【正文】 該研究為指導(dǎo)粉防己堿在肝纖維化防治中應(yīng)用有重要價值。承擔(dān)了包括國家自然科學(xué)基金在內(nèi)的各類科研項目20多項，先后獲省部級以上科技進步獎10項。 在體內(nèi)XXXXXXXXX，有效降低有效劑量、提高療效和降低副作用。 本課題首次研究XXXXX生物小分子通過XXXXX與中藥粉防己堿相聯(lián)合，多途徑、互補與協(xié)同防治肝纖維化。實驗設(shè)計指導(dǎo)者、熟練技術(shù)人員及輔助人員等各司其職，可保障研究有條不紊的進行。本課題組由掌握以上技術(shù)的成員組成，相關(guān)技術(shù)已應(yīng)用于科研工作。本研究是參閱大量文獻并結(jié)合自身以往深厚的肝纖維化防治研究基礎(chǔ)，特別是結(jié)合近四年國家自然科學(xué)基金資助研究成果，在XXXX 化學(xué)合成及功能研究、低劑量XXX抗肝纖維化作用和機制的前期工作基礎(chǔ)上，提出的多途徑、互補協(xié)同與靶向治療肝纖維化的新探索。(2)分組及處理XXXXXXXXXXXXXX。第五部分 XXXXXXXXXXXX(1)XXXXXXXX 在肝纖維化大鼠體內(nèi)的器官分布XXXXXXXXXX。新鮮分離的HSC，體外培養(yǎng)48 h后，作為靜止期HSC用于下游實驗，或培養(yǎng)1 w后消化傳代，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后，作為活化的HSC用于下游實驗。(3)競爭抑制XXXXXXXXXX。第三部分 XXXXX修飾長循環(huán)脂質(zhì)體與HSC體外結(jié)合活性 采用兩步膠原酶灌注和密度梯度離心法分離大鼠HSC，選擇靜止態(tài)和激活態(tài)的HSC，接種于6孔板上(105/mL)。具體方法如下：XXXXXXXXXX。XXXXXXXXXXXX。應(yīng)用XXXXXXXXXX。 擬解決的關(guān)鍵問題： 高藥物包封率、高配體修飾率的穩(wěn)定XXXXXXXX 制備。 XXXXXXXX 對膽總管結(jié)扎和CCl4大鼠肝纖維化防治作用。 不同類型脂質(zhì)體的制備、技術(shù)參數(shù)優(yōu)化、物理性質(zhì)鑒定和脂質(zhì)體藥物包封率、載藥量、配體結(jié)合率鑒定與提高。29(11 Suppl): Dooley S, Hamzavi J, Breitkopf K, et prevents activation of hepatic stellate cells and liver fibrosis in 2003。XXXXXXXXXX可以設(shè)想，如能取得預(yù)期效果，經(jīng)過良好設(shè)計的基礎(chǔ)研究后，這一XXXXXX應(yīng)用于臨床的時間不會太久，前景廣闊。迄今為止，尚未見到XXXXXXXXXXX。結(jié)合我們對Tet藥理作用的分子機制的研究結(jié)果，不難發(fā)現(xiàn)，XXXXXXXX。RGD在抑制TGFβ激活同時，還可阻止HSC與ECM結(jié)合，阻斷整合素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。③XXXXXXXXX。Smad 7是HSC TGFβ信號通路的最主要負(fù)反饋調(diào)節(jié)信號分子，上調(diào)Smad 7是抑制TGFβ對HSC不良生物效應(yīng)的有措施之一[4]。部分最新研究成果已經(jīng)整理成文發(fā)表在本領(lǐng)域有一定影響力的SCI索引源期刊上，并被SCI收錄(收錄號 IDS Number: 963XN)[2]（相關(guān)文章參詳見申請人簡歷及附件二、三）。然而，由于Tet的劑量安全范圍較小，以往研究發(fā)現(xiàn)的抗肝纖維化有效劑量與中毒劑量比較接近，故成為限制其臨床應(yīng)用的重要因素。目前國內(nèi)外絕大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，肝星狀細(xì)胞（hepatic stellate cell，HSC）激活是肝纖維化的關(guān)鍵，抑制HSC的激活對肝纖維化的防治有重要價值[1]。第一篇：申報國家自然科學(xué)基金項目申請書樣板申報國家自然科學(xué)基金項目申請書樣板各位申請人：科研處從全國成功申報國家自然科學(xué)基金項目中挑選了一份嚴(yán)格按照報告正文撰寫提綱要求撰寫，并在撰寫的整體布局、寫作方法上比較適宜的申請書作為樣板申請書，提供給其他申請人在撰寫申請書時參考。粉防己堿（tetrandrine，又名漢防己甲素）是中藥粉防己（Stephania tetrandra S Moore）的主要有效生物堿成分，具有廣泛的藥理作用。近年國內(nèi)Tet抗肝纖維化研究也由此逐漸走向低谷。這些全新研究成果進一步增強了我們開發(fā)這一傳統(tǒng)中藥的信心。在肝纖維化過程中，TGFβ信號通路還與整合素信號通路存在密切聯(lián)系。綜上所述，XXXXXXX，如能XXXXXX，可進一步實現(xiàn)XXXXX治療。研究還發(fā)現(xiàn)，M6P能提高RGD作用于HSC的靶向性，增加其局部濃度，使RGDM6P顯示出較RGD更強的抑制作用[14]?；谝陨舷盗醒芯炕A(chǔ)與設(shè)想，緊跟國內(nèi)外在制劑學(xué)方面的進展，我們擬設(shè)計XXXXXXXXXXX。結(jié)合國內(nèi)外同行的研究報道與我們的研究基礎(chǔ)，不難推斷，XXXXXXXXXXXXXXXXX。參考文獻 Friedman of disease: Mechanisms of hepatic fibrosis and therapeutic Clin Pract Gastroenterol Hepatol 2004。125(1): Ludbrook SB, Barry ST, Delves CJ, et integrin alphavbeta3 is a receptor for the latencyassociated peptides of transforming growth factors beta1 and J 2003。 大鼠HSC分離培養(yǎng)，XXXXXXX 修飾脂質(zhì)體與肝星狀細(xì)胞體外結(jié)合活性研究。XXXXXXXXX 的藥代動力學(xué)特征、組織分布特征和XXXXXXX ： 研究構(gòu)建XXXXXXXX，為抗肝纖維化藥物新劑型開發(fā)提供新型靶向載體。放射性計數(shù)法測定XXXXXX 與HSC結(jié)合活性，有效抑制HSC活化的劑量、時間參數(shù)等。合成反應(yīng)圖示如下。合成反應(yīng)圖示如下。(2)性質(zhì)鑒定XXXXXXXXXXXXXXXX。待貼壁后，1%胎牛血清DMEM培養(yǎng)過夜，細(xì)胞同步化。(4)細(xì)胞熒光定位、配體表面結(jié)合率與內(nèi)吞率測定XXXXXXXXXX。(1)XXXXXXX對HSC活化狀態(tài)影響XXXXXXXXX。(2)XXXXXXX 大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)采用XXXXXXXX。(3)治療效果檢測主要比較以下指標(biāo)：XXXXXXXXXXXXXXX。掌握了國內(nèi)外在受體調(diào)節(jié)藥物靶向、低毒性高效中藥新劑型開發(fā)和以HSC的靶標(biāo)的肝纖維化靶向治療中的最新研究動態(tài)，借鑒“雙靶向”干預(yù)的最新研究成果，并與自身實踐相結(jié)合，在理論上、實踐上均有可靠基礎(chǔ)。 人員配備合理，具有扎實的相關(guān)工作基礎(chǔ)和完善的實驗設(shè)備及技術(shù)支持。XXXXXXXXX是國家級重點學(xué)科和“211”工程重點建設(shè)學(xué)科的組成單位之一，長期從事肝纖維化防治研究，先后承擔(dān)包括國家自然科學(xué)基金在內(nèi)的各級各類科研項目20余項。本課題是利用分子機制指導(dǎo)中西藥聯(lián)合應(yīng)用、構(gòu)建中藥靶向制劑提高療效降低副作用和多途徑協(xié)同作用抗肝纖維化的全新嘗試，是在總結(jié)自身工作基礎(chǔ)上進行的大膽設(shè)想與創(chuàng)新。 研究證實XXXXXXX可成為抗肝纖維化藥物新劑型開發(fā)的有效載體。（參見申請人簡歷及附件二、三）。目前我們正在利用基金很少量結(jié)余款項進行合成RGDM6P修飾SSL的工作。構(gòu)思本課題的重要原因之一是探討解決簡單單一藥物治療中發(fā)現(xiàn)的諸多問題而開展的，密切相關(guān)的細(xì)胞學(xué)、動物學(xué)實驗基礎(chǔ)也是本實驗成功的重要保證。我們可免費使用相關(guān)設(shè)備如層流無菌室、質(zhì)譜儀、高效液相色譜儀、定量PCR儀、NICOMP Particle Sizer Model 3700分析系統(tǒng)、流式細(xì)胞儀和FlousS MultiImage圖像分析儀等，新華醫(yī)院和學(xué)院均有SPF級的動物飼養(yǎng)條件。作為基礎(chǔ)研究須結(jié)合科學(xué)研究發(fā)展趨勢來論述科學(xué)意義；作為應(yīng)用研究須結(jié)合國民經(jīng)濟和社會發(fā)展中迫切需要解決的關(guān)鍵科學(xué)和技術(shù)問題來論述其應(yīng)用前景?？赡苡械纳暾埲苏J(rèn)為在研究基礎(chǔ)中會介紹，立項據(jù)據(jù)中就不介紹了。應(yīng)該清晰地介紹究竟您在前期工作中發(fā)現(xiàn)了什么，別人的工作中存在什么問題，或者您對哪個科學(xué)問題有什么特殊想法等等。盡管國家不斷增加對基金會的投入，但研究經(jīng)費依然不足，目前在基礎(chǔ)研究領(lǐng)域，只可能支持那些有研究基礎(chǔ)、有特色或有創(chuàng)新性的申請項目。(5)主要參考文獻，包括國內(nèi)、外的關(guān)鍵性研究工作都要有所顯示，注意時間性，不必像研究生的開題報告，列出一大堆文獻，但太少了也不合適，容易讓評審人誤認(rèn)為你了解情況不夠。以材料為例，很多申請的目標(biāo)只是研究一種最佳工藝或者使某種材料達到什么具體性能，這類項目屬于開發(fā)性研究，沒提出任何科學(xué)問題或?qū)W術(shù)性問題，不符合基礎(chǔ)研究的要求。過去曾有評委指出，有的申請內(nèi)容什么都做，好像把教科書的目錄全列上了，這種申請多半出自高校老師之手。(3)擬解決的關(guān)鍵問題要清楚 不少項目申請中沒有填寫此項，評議人就很難知道申請人是否了解項目涉及研究的難點，以至難以判斷申請人完成本項目的可能性。3 ．?dāng)M采取的研究方案及可行性分析這部分包括有關(guān)方法、技術(shù)路線、實驗手段、關(guān)鍵技術(shù)等方面的說明。過去，我們曾見過一份申請書，這部分寫得相當(dāng)清楚。惟一可以稱作優(yōu)點的是可以在經(jīng)費預(yù)算中多計算一些實驗費。但不少申請人，特別是那些 “ 小字輩 ” 申請者，認(rèn)為研究方法、技術(shù)路線寫得太詳細(xì)了，會被別人剽竊。但一些 “ 小字輩 ” 擔(dān)心可能會多一點，由于他們的積累比較少，?旦好的思想被別人竊取，就很難再與其他人競爭。~ 時，應(yīng)設(shè)法加強自我保護。但更應(yīng)該從學(xué)術(shù)角度對研究方案進行可行性分析，突出申請入學(xué)術(shù)思路方面的好想法，闡明你的設(shè)計方案、研究方法、技術(shù)路線能否實現(xiàn)預(yù)期的研究目標(biāo)?，F(xiàn)在提特色與創(chuàng)新，相對比較客觀。但英文的解釋有很多，例如：bringforthnewideas，innovation，creativity 等等。由于知識經(jīng)濟(EconomicsBased on Knowledge)概念的出現(xiàn)(美國基金會有一位官員稱 “ 知識經(jīng)濟是工業(yè)界、市場的事 ”)，又出現(xiàn)了知識創(chuàng)新的提法。如果申請基金要提創(chuàng)新，可能難度較大。與可行性分析一樣，研究條件的特色并不能完全表明申請人的研究特色和學(xué)術(shù)思想新穎性。(3)不要泛泛地談學(xué)科交叉 學(xué)科交叉是學(xué)科發(fā)展的必然，基金會鼓勵學(xué)科交叉，但不等于說你的申請項目屬多學(xué)科交叉就算有特色、有創(chuàng)新，就應(yīng)該給予資助。目前，基礎(chǔ)研究可以有所為的，首先應(yīng)該關(guān)注國民經(jīng)濟中急需領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究和國內(nèi)已經(jīng)有一定研究基礎(chǔ)，有可能在世界上占領(lǐng)一席之地的研究領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究等兩個方面。我們在介紹這一點時，不少專家也稱有類似感受。預(yù)期研究結(jié)果的要求比過去預(yù)期成果的要求更為合理，成果是需要經(jīng)過評價的。這不是編出來的，真有這樣的事。僅僅能按原計劃完成的項目，我們稱之為保險項目，一般不會出大成果。應(yīng)用成果應(yīng)以經(jīng)濟、社會效益衡量，但由于基金投入有限，大多數(shù)屬于間接成果?，F(xiàn)在，我們逐漸強調(diào)論文水平及其影響，這樣的理論成果才能真正反映科