(píng)估準(zhǔn)確度的方法之一。4． 注意事項(xiàng)： 加入體積：加入的標(biāo)準(zhǔn)液體積一般在樣本體積的10%以內(nèi)；并且保證在加樣過程中的取樣準(zhǔn)確度。由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí)對(duì)本指南進(jìn)行修訂。對(duì)于可報(bào)告范圍高限還應(yīng)計(jì)算乘以稀釋倍數(shù)后的還原濃度和相對(duì)偏差。三、可報(bào)告范圍的評(píng)估及數(shù)據(jù)處理方法 樣本要求最好選擇與測(cè)定樣本具有相同基質(zhì)的樣本?？蓤?bào)告范圍評(píng)估資料是評(píng)價(jià)擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，也是產(chǎn)品注冊(cè)所需的重要申報(bào)資料之一。反之則表示數(shù)據(jù)的精密度差，不能作線性評(píng)價(jià)。臨床標(biāo)準(zhǔn)的線性檢驗(yàn)中使用了兩個(gè)統(tǒng)計(jì)量，ADL（偏離直線平均差異average deviation from linearity）與PctBnd（百分區(qū)界 percent bound） ，對(duì)于大多數(shù)分析物PctBnd取5%。對(duì)b2與b3的檢驗(yàn)方法如下：計(jì)算統(tǒng)計(jì)量t，計(jì)算公式為：t = bi/ SEi其中，SEi 為每個(gè)非線性系數(shù)的斜率標(biāo)準(zhǔn)誤，計(jì)算公式為：S 其中，Y為回歸方程預(yù)測(cè)值，與為測(cè)定均值。(4)根據(jù)給定的顯著性水平a和重復(fù)測(cè)定次數(shù)查表得臨界值。（2）可采用其它形式進(jìn)行記錄，但應(yīng)注意保留原始數(shù)據(jù)。在評(píng)價(jià)報(bào)告中應(yīng)對(duì)所使用的稀釋液、添加物、溶劑等的材料來源加以注明。每份樣本的濃度與體積單位應(yīng)統(tǒng)一。三、線性范圍的評(píng)估及數(shù)據(jù)處理方法 基本要求（1）樣本基質(zhì)應(yīng)與臨床實(shí)驗(yàn)樣本相似，但不可采用含有對(duì)測(cè)定方法具有明確干擾作用物質(zhì)的樣本，如溶血、脂血、黃疸或含有某些特定藥物的樣本。（+2SD）附件3體外診斷試劑分析性能評(píng)估指導(dǎo)原則——線性范圍（征求意見稿） 一、概述線性范圍評(píng)估資料是評(píng)價(jià)擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，也是產(chǎn)品注冊(cè)所需的重要申報(bào)資料之一。三、 檢測(cè)限的評(píng)估和數(shù)據(jù)處理方法1. 實(shí)驗(yàn)材料和基本要求空白樣本的制備：空白樣本應(yīng)不含被測(cè)物，但其基質(zhì)應(yīng)與待測(cè)定常規(guī)樣本相同。由于一些概念在學(xué)術(shù)界還存在分歧，因此我們會(huì)通過上網(wǎng)征求意見和專家會(huì)的形式進(jìn)行討論，找到最理想、最適合企業(yè)及我國(guó)國(guó)情又能保證產(chǎn)品質(zhì)量的評(píng)價(jià)方法。我中心對(duì)于專家起草的指導(dǎo)原則的初稿進(jìn)行了適當(dāng)?shù)奈淖终{(diào)整，之后將分析性能評(píng)估指導(dǎo)原則發(fā)給十位相關(guān)專業(yè)的專家征求意見。體外診斷試劑產(chǎn)品性能評(píng)估包括檢測(cè)限、線性范圍、可報(bào)告范圍、準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)）、準(zhǔn)確度（方法學(xué)比較）、精密度、干擾實(shí)驗(yàn)、穩(wěn)定性、參考區(qū)間共九個(gè)項(xiàng)目。起草的主要依據(jù)CLSI發(fā)布的以下標(biāo)準(zhǔn):1. C28A2: How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory。意見返回后我們對(duì)專家的回復(fù)意見進(jìn)行了整理，對(duì)有些意見進(jìn)行了采納，有些意見暫時(shí)沒有采納。附件2體外診斷試劑分析性能評(píng)估指導(dǎo)原則——檢測(cè)限（征求意見稿）一、概述檢測(cè)限（limit of detection）是指檢測(cè)方法可檢測(cè)出的最低被測(cè)量濃度，也稱檢測(cè)低限（lower limit of detection）或最小檢出濃度（minimum detectable concentration），有時(shí)也稱為分析靈敏度（analytical sensitivity）。如空白樣本難以得到，可采用5%牛血清或人血清白蛋白溶液。本指南基于國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）》、《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)定量測(cè)定方法的線性評(píng)價(jià)》的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)定量檢測(cè)方法中線性范圍的評(píng)估方法和數(shù)據(jù)處理方法進(jìn)行了原則性要求。進(jìn)行血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)時(shí)，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測(cè)定上限的混合人血清。（2）如果高/低濃度血清的值未知，可將每種血清編碼，用編碼代表每個(gè)血清的相對(duì)濃度。樣本稀釋液應(yīng)選用由廠家推薦或經(jīng)實(shí)驗(yàn)室證明可使用的產(chǎn)品，如可采用5%牛血清白蛋白或人白蛋白溶液。表3：線性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)記錄表（11個(gè)濃度水平，重復(fù)測(cè)定4次）項(xiàng)目：樣品：儀器：試劑/批號(hào)：校準(zhǔn)品/批號(hào)：操作者：審核者：測(cè)定日期：樣本號(hào)測(cè)定1測(cè)定2測(cè)定3測(cè)定4均值1234567891011 數(shù)據(jù)可用性檢查可通過繪制散點(diǎn)圖對(duì)測(cè)定數(shù)據(jù)的可用性進(jìn)行初步檢查。(5)如t值大于臨界值，則相應(yīng)的可疑值為離群值。由公式df = L*RRdf 計(jì)算自由度，L為樣本數(shù)，R為每個(gè)樣本的測(cè)定次數(shù)，Rdf為回歸自由度，即回歸方程中系數(shù)（包括b0）的個(gè)數(shù)。如ADL小于所要求的臨界判斷值，則可認(rèn)為數(shù)據(jù)組具有臨床可接受的線性，所擬合出的最適非線性多項(xiàng)式無臨床意義。當(dāng)PctBnd取5%時(shí), 尚可通過查不精密度和臨界值表判斷數(shù)據(jù)是否精密 (附表A和B), 如此時(shí)不精密度對(duì)應(yīng)的臨界值顯示P, 表明測(cè)量數(shù)據(jù)的精密度不符合作線性判斷的要求。本指南基于國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）》的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)定量檢測(cè)方法中可報(bào)告范圍的評(píng)估方法和數(shù)據(jù)處理方法進(jìn)行了原則性要求。 制備方法（1）低值樣本：將待測(cè)樣本（含被分析物）用混合人血清（含被分析物濃度水平較低）或5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液進(jìn)行稀釋，產(chǎn)生接近于方法線性范圍低限濃度水平的樣本，一般為5個(gè)濃度水平，濃度水平間隔應(yīng)小于線性范圍低限的10%。 可報(bào)告范圍低限：以方法性能標(biāo)示的CV值為可接受界值，由數(shù)據(jù)中選取CV值等于或小于可接受界值的最低濃度水平做為可報(bào)告范圍低限。二、回收實(shí)驗(yàn)評(píng)估的基本原則。 加入待測(cè)物的濃度：在保證總濃度在方法分析測(cè)量范圍內(nèi)，盡量使加入標(biāo)準(zhǔn)液后樣本中的被測(cè)物濃度達(dá)到醫(yī)學(xué)決定水平。準(zhǔn)確度評(píng)估資料是評(píng)價(jià)擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，也是產(chǎn)品注冊(cè)所需的重要申報(bào)資料之一。比對(duì)方法應(yīng)具有以下條件：（1）具有比實(shí)驗(yàn)樣品方法更好的精密度。分析濃度盡可能在報(bào)告的濃度范圍內(nèi)均勻分布。 計(jì)算每個(gè)樣本測(cè)定的均值（和），樣本重復(fù)測(cè)定間差值的絕對(duì)值（DXi 和DYi）及兩種方法測(cè)定結(jié)果間的差值（）。如果r2，那么必須通過分析另外一些樣品以擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍，然后再檢查全部數(shù)據(jù)系列。由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí)對(duì)本指南進(jìn)行修訂。不要為了得到較小的精密度，都選用較高值的樣品，甚至超出測(cè)量范圍。使用不同批號(hào)試劑和多次校準(zhǔn)都會(huì)增加檢驗(yàn)結(jié)果的變異程度。在進(jìn)行這種批內(nèi)精密度評(píng)估實(shí)驗(yàn)時(shí)，一次只能有一個(gè)離群值，當(dāng)離群值超過1個(gè)時(shí)，應(yīng)懷疑是否為方法不穩(wěn)定或操作者不熟悉所致。所用時(shí)間不得少于20個(gè)工作日，這樣所測(cè)到的精密度能更好地反映出該臨床實(shí)驗(yàn)室定量測(cè)量方法在一段時(shí)間內(nèi)的理想或最適的穩(wěn)定性。在剔除后應(yīng)再增加檢驗(yàn)次數(shù)，以保證至少有40批次，80個(gè)數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算。乘以標(biāo)準(zhǔn)差值就可得出95%可信限的上、下值。反之，說明實(shí)驗(yàn)室得到的標(biāo)準(zhǔn)差沒有達(dá)到方法應(yīng)達(dá)到的水平。l 每個(gè)批次重復(fù)檢驗(yàn)數(shù)和總檢驗(yàn)數(shù)。由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí)對(duì)本指南進(jìn)行修訂?；诖?，有兩種評(píng)估干擾物質(zhì)的基本方法，每一種方法都有它的優(yōu)點(diǎn)及內(nèi)在局限性，當(dāng)兩種方法同時(shí)使用時(shí)，可提供相互補(bǔ)充的信息。（2）儲(chǔ)存溶液：準(zhǔn)備一種適當(dāng)純度或者最接近循環(huán)形式的可疑干擾物質(zhì)。在大多數(shù)情況下，可選擇醫(yī)學(xué)決定水平、參考范圍的上、下限或病理濃度。（1）決定可疑干擾物質(zhì)的最高和最低濃度；（2）建立一個(gè)臨床上顯著性差別的標(biāo)準(zhǔn)；（3）決定每個(gè)濃度水平的重復(fù)次數(shù)（一般為3次）；（4）制備高、低值樣本池；（5）制備一個(gè)中值樣本池，將等量的高值及低值樣本加入一個(gè)適當(dāng)?shù)娜萘科恐?，混合均勻；?）制備一個(gè)75%樣本池，將等量的高值及中值樣本加入一個(gè)適當(dāng)?shù)娜萘科恐?，混合均勻；?）制備一個(gè)25%樣本池，將等量的低值及中值樣本加入一個(gè)適當(dāng)?shù)娜萘科恐?，混合均勻；?）在同一批測(cè)定中分析所有標(biāo)本，先按濃度升高順序排列標(biāo)本，再按降低順序排列標(biāo)本，以平衡系統(tǒng)誤差；（9）計(jì)算低值樣本池分析物的平均濃度，把其他的測(cè)量結(jié)果減去此值，將所有的分析結(jié)果列表。相對(duì)于對(duì)照標(biāo)本，存在偏倚的實(shí)驗(yàn)標(biāo)本結(jié)果提示有干擾存在。將分析結(jié)果列表，計(jì)算每個(gè)標(biāo)本兩次測(cè)量結(jié)果的平均值及平均偏倚（被評(píng)價(jià)方法的結(jié)果減去參考方法的結(jié)果），以參考方法所測(cè)得分析物濃度為X軸，以偏倚為Y軸，作圖。同時(shí)，本指南亦可指導(dǎo)臨床實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行試劑穩(wěn)定性評(píng)定，以期確定試劑穩(wěn)定性范圍或?qū)υ噭┱f明書標(biāo)稱穩(wěn)定性范圍的驗(yàn)證由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí)對(duì)本指南進(jìn)行修訂。，如果發(fā)現(xiàn)冰箱溫度可能存在問題，應(yīng)該及時(shí)調(diào)整冰箱溫度，以符合試劑保存的要求，如果不能調(diào)整，應(yīng)該及時(shí)轉(zhuǎn)移冰箱內(nèi)的試劑。每個(gè)濃度水平樣本重復(fù)測(cè)定至少6次，計(jì)算平均值。本指南基于國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）》（以下簡(jiǎn)稱《辦法》）的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)參考值（參考區(qū)間）的有關(guān)定義、實(shí)驗(yàn)所需材料、實(shí)驗(yàn)過程及實(shí)驗(yàn)結(jié)果處理進(jìn)行了原則性要求，包括建立參考區(qū)間的方法學(xué)和程序。主題特異性參考個(gè)體在本指導(dǎo)文件中不包含在內(nèi)。如：GLU：～ mmol/L。表1列出了基本的排除標(biāo)準(zhǔn)，此表并沒有囊括所有的排除標(biāo)準(zhǔn)，每個(gè)項(xiàng)目應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況細(xì)化排除標(biāo)準(zhǔn)。許多情況下，年齡相關(guān)的參考區(qū)間更適用于臨床診斷。生物學(xué)因素包括代謝和血液動(dòng)力學(xué)，方法學(xué)因素包括樣品收集和處置等。應(yīng)注意體液收集的時(shí)間段。（3）參加參考區(qū)間實(shí)驗(yàn)的參考個(gè)體應(yīng)簽署書面同意協(xié)議，并完成調(diào)查問卷。（10）檢測(cè)數(shù)據(jù)，設(shè)計(jì)圖表，以評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)分布。 所需最少的參考個(gè)體數(shù)：120個(gè)觀測(cè)值可以滿足90%的置信限，153個(gè)觀測(cè)值可以滿足95%的置信限，198個(gè)觀測(cè)值可以滿足99%的置信限。 參考值分組：對(duì)不同性別、不同年齡之間參考區(qū)