【正文】 第一章 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)知識(shí)第一節(jié) 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的和要求藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的在于通過循序漸進(jìn)的常規(guī)實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生驗(yàn)證和鞏固所學(xué)的基本理論；通過綜合實(shí)驗(yàn)了解較為先進(jìn)的科研方法和技能，同時(shí)培養(yǎng)學(xué)生聯(lián)想及綜合分析問題的能力；通過設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立思考、科學(xué)思維及創(chuàng)新的能力，建立實(shí)事求是、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度，提高解決實(shí)際問題的能力，為后續(xù)知識(shí)的學(xué)習(xí)和畢業(yè)后的科研工作奠定良好的基礎(chǔ)。為了達(dá)到上述目的，要求學(xué)生做到以下幾點(diǎn)。【實(shí)驗(yàn)前】1. 仔細(xì)閱讀實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，了解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、要求、方法和操作步驟。2. 結(jié)合實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，復(fù)習(xí)有關(guān)藥理學(xué)、生理學(xué)、生物化學(xué)及免疫學(xué)等方面的理論知識(shí)，做到充分理解。3. 預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)中可能出現(xiàn)的情況和發(fā)生的問題?！緦?shí)驗(yàn)時(shí)】1． 實(shí)驗(yàn)器材的放置力求穩(wěn)當(dāng)、整齊、有條不紊。2． 嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)上的步驟進(jìn)行操作，準(zhǔn)確計(jì)算給藥量，節(jié)省器材和藥品。要注意保護(hù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和標(biāo)本，避免與實(shí)驗(yàn)內(nèi)容無關(guān)的刺激。3． 仔細(xì)、耐心地觀察實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的各種現(xiàn)象，實(shí)事求是地記錄藥物出現(xiàn)反應(yīng)的時(shí)間、表現(xiàn)以及最后的轉(zhuǎn)歸，聯(lián)系課堂講授的內(nèi)容進(jìn)行思考。4． 在實(shí)驗(yàn)過程中遇到疑難之處，先要自己設(shè)法解決，如一時(shí)解決不了，應(yīng)向指導(dǎo)教師說明情況，請(qǐng)求教師協(xié)助解決。對(duì)于貴重儀器，在未熟悉其性能之前，不可輕易調(diào)試。5． 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)保持安靜、整潔。用藥后須用原瓶塞塞好，公用藥品和器材不可隨意挪動(dòng)?！緦?shí)驗(yàn)后】1． 將實(shí)驗(yàn)用器材清洗擦干，清點(diǎn)整理后放到指定位置。如有損壞、缺少，應(yīng)及時(shí)報(bào)告老師。將存活和死亡動(dòng)物分別送至指定處所。2． 認(rèn)真整理實(shí)驗(yàn)記錄，經(jīng)過分析思考，撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告，按時(shí)交給指導(dǎo)老師。3． 做好實(shí)驗(yàn)室的清潔衛(wèi)生工作。第二節(jié) 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本原則在進(jìn)行藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)時(shí)，為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的客觀性和可信性必須遵循以下基本原則：一．對(duì)照原則：進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)必須設(shè)對(duì)照組。設(shè)置對(duì)照組是為了使觀察指標(biāo)通過對(duì)比而發(fā)現(xiàn)其在處理因素（如藥物等）的作用下而表現(xiàn)出的某種特異性變化，消除各種無關(guān)因素的影響。這就要求在比較的各組實(shí)驗(yàn)對(duì)象之間除了處理因素不同外，所有非處理因素應(yīng)盡量保持相同，從而根據(jù)處理與不處理之間的差異，了解處理因素帶來的特殊效應(yīng)。對(duì)照有多種形式，如空白對(duì)照(又稱正常對(duì)照)，即對(duì)照組不施加處理因素，但給予同容積的溶劑；模型對(duì)照，即造成疾病模型，但不給予藥物處理，給予同容積的溶劑；陽(yáng)性對(duì)照，即給予相同適應(yīng)癥的市售藥物，以監(jiān)控實(shí)驗(yàn)條件；假手術(shù)對(duì)照，即除造成某種疾病模型的關(guān)鍵步驟外，所有手術(shù)操作均同模型對(duì)照組。自身對(duì)照，對(duì)照與實(shí)驗(yàn)均在同一實(shí)驗(yàn)對(duì)象進(jìn)行，即同一個(gè)體處理前后的對(duì)照，如給藥前后的對(duì)比等。若觀察給藥前后的指標(biāo)變化，此種對(duì)照必須以指標(biāo)本身對(duì)時(shí)間變化相對(duì)穩(wěn)定為首要前提。二．隨機(jī)原則：隨機(jī)是指對(duì)實(shí)驗(yàn)對(duì)象的實(shí)驗(yàn)順序和分組進(jìn)行隨機(jī)處理。在分組時(shí)，對(duì)實(shí)驗(yàn)對(duì)象進(jìn)行隨機(jī)抽取可保證被研究的樣本能代表總體，從而減少抽樣誤差；在施加多個(gè)處理因素時(shí)采用隨機(jī)原則，可保證各組樣本的條件基本一致，可減少組間人為的誤差。三．重復(fù)原則：“重復(fù)”在這里有兩方面的含義，一是指實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可再現(xiàn)性，一是指實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)該來自足夠大的樣本。樣本越大，重復(fù)的次數(shù)越多，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的誤差越小，可信度越高。第三節(jié) 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)中分組方法藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)一般應(yīng)當(dāng)設(shè)有正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性藥對(duì)照組及受試藥2個(gè)以上劑量組（新藥研發(fā)時(shí)要求至少設(shè)立三個(gè)給藥劑量組，以考察量效關(guān)系）等，如需手術(shù)造成疾病模型，還應(yīng)設(shè)假手術(shù)對(duì)照組。而學(xué)生藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課時(shí)，由于時(shí)間等條件的限制，可酌情減少實(shí)驗(yàn)分組，只設(shè)空白對(duì)照組或模型對(duì)照組及受試藥一個(gè)劑量組。一．動(dòng)物分組的一般原則實(shí)驗(yàn)時(shí)，要遵循受試藥組與對(duì)照組一致性原則，即兩組只允許在被實(shí)驗(yàn)因素方面有所不同，在其他方面(包括實(shí)驗(yàn)對(duì)象、實(shí)驗(yàn)者、實(shí)驗(yàn)條件、環(huán)境、時(shí)間以及儀器等)應(yīng)力求一致。除了被實(shí)驗(yàn)因素外，如果兩組還有不一致的地方，則對(duì)照組的存在失去其應(yīng)有意義。兩組之例數(shù)應(yīng)相等或相近似，認(rèn)為對(duì)照組只有少數(shù)幾例即可，是不正確的。分組時(shí)，為了滿足以上要求，避免主觀因素需要采取隨機(jī)抽樣的方法。所謂隨機(jī)抽樣就是指按著機(jī)會(huì)的安排來抽取樣本，換言之，不論任何被實(shí)驗(yàn)的對(duì)象都有相等的機(jī)會(huì)被抽出。隨機(jī)抽樣的方法很多，如應(yīng)用骰子法、單雙號(hào)法、卡片法以及隨機(jī)數(shù)表等。必須指出，隨機(jī)抽樣比較適宜大樣本時(shí)的分組，而小樣本時(shí)隨機(jī)抽樣不能保證各組的一致性，故小樣本時(shí)必須用人為的方法來保證各組的一致性，其目的是更好地貫徹隨機(jī)抽樣原則，與主觀選擇有本質(zhì)上的區(qū)別。二．小樣本的分組法主要有分群法(Stratify)和配對(duì)(群)法。分群法是按某幾個(gè)因素將對(duì)象先分為數(shù)群，而后再按隨機(jī)抽樣法將每群中的對(duì)象分到各組中去。有時(shí)先分為幾個(gè)大群，而后每大群再分為數(shù)小群，最后將每小群中的對(duì)象再隨機(jī)抽樣地分到各組中去。分群可按性別、體重或血壓等生理或病理因素進(jìn)行，一般應(yīng)以觀測(cè)指標(biāo)或?qū)τ^測(cè)指標(biāo)有主要影響的因素為準(zhǔn)來分群，如降壓實(shí)驗(yàn)，應(yīng)以血壓為準(zhǔn)來分群；豚鼠的平喘實(shí)驗(yàn)，須對(duì)豚鼠進(jìn)行初篩，分組時(shí)，應(yīng)以哮喘潛伏期來分群；降血脂實(shí)驗(yàn)，應(yīng)以血脂水平為準(zhǔn)來分群。而多數(shù)是按性別、體重分群。配對(duì)(群)法，是把各方面相近似的對(duì)象配成多數(shù)的對(duì)或群(二組則二個(gè)一對(duì)，三組則三個(gè)一群)，然后每對(duì)(群)中的對(duì)象按隨機(jī)抽樣原則分到各組中去。以最常用的分群法為例，說明如下：【舉例】由實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心取來同種屬并且出生日期相近似的小白鼠36只，欲就性別及體重將其分為實(shí)驗(yàn)及對(duì)照兩組，可進(jìn)行如下分組： 先就性別將動(dòng)物分為雌雄兩大群，每群再按體重分為數(shù)小群(以1g為組距)，假定其性別及體重分布情況如表11之左側(cè)所表示，則可按隨機(jī)抽樣原則將各小群的動(dòng)物分到兩組中去。如果有的小群動(dòng)物數(shù)是奇數(shù)時(shí)，則應(yīng)盡力照顧到兩組的均衡來分配之，最終的分組情況正如表11之右側(cè)所表示。表11 分 組 法分 布 情 況 分 組 情 況性別 體重（g） 動(dòng)物數(shù)(只)實(shí)驗(yàn)組 對(duì)照組雌 1819 6 1920 6 2021 3 2122 3 3 3 3 3 2 1 1 2 Σ 18 9 9雄 1819 5 1920 3 2021 6 2122 4 3 21 23 32 2 Σ 18 9 9第四節(jié) 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析處理一、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的記錄及表示方法實(shí)驗(yàn)過程中，要對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行及時(shí)、客觀的記錄。凡是屬于量反應(yīng)資料（又稱計(jì)量資料，即藥物作用可以用數(shù)值的變化來表示，如血壓的高低、時(shí)間的長(zhǎng)短、心率的快慢、腫瘤輕重、心輸出量的多少等）均應(yīng)以正確的單位和數(shù)值標(biāo)定。凡是由曲線記錄測(cè)量指標(biāo)的實(shí)驗(yàn)，應(yīng)盡量用曲線記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在所記錄的曲線中應(yīng)標(biāo)注有給藥或刺激記號(hào)、時(shí)間記號(hào)等。為便于對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析、比較，多以各組數(shù)據(jù)的均值加減標(biāo)準(zhǔn)差來制表或繪圖來表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果，表格要有表題，圖要有圖題。制作表格及作圖時(shí)，應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：1. 表格應(yīng)制三線表，表格中不用縱向線。一般按照組別、劑量、動(dòng)物數(shù)、觀測(cè)指標(biāo)的順序在表內(nèi)由左至右填寫。，通常是以實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo)的變化為縱坐標(biāo)，以時(shí)間或給藥劑量為橫坐標(biāo)而作圖，例如呼吸曲線、肌肉收縮曲線等；橫、縱坐標(biāo)軸均應(yīng)加以標(biāo)注，如藥物劑量、時(shí)間單位、測(cè)量指標(biāo)及單位等。，則以曲線形式體現(xiàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，繪制經(jīng)過各點(diǎn)的曲線或折線應(yīng)光滑；實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)若不呈連續(xù)性變化，則不宜用曲線表示，可采用直方圖的形式表示。4．表及圖下面應(yīng)有必要的說明，如統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性的表示等。二、差值的顯著性測(cè)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，實(shí)驗(yàn)者必須對(duì)所獲得