【正文】 據(jù)，也是產(chǎn)品注冊(cè)所需的重要申報(bào)資料之一。3. 數(shù)據(jù)處理（1） 數(shù)據(jù)記錄：將測(cè)定結(jié)果記錄于表格中。三、 檢測(cè)限的評(píng)估和數(shù)據(jù)處理方法1. 實(shí)驗(yàn)材料和基本要求空白樣本的制備：空白樣本應(yīng)不含被測(cè)物，但其基質(zhì)應(yīng)與待測(cè)定常規(guī)樣本相同。其目的是為生產(chǎn)企業(yè)進(jìn)行定量檢測(cè)方法檢測(cè)限評(píng)估提供原則性指導(dǎo)，也為注冊(cè)管理部門審核該部分分析性能評(píng)估資料提供技術(shù)參考。由于一些概念在學(xué)術(shù)界還存在分歧，因此我們會(huì)通過上網(wǎng)征求意見和專家會(huì)的形式進(jìn)行討論，找到最理想、最適合企業(yè)及我國(guó)國(guó)情又能保證產(chǎn)品質(zhì)量的評(píng)價(jià)方法。如“檢測(cè)限評(píng)估”中的檢測(cè)方法“連續(xù)測(cè)定20次，計(jì)算均值加2SD的方法缺少依據(jù)，建議采用可報(bào)告范圍評(píng)估下限所提供的方法。我中心對(duì)于專家起草的指導(dǎo)原則的初稿進(jìn)行了適當(dāng)?shù)奈淖终{(diào)整，之后將分析性能評(píng)估指導(dǎo)原則發(fā)給十位相關(guān)專業(yè)的專家征求意見。 A Statistical Approach。體外診斷試劑產(chǎn)品性能評(píng)估包括檢測(cè)限、線性范圍、可報(bào)告范圍、準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)）、準(zhǔn)確度（方法學(xué)比較）、精密度、干擾實(shí)驗(yàn)、穩(wěn)定性、參考區(qū)間共九個(gè)項(xiàng)目。附件：《體外診斷試劑分析性能評(píng)估系列指導(dǎo)原則（征求意見稿）》目 錄――編制說明——檢測(cè)限——線性范圍——可報(bào)告范圍——準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)）——準(zhǔn)確度（方法學(xué)比對(duì)）——精密度——干擾實(shí)驗(yàn)——穩(wěn)定性——參考值（參考區(qū)間）附件1：體外診斷試劑分析性能評(píng)估指導(dǎo)原則 編制說明 《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）》頒布后，體外診斷試劑產(chǎn)品的注冊(cè)過程中要求提供申報(bào)產(chǎn)品的分析性能評(píng)估資料，產(chǎn)品性能評(píng)估是產(chǎn)品研發(fā)、制定產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)等過程的重要技術(shù)支持研究過程，并可能對(duì)產(chǎn)品的質(zhì)量造成一定的影響。起草的主要依據(jù)CLSI發(fā)布的以下標(biāo)準(zhǔn):1. C28A2: How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory。 Approved Guideline.4. EP7A: Interference testing in clinical chemistry。意見返回后我們對(duì)專家的回復(fù)意見進(jìn)行了整理，對(duì)有些意見進(jìn)行了采納，有些意見暫時(shí)沒有采納?！?；“建議將批內(nèi)/批間精密度”改為“分析內(nèi)/分析間精密度”；“精密度是用變異系數(shù)表示還是用置信區(qū)間表示”；參考值：“結(jié)果分析中應(yīng)首先驗(yàn)證是否為正態(tài)分布，對(duì)于正態(tài)分布，則應(yīng)根據(jù)臨床應(yīng)用目采用均值177。附件2體外診斷試劑分析性能評(píng)估指導(dǎo)原則——檢測(cè)限（征求意見稿）一、概述檢測(cè)限（limit of detection）是指檢測(cè)方法可檢測(cè)出的最低被測(cè)量濃度，也稱檢測(cè)低限（lower limit of detection）或最小檢出濃度（minimum detectable concentration），有時(shí)也稱為分析靈敏度（analytical sensitivity）。同時(shí)，本指南亦可指導(dǎo)臨床實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行定量檢測(cè)方法檢測(cè)限評(píng)估。如空白樣本難以得到，可采用5%牛血清或人血清白蛋白溶液。如果檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)于低于零的結(jié)果報(bào)告為零，應(yīng)記錄初始響應(yīng)值，如吸光度值等。本指南基于國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）》、《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)定量測(cè)定方法的線性評(píng)價(jià)》的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)定量檢測(cè)方法中線性范圍的評(píng)估方法和數(shù)據(jù)處理方法進(jìn)行了原則性要求。二、線性范圍評(píng)估的基本原則（1）實(shí)驗(yàn)操作人員應(yīng)熟悉方法原理與操作，能對(duì)樣本進(jìn)行正確處理，確保儀器工作狀態(tài)正常，采用適當(dāng)?shù)男?zhǔn)品對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。進(jìn)行血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)時(shí)，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測(cè)定上限的混合人血清。（4）無(wú)論是建立或驗(yàn)證線性范圍，所選用的濃度水平應(yīng)可覆蓋整個(gè)預(yù)期測(cè)定范圍并包括與臨床有關(guān)的重要評(píng)價(jià)濃度，如最小測(cè)定濃度或線性范圍的最低限、不同的醫(yī)學(xué)決定水平、最大測(cè)定濃度或線性范圍的高限等。（2）如果高/低濃度血清的值未知，可將每種血清編碼，用編碼代表每個(gè)血清的相對(duì)濃度。制備非等濃度間隔的樣本時(shí)應(yīng)明確各樣本間的濃度關(guān)系，測(cè)定時(shí)可以這些樣本間的相對(duì)濃度比值做為X值。樣本稀釋液應(yīng)選用由廠家推薦或經(jīng)實(shí)驗(yàn)室證明可使用的產(chǎn)品，如可采用5%牛血清白蛋白或人白蛋白溶液。 驗(yàn)證標(biāo)稱線性參數(shù)：需測(cè)定46個(gè)濃度水平，每個(gè)濃度水平重復(fù)測(cè)定34次。表3：線性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)記錄表（11個(gè)濃度水平，重復(fù)測(cè)定4次）項(xiàng)目：樣品：儀器：試劑/批號(hào)：校準(zhǔn)品/批號(hào)：操作者：審核者：測(cè)定日期：樣本號(hào)測(cè)定1測(cè)定2測(cè)定3測(cè)定4均值1234567891011 數(shù)據(jù)可用性檢查可通過繪制散點(diǎn)圖對(duì)測(cè)定數(shù)據(jù)的可用性進(jìn)行初步檢查。檢驗(yàn)步驟如下:每組數(shù)據(jù)中有4個(gè)測(cè)定結(jié)果，分別記為 y1，y2，y3，y4。(5)如t值大于臨界值，則相應(yīng)的可疑值為離群值。在二級(jí)與三級(jí)方程中，b2與b3為非線性系數(shù)。由公式df = L*RRdf 計(jì)算自由度，L為樣本數(shù)，R為每個(gè)樣本的測(cè)定次數(shù)，Rdf為回歸自由度，即回歸方程中系數(shù)（包括b0）的個(gè)數(shù)。如p，表示此非線性系數(shù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，數(shù)據(jù)組為非線性，此時(shí)應(yīng)進(jìn)行臨床標(biāo)準(zhǔn)的線性與非線性檢驗(yàn)。如ADL小于所要求的臨界判斷值，則可認(rèn)為數(shù)據(jù)組具有臨床可接受的線性，所擬合出的最適非線性多項(xiàng)式無(wú)臨床意義。 對(duì)數(shù)據(jù)組進(jìn)行精密度檢驗(yàn)測(cè)量數(shù)據(jù)的精密度可直接影響多項(xiàng)式回歸分析的結(jié)果，為提高統(tǒng)計(jì)功效，需對(duì)數(shù)據(jù)組進(jìn)行精密度檢驗(yàn)。當(dāng)PctBnd取5%時(shí), 尚可通過查不精密度和臨界值表判斷數(shù)據(jù)是否精密 (附表A和B), 如此時(shí)不精密度對(duì)應(yīng)的臨界值顯示P, 表明測(cè)量數(shù)據(jù)的精密度不符合作線性判斷的要求。（4） 線性范圍（如為二階線性應(yīng)包括臨床允許誤差）。本指南基于國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）》的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)定量檢測(cè)方法中可報(bào)告范圍的評(píng)估方法和數(shù)據(jù)處理方法進(jìn)行了原則性要求。 二、可報(bào)告范圍評(píng)估的基本原則。 制備方法（1）低值樣本：將待測(cè)樣本（含被分析物）用混合人血清（含被分析物濃度水平較低）或5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液進(jìn)行稀釋，產(chǎn)生接近于方法線性范圍低限濃度水平的樣本，一般為5個(gè)濃度水平，濃度水平間隔應(yīng)小于線性范圍低限的10%。在一次運(yùn)行中將低值樣本重復(fù)測(cè)定10次，高值稀釋樣本重復(fù)測(cè)定3次。 可報(bào)告范圍低限：以方法性能標(biāo)示的CV值為可接受界值，由數(shù)據(jù)中選取CV值等于或小于可接受界值的最低濃度水平做為可報(bào)告范圍低限。本指南基于國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）》的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)采用回收實(shí)驗(yàn)進(jìn)行準(zhǔn)確度評(píng)估的實(shí)驗(yàn)方法和數(shù)據(jù)處理方法進(jìn)行了原則性要求。二、回收實(shí)驗(yàn)評(píng)估的基本原則。 在另一份樣本中加入同樣量的無(wú)被測(cè)物的溶劑，制成基礎(chǔ)樣本。 加入待測(cè)物的濃度：在保證總濃度在方法分析測(cè)量范圍內(nèi)，盡量使加入標(biāo)準(zhǔn)液后樣本中的被測(cè)物濃度達(dá)到醫(yī)學(xué)決定水平。 （3） 回收樣本2：血清1ml+（濃度55mmol/L）； 采用待評(píng)價(jià)方法，按照從低到高的濃度順序，每個(gè)樣本測(cè)定3次，取平均值。準(zhǔn)確度評(píng)估資料是評(píng)價(jià)擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，也是產(chǎn)品注冊(cè)所需的重要申報(bào)資料之一。由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí)對(duì)本指南進(jìn)行修訂。比對(duì)方法應(yīng)具有以下條件：（1）具有比實(shí)驗(yàn)樣品方法更好的精密度。：進(jìn)行方法學(xué)對(duì)比實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)該對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行初步評(píng)價(jià)（可參考NCCLS EP10），并且對(duì)待評(píng)價(jià)方法進(jìn)行精密度評(píng)價(jià)（參考相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)），只有在以上評(píng)價(jià)完成并且達(dá)到相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)后，才可進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)。分析濃度盡可能在報(bào)告的濃度范圍內(nèi)均勻分布。 以上實(shí)驗(yàn)至少重復(fù)5天，即至少分析40個(gè)不同的臨床病人樣本。 計(jì)算每個(gè)樣本測(cè)定的均值（和），樣本重復(fù)測(cè)定間差值的絕對(duì)值（DXi 和DYi）及兩種方法測(cè)定結(jié)果間的差值（）。 檢查批內(nèi)離群點(diǎn)：計(jì)算樣本重復(fù)測(cè)定間差值（DXi 和DYi）的平均數(shù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果差值超出平均數(shù)4倍時(shí)，則判斷為離群點(diǎn)。如果r2，那么必須通過分析另外一些樣品以擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍，然后再檢查全部數(shù)據(jù)系列。精密度評(píng)估資料是評(píng)價(jià)擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，也是產(chǎn)品注冊(cè)所需的重要申報(bào)資料之一。由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí)對(duì)本指南進(jìn)行修訂。(漿)庫(kù)；當(dāng)實(shí)驗(yàn)室收集的樣品不穩(wěn)定或不易得到時(shí)，也可考慮使用穩(wěn)定的、以蛋白質(zhì)為基質(zhì)的商品物質(zhì)，如校準(zhǔn)品或質(zhì)控品。不要為了得到較小的精密度，都選用較高值的樣品，甚至超出測(cè)量范圍。此外，再根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目的性質(zhì)在線性區(qū)間內(nèi)選擇另一個(gè)值。使用不同批號(hào)試劑和多次校準(zhǔn)都會(huì)增加檢驗(yàn)結(jié)果的變異程度。要保存所有的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)和失控處理記錄。在進(jìn)行這種批內(nèi)精密度評(píng)估實(shí)驗(yàn)時(shí)，一次只能有一個(gè)離群值，當(dāng)離群值超過1個(gè)時(shí)，應(yīng)懷疑是否為方法不穩(wěn)定或操作者不熟悉所致。評(píng)估結(jié)束時(shí)共有40對(duì)，即80個(gè)測(cè)試結(jié)果。所用時(shí)間不得少于20個(gè)工作日，這樣所測(cè)到的精密度能更好地反映出該臨床實(shí)驗(yàn)室定量測(cè)量方法在一段時(shí)間內(nèi)的理想或最適的穩(wěn)定性。從10個(gè)批次中每一樣品8次差異算出批內(nèi)精密度。在剔除后應(yīng)再增加檢驗(yàn)次數(shù)，以保證至少有40批次，80個(gè)數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算。將所收集到的數(shù)據(jù)記錄在表2表2 精密度實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)記錄序號(hào)日期批次1批次2結(jié)果1結(jié)果2均值結(jié)果1結(jié)果2均值12…………1920按表3要求對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行進(jìn)一步計(jì)算，將結(jié)果填入表3表3 精密度實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)計(jì)算日批次1批次2（結(jié)果1結(jié)果2）2（結(jié)果1結(jié)果2）212…………1920利用表4中的結(jié)果(3)、(4)可計(jì)算出批內(nèi)精密度Sr： ，其中I=檢驗(yàn)日數(shù) 批間精密度估計(jì)值的計(jì)算將上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄在表4中表4：批間精密度實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)記錄序號(hào)日期第一批第二批結(jié)果1（均值結(jié)果1）2結(jié)果2（均值結(jié)果2）2結(jié)果1（均值結(jié)果1）2結(jié)果2（均值結(jié)果2）212……1920合計(jì)(1)(5)(2)(6)（3）（7）（4）（8）求出均值，公式為：從上表得出：求出批間精密度，公式為：從上表得出式中n=檢驗(yàn)總數(shù) 批間精密度估計(jì)值的置信區(qū)間由于檢驗(yàn)次數(shù)不可能無(wú)限增加，當(dāng)按規(guī)定方案，多次重復(fù)測(cè)量，就是在很好控制條件下，也很難得到相同的值，換言之，通過這樣實(shí)驗(yàn)的數(shù)值只是精密度的估計(jì)值，圍繞“真值”而變動(dòng)。乘以標(biāo)準(zhǔn)差值就可得出95%可信限的上、下值。如果臨床實(shí)驗(yàn)室所測(cè)的精密度小于生產(chǎn)企業(yè)（文獻(xiàn)）的精密度，說明臨床實(shí)驗(yàn)室所得到的精密度是合適的。反之，說明實(shí)驗(yàn)室得到的標(biāo)準(zhǔn)差沒有達(dá)到方法應(yīng)達(dá)到的水平。l 批間標(biāo)準(zhǔn)差及其95%置信區(qū)間。l 每個(gè)批次重復(fù)檢驗(yàn)數(shù)和總檢驗(yàn)數(shù)。附件8：體外診斷試劑分析性能評(píng)估指導(dǎo)原則——干擾實(shí)驗(yàn)（征求意見稿） 一、概述干擾物質(zhì)是體外診斷試劑使用過程中造成測(cè)量誤差的一個(gè)主要原因，針對(duì)體外診斷試劑進(jìn)行的干擾實(shí)驗(yàn)是指通過實(shí)驗(yàn)查找出對(duì)體外診斷試劑測(cè)量結(jié)果產(chǎn)生影響的物質(zhì)的過程。由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí)對(duì)本指南進(jìn)行修訂。（三）在實(shí)施評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)前，操作者必須熟悉儀器設(shè)備及測(cè)量程序并對(duì)精密度及準(zhǔn)確度進(jìn)行評(píng)價(jià)，在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)要避免遺留效應(yīng)影響分析結(jié)果，確保分析系統(tǒng)保持穩(wěn)定?；诖?，有兩種評(píng)估干擾物質(zhì)的基本方法，每一種方法都有它的優(yōu)點(diǎn)及內(nèi)在局限性，當(dāng)兩種方法同時(shí)使用時(shí)，可提供相互補(bǔ)充的信息。如果可以觀察到臨床顯著性影響，可以認(rèn)為此種物質(zhì)為干擾物質(zhì)，需要進(jìn)一步評(píng)估干擾物質(zhì)濃度與干擾程度的關(guān)系。（2）儲(chǔ)存溶液：準(zhǔn)備一種適當(dāng)純度或者最接近循環(huán)形式的可疑干擾物質(zhì)。其中，Z1α/2是雙側(cè)檢驗(yàn)的可信度為100(1α)% 時(shí)標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布相對(duì)應(yīng)的百分位數(shù)；Z1α是單側(cè)檢驗(yàn)的可信度為100(1α)% 時(shí)標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布相對(duì)應(yīng)的百分位數(shù)；Z1β是把握度為100(1β)%時(shí)標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布相對(duì)應(yīng)的的百分位數(shù)；dmax是檢測(cè)分析物濃度時(shí)最大允許的干擾（interference）；s是測(cè)量程序的重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差。在大多數(shù)情況下，可選擇醫(yī)學(xué)決定水平、參考范圍的上、下限或病理濃度。 當(dāng)dobs小于或等于dc時(shí)，不拒絕無(wú)效假設(shè)，認(rèn)為檢測(cè)物質(zhì)不是干擾物質(zhì)；當(dāng)dobs大于dc時(shí)，拒絕無(wú)效假設(shè)，接受備擇假設(shè)，認(rèn)為檢測(cè)物質(zhì)是干擾物質(zhì)。（1）決定可疑干擾物質(zhì)的最高和最低濃度；（2）建立一個(gè)臨床上顯著性差別的標(biāo)準(zhǔn)；（3）決定每個(gè)濃度水平的重復(fù)次數(shù)（一般為3次）；（4）制備高、低值樣本池；（5）制備一個(gè)中值樣本池，將等量的高值及低值樣本加入一個(gè)適當(dāng)?shù)娜萘科恐校旌暇鶆?；?）制備一個(gè)75%樣本池，將等量的高值及中值樣本加