生物免疫分析技術(shù)ppt課件-wenkub
2023-05-27 12:35:39 本頁面
【正文】 抗體抗原特異的免疫反應(yīng)，還具有酶促反應(yīng)，顯示出生物放大作用，但不同的酶選用不同的底物 ，將得到不同的顏色反應(yīng)。 ? 顏色反應(yīng)的深淺與相應(yīng)的抗體或抗原量成正比，因此可借助于顏色反應(yīng)的深淺來定量抗體或抗原。 ? 酶聯(lián)免疫吸附法： 根據(jù)可溶性抗原或抗體與不溶性固相載體結(jié)合后，還保留其免疫活性，結(jié)合了作為標(biāo)記的酶催化作用。它具有免疫熒光試驗(yàn)和放射免疫試驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)，并克服上述兩種方法的缺點(diǎn)。例如現(xiàn)在人們所關(guān)注的食品安全性問題中一些物質(zhì)的檢測：殺蟲劑、藥物殘留物、激素、生長素、微生物毒素、真菌毒素或腸毒素、天然毒素，以及一些添加劑。 ? 免疫分析法具備有效的靈敏度、特異性、快速和低成本的優(yōu)點(diǎn)；可對大量的樣品進(jìn)行常規(guī)分析；能夠用于樣品的定性篩選，也能夠?qū)悠愤M(jìn)行定量測定以確定樣品中待測組分的含量。 ? 酶標(biāo)記試劑制備容易、穩(wěn)定、有效期長，免疫酶技術(shù)的敏感性接近放射免疫試驗(yàn)，可直接肉眼觀察也可借助簡單的儀器作定量測定，所得結(jié)果比較客觀。 ELISA的基本原理和方法 ELISA的種類和變化 ELISA的特點(diǎn) ELISA的應(yīng)用實(shí)例 ELISA 基本原理 它采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測物與酶連接，然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)，用于定量測定。 ? 這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡觀察，也可以用分光光度計(jì)（酶標(biāo)儀）加以測定。 酶 底 物 顯色反應(yīng) 測定波長 辣根過氧化物酶 鄰苯二胺 四甲替聯(lián)苯胺 氨基水楊酸 鄰聯(lián)苯甲胺 2,2‘連胺基 2(3乙基 并噻唑啉磺酸 6)銨鹽 橘紅色 黃色 棕色 蘭色 藍(lán)綠色 492 460 449 425 642 堿性磷酸酯酶 4硝基酚磷酸鹽 (PNP) 萘酚 ASMx磷酸鹽 +重氮鹽 黃色 紅色 400 500 葡萄糖氧化酶 ABTS+HRP+葡萄糖 葡萄糖 +甲硫酚嗪 +噻唑蘭 黃色 深藍(lán)色 405 420 β Ｄ 半乳糖苷酶 甲基
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