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ae3-基因工程-基因工程的基本操作程序1-wenkub

2023-03-09 14:07:47 本頁面
 

【正文】 (散彈射擊法) 用 限制酶 將 供體細(xì)胞 中的DNA切成許多片段 ,將這些片段分別 載入運(yùn)載體 ,然后通過運(yùn)載體分別轉(zhuǎn)入不同的受體細(xì)胞,讓供體細(xì)胞提供的外源DNA的所有片段分別在各個 受體細(xì)胞 中 大量復(fù)制 (即 擴(kuò)增 ),從中 找出含有目的基因 的細(xì)胞,再利用一定發(fā)方法將目的基因的 DNA片段 分離 出來。 使目的基因的片段在短時間內(nèi)成百萬倍地擴(kuò)增。通過分子雜交的方法,可以篩選出包含有所需基因的 DNA片段的細(xì)菌(或噬菌體)。 2)用 同一種 限制酶 切斷目的基因 ,使其產(chǎn)生 相同 的 黏性末端 。 步驟三:目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 ①直接導(dǎo)入法有電擊、顯微注射、直接吸收、基因槍等方法。 ( 4)基因槍法:在金屬微粒上涂一層目的基因,然后發(fā)射到宿主細(xì)胞中。 ( 2) λ噬菌體是一種細(xì)菌病毒,其環(huán)狀雙鏈 DNA可以作為目的基因的載體。 2)使含有目的基因的 重組質(zhì)粒進(jìn)入 受體細(xì)胞。 前三步的處理十分繁鎖,為保證目的基因得到有效利用,通常用大量的受體細(xì)胞來接受不多的目的基因。 多細(xì)胞生物的檢測,將每個受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)并誘導(dǎo)發(fā)育成完整個體,檢測這些個體是否攝入目的基因,攝入的基因是否表達(dá)(是否表現(xiàn)出相應(yīng)的性狀)。 1) 以下說法正確的是 ( ) A、 所有的限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列 B、 質(zhì)粒是基因工程中唯一的運(yùn)載體 C、 運(yùn)載體必須具備的條件之一是:具有多個限制酶切點(diǎn) , 以便與外源基因連接 D、 基因控制的性狀都能在后代表現(xiàn)出來 C 練習(xí) 2) 不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載體的理由是 A、 能復(fù)制 ( ) B、 有多個限制酶切點(diǎn)
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