【正文】 答 案一、 單項(xiàng)選擇題 二、 多項(xiàng)選擇題 三、 填空題1. 高壓蒸氣滅菌法， 。四、名詞解釋1．消毒（disinfection）2．滅菌 (sterilization) 3．抑菌 (bacteriostasis) 4．防腐 (antisepsis) 5．無(wú)菌 (asepsis) 五、問(wèn)答題1．在溫度和時(shí)間相同的情況下，為什么濕熱滅菌法的效果比干熱法好？2．簡(jiǎn)述紫外線殺菌的作用機(jī)制和注意事項(xiàng)。10．消毒劑中的 類(lèi)，可與細(xì)菌酶蛋白的SH基結(jié)合，發(fā)揮殺菌作用。8．預(yù)防新生兒淋球菌感染常用的滴眼劑是 。6．干熱滅菌法主要有 、 和 。4．濕熱滅菌法的蒸氣壓力為 ，溫度達(dá) ，維持時(shí)間是 。2．常用的濕熱消毒滅菌法有 、 、 、 和 。消毒劑的殺菌機(jī)制主要有：①使菌體蛋白變性或凝固，如酚類(lèi)(高濃度)、醇類(lèi)、重金屬鹽類(lèi)(高濃度)、酸堿類(lèi)、醛類(lèi)；②干擾細(xì)菌酶系統(tǒng)和代謝，如某些氧化劑、重金屬鹽類(lèi)(低濃度)；③損傷細(xì)菌的細(xì)胞膜，如酚類(lèi)(低濃度)、表面活性劑、脂溶劑等。但病毒、支原體、細(xì)菌L型等微生物仍可通過(guò)濾菌器?！?、玻璃、纖維素膜等過(guò)濾生物溶液，以除菌又不破壞溶液中蛋白質(zhì)的生物活性。照射時(shí)，人員應(yīng)離開(kāi)現(xiàn)場(chǎng)。如手術(shù)室、傳染病房、實(shí)驗(yàn)室等的消毒。紫外線對(duì)生物細(xì)胞的DNA具有直接破壞作用，可使DNA斷裂或胸腺嘧啶聚合為雙聚體而干擾DNA的生物合成， 導(dǎo)致細(xì)菌死亡或變異。適用于耐高溫又不怕潮濕物品的滅菌，如注射液制劑、手術(shù)物品等。(2) 濕熱滅菌法包括：①巴氏消毒法，加熱溫度為62℃30min，72℃30s，常用于酒類(lèi)、牛奶的消毒；②煮沸法，100℃5min可殺死細(xì)菌繁殖體，殺死芽胞需煮沸1～2h，常用于消毒食具、刀剪等；③流動(dòng)蒸氣滅菌法(常壓蒸氣消毒法)，100℃15～30min可殺死細(xì)菌繁殖體；④間歇蒸氣滅菌法，可用于不耐熱培養(yǎng)基的滅菌。 (1) 干熱滅菌法有：①焚燒法，常用于醫(yī)院丟棄的廢物或尸體的焚燒；②燒灼法是直接用火焰燒灼，常用于接種環(huán)、試管口等的滅菌；③干烤法，是使用電烤箱滅菌，160℃經(jīng)2h。二、物理滅菌法 物理滅菌法的種類(lèi)包括熱力滅菌法、紫外線殺菌法、濾過(guò)除菌法、超聲殺菌法等多種。 無(wú)菌：指無(wú)活菌的狀態(tài)。 防腐：防止或抑制微生物生長(zhǎng)的方法。一般不能全部殺死非病原菌和芽胞。 了解消毒和滅菌的機(jī)制。第三章消毒滅菌復(fù)習(xí)要點(diǎn)：掌握消毒、滅菌、無(wú)菌和防腐的概念。(2) 蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)物檢測(cè)：①吲哚（靛青質(zhì)）試驗(yàn)；②硫化氫試驗(yàn)；③尿素分解試驗(yàn)等。通過(guò)生化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)菌的分解代謝產(chǎn)物可對(duì)細(xì)菌進(jìn)行鑒定和分類(lèi)。如霍亂弧菌。如鏈球菌。①混濁生長(zhǎng)，菌液呈均勻混濁狀態(tài)，見(jiàn)于大多數(shù)細(xì)菌。有鞭毛的細(xì)菌可由穿刺線向四周運(yùn)動(dòng)播散，培養(yǎng)后穿刺線模糊不清，呈羽毛狀或云霧狀混濁生長(zhǎng)；無(wú)鞭毛的細(xì)菌，不能運(yùn)動(dòng)，僅沿穿刺線生長(zhǎng)，穿刺線清晰，穿刺線以外的培養(yǎng)基仍透明澄清。③粘液型菌落(M型菌落)多見(jiàn)于有肥厚莢膜或粘液層的細(xì)菌，菌落表現(xiàn)粘稠、有光澤、似水珠祥。8．細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象有：(1) 固體培養(yǎng)基：細(xì)菌經(jīng)分離培養(yǎng)生成菌落，根據(jù)菌落特點(diǎn)，可分為三型：①光滑型菌落(S型菌落)，新分離的細(xì)菌大多為光滑型菌落，表面光滑、濕潤(rùn)、邊緣整齊。(5) 厭氧培養(yǎng)基：厭氧菌的培養(yǎng)需在培養(yǎng)基中加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢(shì)，并以石蠟或凡士林封口，隔絕空氣，這種無(wú)氧環(huán)境的培養(yǎng)基為厭氧培養(yǎng)基，如庖肉培養(yǎng)基。(4) 選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，能抑制某類(lèi)細(xì)菌生長(zhǎng)，促使另一類(lèi)細(xì)菌生長(zhǎng)，從而將后者選擇出來(lái)，這種培養(yǎng)基稱(chēng)為選擇培養(yǎng)基。利用不同細(xì)菌對(duì)糖、蛋白質(zhì)的分解能力及代謝產(chǎn)物的差別，在培養(yǎng)基中加入特定的底物成分和指示劑，觀察細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)分解底物的情況，從而鑒別細(xì)菌。(2) 增菌培養(yǎng)基：若了解某種細(xì)菌的特殊營(yíng)養(yǎng)要求，可配制出適合這種細(xì)菌而不適合其他細(xì)菌生長(zhǎng)的增菌培養(yǎng)基。*7. 用于培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基，按其用途和營(yíng)養(yǎng)組成可以分為：首先根據(jù)培養(yǎng)基的性質(zhì)及用途可分為以下幾類(lèi)：(1) 基礎(chǔ)培養(yǎng)基：含有大多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)所需要的基本營(yíng)養(yǎng)成分。⑤為獲取大量細(xì)菌或其代謝產(chǎn)物，可采用連續(xù)培養(yǎng)法。專(zhuān)性厭氧菌則必須在嚴(yán)格元氧條件中培養(yǎng)。取一個(gè)菌落接種于適當(dāng)?shù)囊后w培養(yǎng)基或固體斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)后可獲得大量純種細(xì)菌。一般利用固體培養(yǎng)基(如選擇培養(yǎng)基)通過(guò)劃線方法接種，使標(biāo)本中的細(xì)菌分散為單個(gè)生長(zhǎng)的菌落而獲得純種細(xì)菌。*6. 細(xì)菌的培養(yǎng)方法及其條件： (1) 細(xì)菌培養(yǎng)可分為分離培養(yǎng)及純培養(yǎng)兩種方法。(5) 細(xì)菌素：某些細(xì)菌能產(chǎn)生一種僅作用于有近緣關(guān)系的細(xì)菌的具有抗菌作用的蛋白質(zhì)，稱(chēng)細(xì)菌素。(4) 抗生素：有些微生物代謝過(guò)程中可產(chǎn)生一些能抑制或殺死某些其他微生物或癌細(xì)胞的物質(zhì)，稱(chēng)抗生素。(3) 色素：有些細(xì)菌能產(chǎn)生色素，對(duì)細(xì)菌的鑒別有一定意義。外毒素是由革蘭陽(yáng)性菌及少數(shù)革蘭陰性菌在生長(zhǎng)代謝過(guò)程中釋放到菌體外的蛋白質(zhì)，具有抗原性強(qiáng)、毒性強(qiáng)、作用特異性強(qiáng)的突出特點(diǎn)。(2) 內(nèi)毒素與酶：細(xì)菌可產(chǎn)生內(nèi)、外毒素及侵襲性酶，與細(xì)菌的致病性密切相關(guān)。熱原質(zhì)耐高熱，高壓蒸氣滅菌亦不能破壞，除去熱原質(zhì)最好的方法是蒸餾。此外，細(xì)菌還能合成很多在醫(yī)學(xué)上具有重要意義的代謝產(chǎn)物。如金黃色葡萄球菌在青霉素存在時(shí)可誘導(dǎo)產(chǎn)生青霉素酶，可以導(dǎo)致對(duì)青霉素的耐藥性。(2) 胞內(nèi)酶：是存在于細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用的酶，包括一系列呼吸酶以及與蛋白質(zhì)、多糖等代謝有關(guān)的酶。環(huán)境中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)分子較大，必須由胞外酶水解為小分子物質(zhì)后才能被細(xì)菌吸收。根據(jù)酶發(fā)揮作用的部位，細(xì)菌的酶可分為胞外酶及胞內(nèi)酶。*4. 細(xì)菌的酶在新陳代謝過(guò)程中的作用：細(xì)菌的新陳代謝是在酶的催化下進(jìn)行的。(4) 必要的氣體環(huán)境：所需的主要?dú)怏w為O2和CO2，根據(jù)細(xì)菌對(duì)O2的需要情況將其分為：①專(zhuān)性需氧菌，在有氧條件下才能生長(zhǎng)繁殖；②專(zhuān)性厭氧菌，在無(wú)氧條件下才能生長(zhǎng)繁殖；③兼性厭氧菌，有氧無(wú)氧均能生長(zhǎng)繁殖；④微需氧菌，在低氧壓的條件下才能生長(zhǎng)繁殖。(2) 適宜的酸堿度：～。包括維生素、某些氨基酸、脂類(lèi)、嘌呤、嘧啶等。(4) 無(wú)機(jī)鹽：①構(gòu)成菌體成分；②調(diào)節(jié)菌體內(nèi)外滲透壓；③促進(jìn)酶的活性；④某些元素與細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖及致病作用密切相關(guān)。(2) 碳源：各種無(wú)機(jī)或有機(jī)的含碳化合物都能被細(xì)菌吸收利用，作為合成菌體所必需的原料及細(xì)菌代謝能量的主要來(lái)源。此期細(xì)菌生理代謝活動(dòng)趨于停滯，細(xì)菌形態(tài)呈現(xiàn)腫脹或畸形衰變，甚至自溶。細(xì)菌芽胞一般在該期形成。此期細(xì)菌死亡數(shù)與增殖數(shù)漸趨平衡。此期細(xì)菌形態(tài)、染色和生物活性都很典型，對(duì)外界環(huán)境因素的作用十分敏感，因此，研究細(xì)菌的生物學(xué)性狀以此期細(xì)菌最好。(2). 對(duì)數(shù)期：又稱(chēng)指數(shù)期。因細(xì)菌繁殖極少，故生長(zhǎng)曲線平緩穩(wěn)定，一般為1～4h。12．專(zhuān)性需氧菌：該類(lèi)細(xì)菌只能在有氧條件下生長(zhǎng).13．兼性厭氧菌：在有氧及無(wú)氧條件下均能生長(zhǎng)的細(xì)菌，占細(xì)菌的大多數(shù)。10．型：同一菌種的各個(gè)細(xì)菌，雖性狀基本相同，但在某些方面仍有一定差異，差異小的稱(chēng)為型。9．種：細(xì)菌分類(lèi)的基本單位。8．純培養(yǎng)：多用于菌種傳代和細(xì)菌的擴(kuò)增。7．抗生素：有些微生物代謝過(guò)程中可產(chǎn)生一些能抑制或殺死某些其他微生物或腫瘤細(xì)胞的物質(zhì)，稱(chēng)抗生素。6．專(zhuān)性厭氧菌：專(zhuān)性厭氧菌由于缺乏呼吸晦系統(tǒng)，在有氧環(huán)境中不能生存，因此只能在無(wú)氧環(huán)境下生長(zhǎng)。5．培養(yǎng)基：是人工配制的供細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖使用的混合營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)制品。細(xì)菌素的作用范圍狹窄。除去熱原質(zhì)的最好辦法是蒸餾。注入人體或動(dòng)物體內(nèi)可引起發(fā)熱反應(yīng)， 故名熱原質(zhì)。7．用于培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基，按其用途和物理性狀可分為哪些種類(lèi)?8．細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象有哪些? 9．進(jìn)行細(xì)菌分類(lèi)和鑒別的生化檢測(cè)有哪些?答 案一、 單項(xiàng)選擇題 二、多項(xiàng)選擇題 二、 填空題1．%～% 瓊脂粉， %～% 瓊脂2. 碳源， 氮源， 無(wú)機(jī)鹽， 生長(zhǎng)因子3. 組成細(xì)菌的各種成分， 供給細(xì)菌能量 4. 自養(yǎng)型， 異養(yǎng)型， 異養(yǎng)型5. 被動(dòng)擴(kuò)散， 主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)6. 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)， 能量， 適宜的環(huán)境7. O2， CO28. 二分裂， 繁殖速度極快9. 遲緩期， 對(duì)數(shù)期， 穩(wěn)定期， 衰亡期10．血漿凝固酶， 透明質(zhì)酸酶11. 水溶性色素， 脂溶性色素 12．水溶， 脂溶13. 熱原質(zhì)， 毒素， 侵襲性酶 14. 大腸菌素， Col質(zhì)粒15. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基， 增菌培養(yǎng)基， 選擇培養(yǎng)基， 鑒別培養(yǎng)基， 厭氧培養(yǎng)基， 基礎(chǔ)培養(yǎng)基， 鑒別培養(yǎng)基，增菌培養(yǎng)基， 選擇培養(yǎng)基， 厭氧培養(yǎng)基 16. 混濁生長(zhǎng)， 沉淀生長(zhǎng)， 菌膜生長(zhǎng)17．＋， －， 〇18．動(dòng)力， 增菌(純培養(yǎng))19. 粗糙型菌落， 粘液型菌落20. 革蘭陽(yáng)性菌， 大腸埃希菌， 腸道致病菌21. 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)， 溫度22. 嗜冷菌， 嗜熱菌三、 名詞解釋1．生長(zhǎng)因子： 某些細(xì)菌在其生長(zhǎng)過(guò)程中需要的一些自身不能合成的物質(zhì)，通常為有機(jī)物，包括維生素、某些氨基酸、脂類(lèi)、嘌呤、嘧啶等。4．細(xì)菌的酶在新陳代謝過(guò)程中有何作用?5．簡(jiǎn)述細(xì)菌的合成代謝產(chǎn)物及其臨床意義。2．簡(jiǎn)述細(xì)菌生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及其主要作用。**22. 在 10～20℃最適生長(zhǎng)，嗜溫菌 在20～40℃生長(zhǎng)最佳，而 在56～60℃生長(zhǎng)最好。*20. SS 瓊脂培養(yǎng)基含有膽鹽可抑制，枸櫞酸鈉、煌綠可抑制 ，常用于 的分離和培養(yǎng)。18．半固體培養(yǎng)基多用于 檢測(cè)細(xì)菌，液體培養(yǎng)基多用于 細(xì)菌。16．細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)可出現(xiàn) 、 和 三種狀態(tài)。14．大腸埃希菌產(chǎn)生的細(xì)菌素稱(chēng) ，其編碼基因位于上 。12．銅綠假單胞菌產(chǎn)生的色素是 性色素，金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的是 性色素。10．由細(xì)菌合成具有致病效應(yīng)的胞外酶有 、 等。8．細(xì)菌繁殖方式為 ，其特點(diǎn)是 。6．細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的三大要素是 、 和 。*4. 根據(jù)細(xì)菌在代謝過(guò)程中對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需要，可將細(xì)菌分為 和 兩種營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型，而所有的病原菌都是。2．細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)除水以外還有 、 、 和 。3. 菌膜生長(zhǎng)：在液體表面生長(zhǎng)，形成菌膜，如霍亂弧菌。細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象也有三種：1. 均勻混濁：多數(shù)細(xì)菌呈混濁生長(zhǎng)。④鑒別培養(yǎng)基：伊紅－美藍(lán)培養(yǎng)基。②增菌培養(yǎng)基：如血瓊脂平板。2. 合成性代謝產(chǎn)物及其意義：細(xì)菌在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中除能合成菌體自身結(jié)構(gòu)成分之外，還能合成：①與致病有關(guān)的毒素、侵襲性酶類(lèi)及熱原質(zhì)；②與鑒別細(xì)菌有關(guān)的色素和細(xì)菌素；③能抑制或殺滅某些其他微生物的抗生素；④可供人體利用的多種維生素，如維生素B、維生素K等。(2) 蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)物檢測(cè)：①吲哚（靛青質(zhì)）試驗(yàn)；②硫化氫試驗(yàn)；③尿素分解試驗(yàn)等。實(shí)驗(yàn)室常用的生化試驗(yàn)有：(1) 碳源利用及糖代謝產(chǎn)物試驗(yàn)：①糖發(fā)酵試驗(yàn)， 最常用來(lái)鑒別大腸埃希菌和腸道致病菌的試驗(yàn)是乳糖發(fā)酵試驗(yàn)。三、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物及其意義1. 分解代謝產(chǎn)物及其意義：細(xì)菌因其具備的酶不完全相同，故在分解過(guò)程中的產(chǎn)物隨菌種不同而有差異。(4) 衰亡期：死菌數(shù)超過(guò)活菌數(shù)，此期為營(yíng)養(yǎng)物耗竭、代謝廢物積聚所致。(3) 穩(wěn)定期：此期營(yíng)養(yǎng)消耗，毒性產(chǎn)物積聚，pH下降導(dǎo)致細(xì)菌繁殖數(shù)與死亡數(shù)接近。(2) 對(duì)數(shù)期：此期細(xì)菌分裂增殖迅速，活菌數(shù)呈對(duì)數(shù)直線上升，一般細(xì)菌可持續(xù) 10h 左右。二、細(xì)菌繁殖的方式與速度1. 細(xì)菌繁殖方式為二分裂，在條件滿(mǎn)足時(shí)，一般細(xì)菌繁殖一代用時(shí)20～30min，但結(jié)核桿菌繁殖一代用時(shí)18～20h。4. 必要的氣體環(huán)境：所需氣體主要是O2和CO2， 根據(jù)細(xì)菌對(duì)O2的需要情況將其分為：①專(zhuān)性需氧菌， 在有氧條件下才能生長(zhǎng)繁殖；②專(zhuān)性厭氧菌，在無(wú)氧條件下才能生長(zhǎng)繁殖；③兼性厭氧菌， 在有氧無(wú)氧條件下均能生長(zhǎng)繁殖；④微需氧菌， 在低氧壓的條件下才能生長(zhǎng)繁殖。一、細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的條件1. 充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)： 包括水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽類(lèi)、生長(zhǎng)因子等。芽胞發(fā)芽時(shí)， 該物質(zhì)由芽胞內(nèi)滲出， 耐熱性亦隨之喪失。 (3) 意義： 經(jīng)革蘭染色可將細(xì)菌分為 G＋菌和 G－菌， 有助于鑒定細(xì)菌， 用來(lái)指導(dǎo)臨床選擇藥物，有助于研究和了解細(xì)菌的致病性等。②染色：初染：結(jié)晶紫染 1mim；媒染：盧戈碘液染 1min； 脫色：95% 乙醇；復(fù)染：稀釋石炭酸復(fù)紅染 1min。細(xì)菌L型的致病性較原菌減弱，但由于失去細(xì)胞壁而對(duì)某些抗生素耐藥及由于抗原性減弱而易逃避宿主的免疫攻擊，因此，易于長(zhǎng)期存留于體內(nèi)，而在條件適宜時(shí)又回復(fù)成原菌株。(4)存在于細(xì)胞壁的抗原性減弱或丟失。(2)細(xì)菌L型需在高滲透壓環(huán)境下才能培養(yǎng)，且增殖緩慢，在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)呈特有的油煎蛋樣菌落。細(xì)菌L型與原菌相比，其生物學(xué)性狀有明顯不同。當(dāng)條件適宜時(shí)，芽胞通過(guò)發(fā)芽方式轉(zhuǎn)化為細(xì)菌繁殖體。芽胞形成后，其母菌細(xì)胞即失去活性。(4) 芽胞：為某些細(xì)菌包括需氧芽胞桿菌屬和厭氧芽胞桿菌屬細(xì)菌在不良環(huán)境下的休眠體。性菌毛為大腸桿菌及其它腸道菌所特有的結(jié)構(gòu)，有