【正文】 ⑤厭氧培養(yǎng)基：如庖肉培養(yǎng)基。四、常用的培養(yǎng)基按其用途可分為：①基礎(chǔ)培養(yǎng)基：如肉湯培養(yǎng)液。大腸桿菌發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣；一般腸道致病菌不發(fā)酵乳糖；② VP 試驗(yàn)；③甲基紅試驗(yàn)；④枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)。菌體可變形、腫脹，甚至自溶。此期細(xì)菌的形態(tài)、大小、染色性、生物活性等性狀典型，對抗生素最敏感，常用此期細(xì)菌來研究其各種性狀。少數(shù)致病菌如腦膜炎球菌、淋球菌等初次分離培養(yǎng)時需提供5%～10%的CO2 。第二章 細(xì)菌的增殖與代謝(細(xì)菌的生理)復(fù)習(xí)要點(diǎn)：掌握細(xì)菌的生長繁殖和新陳代謝的基本規(guī)律了解細(xì)菌的理化性質(zhì)，人工培養(yǎng)方法及其實(shí)際應(yīng)用。(2) 結(jié)果： 革蘭陽性菌呈紫色， 革蘭陰性菌呈紅色。(5)對作用于細(xì)胞壁的抗生素產(chǎn)生耐藥性，而對作用于核酸或蛋白質(zhì)合成的抗生素仍敏感。(1)形態(tài)和著色性改變：由于細(xì)菌L型失去細(xì)胞壁，使菌體呈大小不等的圓形、卵圓形、膨大的桿狀和棒狀等多形性；原為G＋菌變?yōu)镚－菌。細(xì)菌芽胞對外界抵抗力大大增強(qiáng)，如炭疽桿菌芽胞污染草原，可維持20～30年的傳染性。雄性菌通過粘附接合無性菌毛的雌性(F一)菌，將遺傳物質(zhì)由F+菌傳遞給F－菌。(3) 菌毛：許多G－菌及個別G+菌，在其菌體表面長出細(xì)而短，多且直的蛋白質(zhì)絲狀體。莢膜具有抗吞噬作用，粘附作用，是構(gòu)成細(xì)菌毒力的因素之一；有抗溶菌酶、抗補(bǔ)體、抗干燥及補(bǔ)充營養(yǎng)作用；莢膜具有抗原性，可用以鑒別細(xì)菌和進(jìn)行細(xì)菌分型。(3) 胞質(zhì)顆粒：為細(xì)胞質(zhì)內(nèi)貯藏的營養(yǎng)物質(zhì)，如多糖、脂類、多磷酸鹽等場所。細(xì)胞質(zhì)是細(xì)菌細(xì)胞膜所包裹的半固體溶膠狀物質(zhì)，其化學(xué)成分為水、蛋白質(zhì)、核酸、脂類、少量糖和無機(jī)鹽等。(4) 核質(zhì)由雙股DNA鏈高度盤繞形成，是細(xì)菌生命活動所必需的遺傳物質(zhì)。G－菌細(xì)胞壁由內(nèi)向外依次為粘肽、脂蛋白、外膜、脂多糖等多種成分組成。(4)形成中介體(mesosome)，多見于G+菌，由細(xì)胞膜內(nèi)陷、卷曲構(gòu)成囊狀結(jié)構(gòu)，故增加了細(xì)胞膜面積，類似于真核細(xì)胞線粒體的作用。真核細(xì)胞膜尚有膽固醇，而原核細(xì)胞膜除某些支原體外，均不含膽固醇。(2) 細(xì)胞壁上遍布微孔，可允許水及直徑小于1nm的物質(zhì)自由通過，與細(xì)胞膜共同參與菌細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)的交換。四、問答題1．(1)肽聚糖又稱粘肽，為細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分，是原核生物細(xì)胞的特有成分，由三部分組成：①聚糖骨架由N乙酰葡萄糖胺和N乙酰胞壁酸交替排列，藉β1，4糖苷鍵連接組成；②四肽側(cè)鏈連接于聚糖骨架上的N乙酰胞壁酸分子上；③四肽側(cè)鏈之間由肽鏈(如五肽交聯(lián)橋)或肽鍵交連構(gòu)成交聯(lián)橋；由此構(gòu)成完整的肽聚糖分子結(jié)構(gòu)。為中空管道，較普通菌毛略粗，每個細(xì)菌可有1～4條，性菌毛未端有一球狀突起，可用于粘附不帶性菌毛的雌性細(xì)菌。凡未被95%乙醇脫色，菌體著紫色者，稱G＋菌，否則，被染成紅色者，為G一菌。15．細(xì)菌L型：有些細(xì)菌在某些體內(nèi)外環(huán)境及抗生素等作用下，可部分或全部失去細(xì)胞壁，此現(xiàn)象首先由Lister研究所發(fā)現(xiàn)，故稱細(xì)菌 L 型。12．鞭毛：為有些細(xì)菌(稱為鞭毛菌)包括所有弧菌和螺菌、占半數(shù)桿菌和極少數(shù)球菌，由細(xì)胞膜長出菌體外細(xì)長的蛋白質(zhì)絲狀體。它可使細(xì)菌獲得某些特定性狀，如耐藥性、毒力等。7．核蛋白體(核糖體)：為游離于細(xì)胞質(zhì)中，直徑15～20nm的顆粒，其成分占70%為RNA，30%為蛋白質(zhì)。4．磷壁酸：為大多數(shù)革蘭陽性菌細(xì)胞壁的特有成分，約占細(xì)胞壁干重之20%～40%，分為兩種，即壁磷壁酸和膜(脂)磷壁酸。其特點(diǎn)為結(jié)構(gòu)簡單，無典型細(xì)胞核，只有原始的核質(zhì)，無核膜及核仁。7．請簡明解說細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)及其主要功能。3．試比較 G＋菌與 G－菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的特征。19. 鞭毛是細(xì)菌的 ，霍亂弧菌的鞭毛還與 有關(guān)。15. 細(xì)菌莢膜最重要的功能為，此外還有 、 等作用。11．細(xì)菌的結(jié)構(gòu)中與革蘭染色性和致病性有關(guān)的是 。7. G+ 細(xì)菌細(xì)胞壁的主要結(jié)構(gòu)肽聚糖，是由 ， 和五肽交聯(lián)橋3部分組成。3. 螺形菌的菌體彎曲呈螺旋狀，致病性螺形菌主要包括 ，螺菌，彎曲菌和四種。芽胞在適宜的條件下可發(fā)芽形成一個新的菌體(繁殖體)。芽胞為細(xì)菌的休眠狀態(tài)。有鞭毛的細(xì)菌又分為單毛菌、雙毛菌、叢毛菌和周毛菌。二、細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)1. 莢膜是某些細(xì)菌分泌到細(xì)胞壁外面的一層粘液性物質(zhì)。3. 細(xì)胞質(zhì)為原生質(zhì)，為無色透明膠狀物，其內(nèi)含質(zhì)粒、核糖體及胞漿顆粒等有形成分。(3)G＋菌與G－菌的粘肽組成和區(qū)別：G＋菌的粘肽由聚糖骨架、四肽側(cè)鏈和五肽交聯(lián)橋三部分交織成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。特點(diǎn)是粘肽含量高、層數(shù)多、質(zhì)地致密，具有高機(jī)械強(qiáng)度的三維空間結(jié)構(gòu)。了解細(xì)菌的大小、其他結(jié)構(gòu)和功能。醫(yī)學(xué)微生物學(xué)是偏重于形態(tài)學(xué)和實(shí)驗(yàn)操作技能的課程，重點(diǎn)要求掌握基礎(chǔ)理論、基本知識和基本技能。國內(nèi)免疫學(xué)科最早于1986年獨(dú)立。(2) 病原微生物的致病機(jī)理研究不斷深入， 尤其在遺傳變異及細(xì)菌的內(nèi)、外毒素等研究方面，有較大進(jìn)展。⑵實(shí)驗(yàn)微生物學(xué)時期 ①微生物發(fā)現(xiàn)：荷蘭人虎克、法國科學(xué)家巴斯德、英國外科醫(yī)生李斯特德國學(xué)者郭霍等為微生物的發(fā)現(xiàn)及微生物學(xué)學(xué)科的確立做出了巨大貢獻(xiàn)；②免疫學(xué)的興起；③化學(xué)療劑和抗生素的發(fā)明：如1929年Fleming發(fā)現(xiàn)青霉素。*4. 菌株：從不同來源或從不同時間或地區(qū)所分離的同一菌種的細(xì)菌。*3．請概述近二十年來醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的主要進(jìn)展。6．細(xì)菌的分型除了噬菌體型外，還有 和 。2．醫(yī)學(xué)微生物學(xué)包括醫(yī)學(xué)細(xì)菌學(xué) 、 和 。3．原核細(xì)胞型微生物包括細(xì)菌、支原體、立克次體、衣原體、 和 ，共六類微生物物。7．病毒必須寄生于 、 內(nèi)，僅有 RNA 或 DNA 和蛋白質(zhì)的衣殼， 屬于微生物。4．如何學(xué)好醫(yī)學(xué)微生物學(xué)？ 答案一、單項(xiàng)選擇題1．E 2. B 3. C 4. E 5. 二、多項(xiàng)選擇題1．A，B 2. E 3. A，D 4. A，C三、填空題1．真核細(xì)胞型，原核細(xì)胞型，非細(xì)胞型2．醫(yī)學(xué)真菌學(xué)，醫(yī)學(xué)病毒學(xué)3．螺旋體，放線菌4．病毒，亞病毒 5．?dāng)M病毒，阮毒體或朊粒6．血清型， 基因型7．活細(xì)胞，非細(xì)胞型四、名詞解釋1. 微生物：存在于自然界形體微小，數(shù)量繁多，肉眼看不見，必須籍助于光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍甚至上萬倍，才能觀察到的一群微小低等生物體。*5．郭霍法則：郭霍根據(jù)對炭疽芽胞桿菌的研究，提出了著名的郭霍法則。⑶現(xiàn)代微生物學(xué)時期 近三十年來，隨著化學(xué)、物理學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)和分子生物學(xué)等學(xué)科的進(jìn)展，電子顯微鏡技術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng)、組織化學(xué)、標(biāo)記技術(shù)、核酸雜交、色譜技術(shù)和電子計(jì)算機(jī)等新技術(shù)的建立和改進(jìn)，微生物學(xué)得到極為迅速的發(fā)展。(3) 檢測方法的改進(jìn)和創(chuàng)新 ： ①細(xì)菌檢驗(yàn)的微量化、自動化和診斷試劑系列化； ②血清學(xué)檢驗(yàn)方法IF、RIA及EIA的建立； ③核酸雜交技術(shù)及 PCR 方法的應(yīng)用。4. 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)是基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的主干學(xué)科之一，它與生物化學(xué)及分子生物學(xué)、免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)及臨床、預(yù)防專業(yè)課程的關(guān)系十分密切，也是醫(yī)藥衛(wèi)生后續(xù)各種專業(yè)課程的重要橋梁課程，尤其是制定感染性疾病的防治策略和措施的理論基礎(chǔ)。為了提高科學(xué)思維和動手操作能力，應(yīng)重視實(shí)驗(yàn)課的學(xué)習(xí)，它與理論課的學(xué)習(xí)起到相輔相成的作用，注意理論聯(lián)系實(shí)際。一、細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)所有細(xì)菌都具有的基本結(jié)構(gòu)由外向內(nèi)分別是細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)。磷壁酸有膜與壁磷壁酸兩種，是G＋菌細(xì)胞壁內(nèi)特有的成分，膜磷璧酸與細(xì)菌粘附宿主細(xì)胞有關(guān)。溶菌酶能水解聚糖骨架中的糖苷鍵，青霉素、頭孢菌素可抑制五肽橋與四肽側(cè)鏈的連接。質(zhì)粒為雙股環(huán)狀DNA，是染色體以外的遺傳物質(zhì)，并非細(xì)菌生命活動必需；它具有自我復(fù)制、傳給子代、自行丟失、從一個細(xì)菌轉(zhuǎn)移至另一個細(xì)菌等特點(diǎn)。它具有抗吞噬、抗溶菌酶、抗補(bǔ)體、粘附等作用，是細(xì)菌毒力因素之一。3. 菌毛是某些細(xì)菌表面比鞭毛細(xì)、短而直的蛋白絲狀物。它的結(jié)構(gòu)復(fù)雜，對熱、干燥、化學(xué)消毒劑和輻射等都有很強(qiáng)的抵抗力。三、革蘭染色的實(shí)際意義經(jīng)革蘭染色可將細(xì)菌分為G＋菌與G－菌，有助于鑒定細(xì)菌，指導(dǎo)臨床選擇藥物，有助于研究和了解細(xì)菌的致病性等。4. 細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)依次是 ， ， 細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)(擬核)。8. G細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)是由和2部分構(gòu)成。12．細(xì)菌的遺傳物質(zhì)有和 。16．細(xì)菌莢膜具有 ，可用于細(xì)菌分型。20．是G＋菌細(xì)胞壁的主要成分， 凡能破壞其結(jié)構(gòu)或抑制其合成的物質(zhì)都有殺菌和抑菌作用，如 或 。4．請描述細(xì)菌的細(xì)胞膜構(gòu)造及其主要功能。8．請描述細(xì)菌 L 型的形成、生物學(xué)性狀及其致病性。除核蛋白體外，無其他細(xì)胞器。5．脂多糖：革蘭陰性菌細(xì)胞壁外膜伸出的特殊結(jié)構(gòu)，即細(xì)菌內(nèi)毒素。每個細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可有數(shù)萬個核蛋白體，它是蛋白質(zhì)合成的場所。10．異染顆粒：見于自喉棒狀桿菌、鼠疫桿菌和結(jié)核分枝桿菌等，在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)呈顆粒狀，主要成分為RNA及嗜堿性的多偏磷酸鹽，因美蘭染色時不同于菌體著色，呈紫色而得名。根據(jù)其位置和數(shù)目，將鞭毛菌分為單毛菌、雙毛菌、叢毛菌和周毛菌。在適宜條件下， 多數(shù)細(xì)菌 L 型可回復(fù)成原細(xì)菌型。17．中介體：中介體是細(xì)菌細(xì)胞膜內(nèi)陷、折疊、卷曲形成的囊狀結(jié)構(gòu)，多見于革蘭陽性細(xì)菌。通過接合傳遞遺傳物質(zhì)，使受體菌獲得某些相應(yīng)性狀。⑵凡能破壞其分子結(jié)構(gòu)或抑制其合成的藥物，均具有殺菌或抑菌作用。(3) 其組成成分構(gòu)成細(xì)胞的主要抗原決定簇，決定細(xì)菌的抗原性。細(xì)胞膜的功能：(1)物質(zhì)的吸納與排泄，選擇性攝取營養(yǎng)而排泄代謝產(chǎn)物。5．細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)：細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)是指所有細(xì)菌都具有的結(jié)構(gòu)，由外向內(nèi)分別是細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)。(2) 細(xì)胞膜具有物質(zhì)交換、生物合成、呼吸、形成中介體等作用。細(xì)菌僅有核質(zhì)，無核膜和核仁，不存在核的形態(tài)，故稱核質(zhì)。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有多種酶類，通過多種胞質(zhì)內(nèi)顆粒，起到生物合成，代謝及傳遞某些生物學(xué)性狀的作用。另外，白喉棒狀桿菌、鼠疫桿菌、結(jié)核分枝桿菌等胞質(zhì)內(nèi)含有RNA和多偏磷酸鹽構(gòu)成的異染顆粒，可用作細(xì)菌的鑒別。(2) 鞭毛：某些細(xì)菌(稱為鞭毛菌)包括所有的弧菌和螺菌、占半數(shù)的桿菌及極少數(shù)球菌，由細(xì)胞膜長出菌體外細(xì)長的蛋白質(zhì)絲狀體，根據(jù)其鞭毛位置和數(shù)目，分為單毛菌、雙毛菌、叢毛菌和周毛菌。菌毛分為普通菌毛與性菌毛兩種。(4) 芽胞：為某些細(xì)菌包括需氧芽胞桿菌屬和厭氧芽胞桿菌屬細(xì)菌在不良環(huán)境下的休眠體。當(dāng)條件適宜時，芽胞通過發(fā)芽方式轉(zhuǎn)化為細(xì)菌繁殖體。(2)細(xì)菌L型需在高滲透壓環(huán)境下才能培養(yǎng)，且增殖緩慢，在固體培養(yǎng)基上生長呈特有的油煎蛋樣菌落。細(xì)菌L型的致病性較原菌減弱，但由于失去細(xì)胞壁而對某些抗生素耐藥及由于抗原性減弱而易逃避宿主的免疫攻擊，因此，易于長期存留于體內(nèi)，而在條件適宜時又回復(fù)成原菌株。 (3) 意義： 經(jīng)革蘭染色可將細(xì)菌分為 G＋菌和 G－菌， 有助于鑒定細(xì)菌， 用來指導(dǎo)臨床選擇藥物，有助于研究和了解細(xì)菌的致病性等。一、細(xì)菌生長繁殖的條件1. 充足的營養(yǎng)物質(zhì)： 包括水、碳源、氮源、無機(jī)鹽類、生長因子等。二、細(xì)菌繁殖的方式與速度1. 細(xì)菌繁殖方式為二分裂，在條件滿足時，一般細(xì)菌繁殖一代用時20～30min，但結(jié)核桿菌繁殖一代用時18～20h。(3) 穩(wěn)定期：此期營養(yǎng)消耗，毒性產(chǎn)物積聚，pH下降導(dǎo)致細(xì)菌繁殖數(shù)與死亡數(shù)接近。三、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物及其意義1. 分解代謝產(chǎn)物及其意義：細(xì)菌因其具備的酶不完全相同，故在分解過程中的產(chǎn)物隨菌種不同而有差異。(2) 蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)物檢測：①吲哚（靛青質(zhì)）試驗(yàn)；②硫化氫試驗(yàn)；③尿素分解試驗(yàn)等。②增菌培養(yǎng)基：如血瓊脂平板。細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象也有三種：1. 均勻混濁：多數(shù)細(xì)菌呈混濁生長。2．細(xì)菌生長繁殖所需要的營養(yǎng)物質(zhì)除水以外還有 、 、 和 。6．細(xì)菌生長繁殖的三大要素是 、 和 。10．由細(xì)菌合成具有致病效應(yīng)的胞外酶有 、 等。14．大腸埃希菌產(chǎn)生的細(xì)菌素稱 ，其編碼基因位于上 。18．半固體培養(yǎng)基多用于 檢測細(xì)菌，液體培養(yǎng)基多用于 細(xì)菌。**22. 在 10～20℃最適生長，嗜溫菌 在20～40℃生長最佳，而 在56～60℃生長最好。4．細(xì)菌的酶在新陳代謝過程中有何作用?5．簡述細(xì)菌的合成代謝產(chǎn)物及其臨床意義。注入人體或動物體內(nèi)可引起發(fā)熱反應(yīng)， 故名熱原質(zhì)。細(xì)菌素的作用范圍狹窄。6．專性厭氧菌：專性厭氧菌由于缺乏呼吸晦系統(tǒng)，在有氧環(huán)境中不能生存，因此只能在無氧環(huán)境下生長。8．純培養(yǎng)：多用于菌種傳代和細(xì)菌的擴(kuò)增。10．型：同一菌種的各個細(xì)菌，雖性狀基本相同，但在某些方面仍有一定差異，差異小的稱為型。因細(xì)菌繁殖極少，故生長曲線平緩穩(wěn)定，一般為1～4h。此期細(xì)菌形態(tài)、染色和生物活性都很典型，對外界環(huán)境因素的作用十分敏感，因此，研究細(xì)菌的生物學(xué)性狀以此期細(xì)菌最好。細(xì)菌芽胞一般在該期形成。(2) 碳源：各種無機(jī)或有機(jī)的含碳化合物都能被細(xì)菌吸收利用，作為合成菌體所必需的原料及細(xì)菌代謝能量的主要來源。包括維生素、某些氨基酸、脂類、嘌呤、嘧啶等。(4) 必要的氣體環(huán)境：所需的主要?dú)怏w為O2和CO2，根據(jù)細(xì)菌對O2的需要情況將其分為：①專性需氧菌，在有氧條件下才能生長繁殖；②專性厭氧菌，在無氧條件下才能生長繁殖；③兼性厭氧菌，有氧無氧均能生長繁殖；④微需氧菌，在低氧壓的條件下才能生長繁殖。根據(jù)酶發(fā)揮作用的部位，細(xì)菌的酶可分為胞外酶及胞內(nèi)酶。(2) 胞內(nèi)酶：是存在于細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用的酶，包括一系列呼吸酶以及與蛋白質(zhì)、多糖等代謝有關(guān)的酶。此外，細(xì)菌還能合成很多在醫(yī)學(xué)上具有重要意義的代謝產(chǎn)物。(2) 內(nèi)毒素與酶：細(xì)菌可產(chǎn)生內(nèi)、外毒素及侵襲性酶，與細(xì)菌的致病性密切相關(guān)。(3) 色素：有些細(xì)菌能產(chǎn)生色素，對細(xì)菌的鑒別有一定意義。(5) 細(xì)菌素：某些細(xì)菌能產(chǎn)生一種僅作用于有