【正文】 從疫苗生產(chǎn)看生物制品的發(fā)展 ? 12世紀，中國開始用人痘接種預(yù)防天花，從癥狀輕微的天花病人身上人工接染到健康兒童，使其通過產(chǎn)生輕微癥狀的感染獲得免疫力，避免天花引起的嚴重疾病甚至死亡。 ?教學(xué)重點： 疫苗定義和制造方法、重要生物制品的制備方法。 ?教學(xué)難點： 核酸疫苗的制備方法。 ? 1721年 ，人痘接種法傳入英國，英國醫(yī)生 琴納 注意到感染過牛痘的人不會再感染天花。 ? 經(jīng)過一百多年的努力， 1980年 世界衛(wèi)生組織宣布全球 消滅了 天花 。 從疫苗生產(chǎn)看生物制品的發(fā)展 ? 第二代疫苗 —— 亞基疫苗的出現(xiàn)，克服了第一代疫苗潛在致病性的問題。 2 生物制品的分類 ? ：細菌類疫苗、病毒類疫苗、類毒素和聯(lián)合疫苗。 3 制造生物制品的生物學(xué)及免疫學(xué)基礎(chǔ) ? 生物學(xué)基礎(chǔ) ?A:細菌的代謝產(chǎn)物 。 ?B:外界環(huán)境因素對微生物的影響 一方面可創(chuàng)造有利條件，促進它們的生長繁殖，以制備生物制品；另一方面也可利用對微生物不利的因素使其發(fā)生變異或殺滅之，以更好地為制造生物制品服務(wù)。又稱獲得性免疫。 人工免疫 人 工 自 動 免 疫和人 工 被 動 免 疫的比較區(qū)別點 人 工 自 動 免 疫 人 工 被 動 免 疫接種物 疫苗，類毒素 抗體 （抗毒素，丙球）免疫出現(xiàn)時間 慢， 1 4 周 快，立即免疫力維持時間 長 （數(shù)月 數(shù)年） 較短 （ 2 周 數(shù)周）用途 主要用于預(yù)防 多用于緊急預(yù)防和治療人工被動免疫 (artificial passive immunization) : 是給人體注射含特異性抗體的 免疫血清 或細胞因子等制劑，使受者迅速獲得特異性免疫力的方法。但只可維持１ — ３個月。如霍亂、百日咳、傷寒、鉤端螺旋體疫苗。 缺點：不易保存，存在回復(fù)突變的危險 如卡介苗 牛痘 麻疹等 死疫苗 活疫苗制劑性狀 殺死的病原微生物 弱毒或無毒的病原微生物接種量及次數(shù) 量大， 2 3 次 量小， 1 次保存及有效期 易保存，較穩(wěn)定，有效期一年不易保存， 4 度數(shù)周失效免疫效果 較差，維持數(shù)月至一年 較好，維持 1 5 年或更長3）類毒素（ Toxid） 細菌外毒素經(jīng) %甲醛處理，使其毒性減弱而保留其免疫原性。 優(yōu)點：體內(nèi)可持續(xù)表達，免疫效果好，維持時間長。 目前獲準使用的有乙型肝炎疫苗。常用的植物有蕃茄、馬鈴薯、香蕉等。 4 使用后人群中發(fā)病死亡減少，消滅疾病。 ?如牛痘、麻疹苗等。 脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗 ?1953年由美國 Salk制成并在美國歐洲國家應(yīng)用。常規(guī)免疫 3針間隔 68周。 病毒的變異 ?由于流感病毒野毒株變異最多，分為甲乙丙三大型，其中甲１和甲３型曾造成流感大流行。 ?１ ８０年代病毒野毒株無血凝和吸附特性。 ?５ 現(xiàn)行麻疹疫苗免疫血清能中和所有已知的病毒基因型，說明現(xiàn)有麻疹疫苗株仍對所有麻疹病毒基因型具有保護作用。 ?預(yù)防用生物制品按所用材料一般分 細菌性疫苗、病毒性疫苗及類毒素 三大類。 乙肝亞單位疫苗 ? 2）化學(xué)疫苗 用化學(xué)方法提取病原體中有效免疫原成分體制成的化學(xué)純疫苗，比亞單位疫苗更為簡單。 流感病毒核蛋白 DNA疫苗 ? 通常也習(xí)慣地將 遺傳重組疫苗、合成肽疫苗和抗獨特型抗體疫苗 包括在新型疫苗范疇。 ? 凡是用細菌類毒素或毒素免疫馬或其他大動物，所取得的免疫血清、稱為抗毒素。 ?可用作抗原的生物活性物質(zhì) 有： 滅活病毒或細菌、活病毒 或細菌通過實驗室多次傳代得到的 減毒株、病毒或菌體提純物、有效蛋白成分、類毒素、細菌多糖、合成多肽 以及近年來發(fā)展 DNA疫苗所用的 核酸 等。 ?免疫原性 ：指疫苗接種進入機體后引起機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的強度和持續(xù)時間。 4 疫苗制備的基本過程 ?疫苗因種類不同，其制備方法也不相同，但總的來說， 經(jīng)典疫苗制備 的基本過程包括： 選擇適宜的培養(yǎng)基或細胞，進行菌、毒株大量繁殖，收集培養(yǎng)物，提純，半成品檢定，稀釋，分裝，成品檢定 。因提取工藝不同，疫苗所含成分也有一定的差別，但均含有 22 nm小顆粒乙型肝炎表面抗原。 新生嬰兒，特別是母親為乙型肝炎表面抗原陽性的新生嬰兒，產(chǎn)后應(yīng)立即給嬰兒接種乙肝疫苗，學(xué)齡前和學(xué)齡兒童亦應(yīng)接種。 質(zhì)量管理：國家一級管理 疫苗批簽發(fā)： 起始時間 : 2022年 1月 范圍 : 國內(nèi)及進口注冊的每一批乙肝疫苗 (用于上市銷售 ) 內(nèi)容 : 資料審核 +部分檢驗 監(jiān)督檢驗：成品全檢 二、現(xiàn)有乙肝疫苗存在的問題 (一 ). 現(xiàn)有疫苗劑量和免疫策略函待改進 (二 ). 臨床試驗不規(guī)范 (三 ). 首針及時率和全程覆蓋率急待提高 (四 ). 疫苗企業(yè)注冊標準和說明書存在的問題 (五 ). 不良反應(yīng) (SAE)無有效的報告、 鑒別、處理以及反饋制 度； (網(wǎng)絡(luò) ) (六 ). 加強科研 成人與兒童乙肝疫苗免疫持久性比較 乙肝疫苗免疫后抗 HBs陽轉(zhuǎn)率與年齡的關(guān)系 免后 兒童 成人 時間 陽轉(zhuǎn)率（ %） 陽轉(zhuǎn)率（ %） 7 12 24 36 48 60 中華計劃免疫雜志， 2022； 9（ 6） 中國公共衛(wèi)生雜志 , 2022。 ） 二、脊髓灰質(zhì)炎疫苗 ?疫苗性質(zhì)：減毒活疫苗 ， 為三價糖丸 。 （ 3） 口服疫苗時要看服下肚 ， 如兒童服苗后吐出 ， 應(yīng)先飲少量涼開水 ， 休息片刻后再服 。 ?用法與劑量：按瓶簽示量加滅菌注射用水 ， 待完全溶解搖勻后使用 。 ?接種對象：初免起始月齡 3足月 ， 周歲內(nèi)完成三針 ，每針間隔不少于 28天 ， 18— 24月齡加強一針 。 ?規(guī)格：重溶后每西林瓶 。 六、麻疹、腮腺炎、風(fēng)疹 減毒活疫苗（普祥立適） ?疫苗性質(zhì)：凍干減毒活疫苗 ， 小瓶裝的疫苗為白色至淡粉色小丸 ， 復(fù)溶后的疫苗會隨 PH值的微小變化 ， 由淺橙色到淺紅色 。 ?規(guī)格： 。 九、 A群腦膜炎球菌多糖疫苗 ?組成與性狀 本品系用 A群腦膜炎奈瑟氏菌培養(yǎng)液，經(jīng)提純獲得多糖抗原并加入適宜穩(wěn)定劑后凍干制成的多糖疫苗。 十、乙型腦炎減毒活疫苗 ?組成和性狀 本品系用流行性乙型腦炎減毒株接種原代地鼠腎單層細胞，經(jīng)培養(yǎng)后收獲病毒液，加保護劑凍干制成，為淡黃色疏松體，溶解后為澄明橘紅色液體。 ?通過食物攝取的疫苗和個性化疫苗。 生物制品的標準化 生物制品的標準化 ? 生物制品標準物質(zhì) ?定義 ：系指用于生物制品效價、活性或含量測定的或其特性鑒別、檢查的生物標準品或生物參考物質(zhì)。生產(chǎn)中已淘汰。 ?（ 3）組織培養(yǎng)。 ?％－ ％的甲醛或酚溶液。 細菌類疫苗和類毒素的一般制造方法 ?細菌類疫苗和類毒素均由細菌培養(yǎng)開始， 制備的主要程序相似。 生物制品的分包裝 ? 分裝 ?分裝前，檢定合格，標簽完整，明確。 ?載名名稱、批號、亞批號、有效