【正文】 2 Σ 18 9 9雄 1819 5 1920 3 2021 6 2122 4 3 21 23 32 2 Σ 18 9 9第四節(jié) 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析處理一、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的記錄及表示方法實(shí)驗(yàn)過程中，要對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行及時、客觀的記錄。而多數(shù)是按性別、體重分群。二．小樣本的分組法主要有分群法(Stratify)和配對(群)法。分組時，為了滿足以上要求，避免主觀因素需要采取隨機(jī)抽樣的方法。而學(xué)生藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課時，由于時間等條件的限制，可酌情減少實(shí)驗(yàn)分組，只設(shè)空白對照組或模型對照組及受試藥一個劑量組。在分組時，對實(shí)驗(yàn)對象進(jìn)行隨機(jī)抽取可保證被研究的樣本能代表總體，從而減少抽樣誤差；在施加多個處理因素時采用隨機(jī)原則，可保證各組樣本的條件基本一致，可減少組間人為的誤差。對照有多種形式，如空白對照(又稱正常對照)，即對照組不施加處理因素，但給予同容積的溶劑；模型對照，即造成疾病模型，但不給予藥物處理，給予同容積的溶劑；陽性對照，即給予相同適應(yīng)癥的市售藥物，以監(jiān)控實(shí)驗(yàn)條件；假手術(shù)對照，即除造成某種疾病模型的關(guān)鍵步驟外，所有手術(shù)操作均同模型對照組。3． 做好實(shí)驗(yàn)室的清潔衛(wèi)生工作。【實(shí)驗(yàn)后】1． 將實(shí)驗(yàn)用器材清洗擦干，清點(diǎn)整理后放到指定位置。4． 在實(shí)驗(yàn)過程中遇到疑難之處，先要自己設(shè)法解決，如一時解決不了，應(yīng)向指導(dǎo)教師說明情況，請求教師協(xié)助解決?！緦?shí)驗(yàn)時】1． 實(shí)驗(yàn)器材的放置力求穩(wěn)當(dāng)、整齊、有條不紊。為了達(dá)到上述目的，要求學(xué)生做到以下幾點(diǎn)?！緦?shí)驗(yàn)前】1. 仔細(xì)閱讀實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，了解實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒃?、要求、方法和操作步驟。2． 嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)上的步驟進(jìn)行操作，準(zhǔn)確計(jì)算給藥量，節(jié)省器材和藥品。對于貴重儀器，在未熟悉其性能之前，不可輕易調(diào)試。如有損壞、缺少，應(yīng)及時報告老師。第二節(jié) 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本原則在進(jìn)行藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)時，為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的客觀性和可信性必須遵循以下基本原則：一．對照原則：進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時必須設(shè)對照組。自身對照，對照與實(shí)驗(yàn)均在同一實(shí)驗(yàn)對象進(jìn)行，即同一個體處理前后的對照，如給藥前后的對比等。三．重復(fù)原則：“重復(fù)”在這里有兩方面的含義，一是指實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可再現(xiàn)性，一是指實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)該來自足夠大的樣本。一．動物分組的一般原則實(shí)驗(yàn)時，要遵循受試藥組與對照組一致性原則，即兩組只允許在被實(shí)驗(yàn)因素方面有所不同，在其他方面(包括實(shí)驗(yàn)對象、實(shí)驗(yàn)者、實(shí)驗(yàn)條件、環(huán)境、時間以及儀器等)應(yīng)力求一致。所謂隨機(jī)抽樣就是指按著機(jī)會的安排來抽取樣本，換言之，不論任何被實(shí)驗(yàn)的對象都有相等的機(jī)會被抽出。分群法是按某幾個因素將對象先分為數(shù)群，而后再按隨機(jī)抽樣法將每群中的對象分到各組中去。配對(群)法，是把各方面相近似的對象配成多數(shù)的對或群(二組則二個一對，三組則三個一群)，然后每對(群)中的對象按隨機(jī)抽樣原則分到各組中去。凡是屬于量反應(yīng)資料（又稱計(jì)量資料，即藥物作用可以用數(shù)值的變化來表示，如血壓的高低、時間的長短、心率的快慢、腫瘤輕重、心輸出量的多少等）均應(yīng)以正確的單位和數(shù)值標(biāo)定。一般按照組別、劑量、動物數(shù)、觀測指標(biāo)的順序在表內(nèi)由左至右填寫。二、差值的顯著性測驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，實(shí)驗(yàn)者必須對所獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理，才能發(fā)現(xiàn)問題，得出結(jié)論。兩組數(shù)據(jù)的差值究竟是被實(shí)驗(yàn)因素所致，還是實(shí)驗(yàn)誤差影響所致，這不能主觀決定，而一定要通過生物統(tǒng)計(jì)學(xué)的客觀方法來判斷，以確定此差值是否有意義。應(yīng)視具體情況，進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)。分述如下：1．量反應(yīng)指標(biāo)的差值顯著性測驗(yàn)法差值顯著性測驗(yàn)最常應(yīng)用的方法為“t檢驗(yàn)法”。基本公式： ……(只適用于兩組例數(shù)相等或近似之情況)X……被實(shí)驗(yàn)個體實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo)量的大小?！瓨?biāo)準(zhǔn)誤，用以估計(jì)均值(X)的可靠程度或均值的實(shí)驗(yàn)誤差程度的人為單位。只關(guān)系到一組時為例數(shù)減一(n—1)，如關(guān)系到兩組時則為總例數(shù)減二(n1+n22)。將實(shí)驗(yàn)t值(ts)與標(biāo)準(zhǔn)t值(t0)相比較，判定標(biāo)準(zhǔn)如下：t0(1％)＞ts＞t0(5％)，＜P值，即無效假設(shè)成立的可能性小于5%，換言之，組間差異是因處理因素（如藥物）所致的可能性大于95%，組間差異有顯著意義。 標(biāo)準(zhǔn)t值可根據(jù)t值表查出，由該表有關(guān)自由度及特點(diǎn)危險率(5％或1％)而找出該標(biāo)準(zhǔn)t值。（3） 判斷無效假設(shè)是否成立。注意：數(shù)據(jù)中無0或1時才可以用上述公式計(jì)算x2值。學(xué)生每完成一次實(shí)驗(yàn)都應(yīng)提交相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)報告。 4．實(shí)驗(yàn)方法：實(shí)驗(yàn)步驟可作簡要描述。一般以縱軸表示反應(yīng)強(qiáng)度，橫軸表示時間或藥物劑量。7．結(jié)論：是對該實(shí)驗(yàn)所能證明的作用或作用機(jī)制的簡明總結(jié)。在做實(shí)驗(yàn)時因故外出或早退應(yīng)向指導(dǎo)老師請假，經(jīng)同意后方能離開實(shí)驗(yàn)室。一旦發(fā)現(xiàn)儀器和設(shè)備故障或損壞，應(yīng)立即向指導(dǎo)教師報告，以便能及時維修或更換，不可擅自拆修或調(diào)換。每次實(shí)驗(yàn)后應(yīng)清點(diǎn)實(shí)驗(yàn)器材，用品。實(shí)驗(yàn)室的清潔衛(wèi)生工作應(yīng)由各實(shí)驗(yàn)小組輪流負(fù)責(zé)打掃，以保證實(shí)驗(yàn)室環(huán)境整潔衛(wèi)生。二．大白鼠(rat)大白鼠亦屬哺乳綱，嚙齒目，鼠科，受驚時有攻擊性，易對實(shí)驗(yàn)者造成傷害，應(yīng)注意防護(hù)。其特點(diǎn)是性情溫順，易于飼養(yǎng)。四．豚鼠(guineapig)豚鼠又稱天竺鼠，荷蘭豬。也用于藥物安全性試驗(yàn)中的全身主動過敏性試驗(yàn)。六． 犬犬常用于觀察動物對冠狀動脈血流量的影響、心肌細(xì)胞電生理研究、降壓藥及抗休克藥的研究等；經(jīng)過訓(xùn)練，可與人合作，很適用于慢性實(shí)驗(yàn)，如條件反射試驗(yàn)。由于進(jìn)化較低，其離體標(biāo)本(如心臟、腓腸肌等)能在較長時間內(nèi)保持著自律性和興奮性，而且蟾蜍容易獲得并價格便宜，故經(jīng)常被用于研究藥物對心臟的影響、反射弧分析以及肌肉收縮等實(shí)驗(yàn)中。二．性別的選擇由于成年雌性動物的代謝存在著明顯的性周期的變化，這些變化會影響受試動物對某些實(shí)驗(yàn)因素的反應(yīng)狀態(tài)。制作大鼠腦永久性低灌注模型時，宜選用13周齡以上的大鼠，可大大降低死亡率。在實(shí)驗(yàn)時應(yīng)選擇與受試動物自然生活盡量一致的實(shí)驗(yàn)環(huán)境或人為地將實(shí)驗(yàn)環(huán)境控制到符合條件的程度。下面以藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)最常用動物為例，介紹大鼠和小鼠的編號標(biāo)記方法。3. 涂染咖啡色，用2%硝酸銀溶液。一般習(xí)慣涂染在左前腿上為1，左側(cè)腰部為2，左后腿上為3，頭部為4，背部正中為5，尾基部為6，右前腿為7，右側(cè)腰部為8，右側(cè)后腿上為9，不涂染鼠為10（如圖21A、B）。如左前腿和左后腿都標(biāo)記苦味酸溶液，表示13號，以此類推。第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)動物的捉持和給藥方法正確地捉拿與固定動物是藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本操作之一，也是實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的保證。此種方法熟練后，比兩手捉拿小鼠方便快捷，也便于右手的操作。一般在此位置推注藥液即可。操作時切忌粗暴，以防損傷食管及膈肌。3．肌肉注射法 小鼠固定如上述。右手持注射器，使針頭與皮膚呈45度角方向在左或右側(cè)下腹部刺入腹腔（圖243）。尾部用75％酒精棉球擦拭,使其血管充血和表皮角質(zhì)軟化。如針頭確在血管內(nèi)，則推注藥液無阻力，否則皮膚隆起發(fā)白，阻力增大，此時可退回針頭重新穿刺。二． 大鼠的捉持和給藥方法 捉拿大鼠時，實(shí)驗(yàn)者應(yīng)注意防護(hù)，如戴帆布手套進(jìn)行操作。采用灌胃管(安裝在5 ml注射器上的金屬灌胃管)長6～8cm， mm,尖端呈球狀。操作時，輕輕拉起注射部位皮膚，將注射針刺人注射部位皮下。將大鼠置于大鼠固定器內(nèi)，而將鼠尾留在固定器外，以供實(shí)驗(yàn)操作。家兔的固定方式有腹臥式和仰臥式兩種：作各種手術(shù)時，一般對麻醉后的動物進(jìn)行仰臥式固定，即將動物的四肢用粗的棉線固定，頭部則用兔頭固定夾固定。術(shù)者將開口器橫放于兔口中，將兔舌壓在開口器下面。若動物掙扎劇烈，應(yīng)拔出重新插入。將家兔放入固定盒內(nèi)，拔去耳外緣部位的兔毛，用酒精棉球涂擦靜脈部位皮膚，使靜脈充盈。圖247圖246四. 豚鼠的捉持和給藥方法先用左手掌迅速扣住其背部，抓住其肩胛上方，將手張開，用手指握住頸部或握住身體的四周，再拿起來。2. 皮下注射法 注射可選用大腿內(nèi)側(cè)，背部，