【正文】 ～02；PH調(diào)整后，還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸。滅菌時(shí)人不能離開現(xiàn)場(chǎng)，要嚴(yán)格控制熱源維持滅菌時(shí)的壓力。1）注意事項(xiàng)：滅菌過程中溫度不能上升或下降過急。立即取出滅菌物品，以免凝結(jié)在鍋蓋和器壁上的水滴弄濕包裝紙或被滅菌物品，增加染均的概率。溫度隨蒸汽壓力增高而上升。2）加水：打開滅菌鍋蓋，加水適量（手提式高壓鍋加水到與支架圈平行處）裝料：將帶滅菌物品放于滅菌桶內(nèi)，物品排放注意彼此間留有一定空隙，使蒸汽在容器內(nèi)能夠流通達(dá)到每個(gè)物品的部位，以免形成蒸汽死角。升溫：接通電源，打開開關(guān)，旋轉(zhuǎn)箱頂部的調(diào)氣閥，打開通氣孔，排除箱內(nèi)冷空氣和水汽。含菌吸管的清洗（1）、把含菌吸管投入3%的來蘇爾液內(nèi)浸泡30min以上殺菌；（2）、用肥皂水洗滌一次；（3）、最后用清水沖洗干凈即可。 (二)、用過的玻璃器皿1 含油脂器材的清洗（1）、單獨(dú)高壓滅菌；（2）、趁熱倒去污物；（3）、倒放在鋪有吸水紙的籃子上，置100 ℃。（6）、當(dāng)壓力表指針降到零、鍋內(nèi)蒸氣完全排盡時(shí)，立即打開鍋蓋取出物品。（2）、將要滅菌的物品用牛皮紙蓋好后放入滅菌鍋中，關(guān)上器蓋。(3)關(guān)緊箱門，打開排氣孔接上電源。7）、學(xué)期開始做無菌試驗(yàn)一次，以保證凈化臺(tái)正常使用。2 在微生物實(shí)驗(yàn)室中如何配置水浴鍋, 使用中要注意哪些問題?使用注意事項(xiàng)：（1）37 ℃和42 ℃水浴鍋24小時(shí)工作。(2)內(nèi)放一杯水，以保持濕度。(3)培養(yǎng)物不能放在最底層，也不得放置過于擁擠。（2）其余水渦鍋用后關(guān)掉電源；（3）水浴鍋內(nèi)應(yīng)注加蒸餾水而非自來水，使用時(shí)請(qǐng)注意水位。平時(shí)可根據(jù)情況，定期做無菌試驗(yàn)，以測(cè)定凈化臺(tái)是否符合無菌要求。(4)待箱內(nèi)空氣排出到一定程度時(shí)，關(guān)閉上排氣孔，繼續(xù)加熱至一定溫度后，調(diào)節(jié)溫度控制旋鈕固定溫度，在160℃—165℃保持2小時(shí)即可。（3）、通電加溫，同時(shí)打開排氣活門，排盡鍋內(nèi)的空氣，再關(guān)閉活門。（7）、最后將高壓滅菌器內(nèi)的剩余水排出。（4）、再用5%的碳酸氫鈉水煮兩次，再用肥皂水刷洗干凈。載玻片及蓋玻片的清洗（1）將載玻片及蓋玻片分別浸入5 %的來蘇爾液內(nèi)浸泡過夜，取出水洗干凈；（2）蓋片用軟布擦干即可；（3）染色用的載玻片要放入肥皂水中煮沸10min，再用肥皂水刷洗干凈，最后用95%的酒精浸泡片刻，晾干備用。升溫，待箱內(nèi)溫度達(dá)到80℃時(shí)，關(guān)閉通氣孔，打開鼓風(fēng)機(jī)，使箱內(nèi)溫度均勻。物品不要緊靠桶壁，防止冷凝水進(jìn)入滅菌物品。待壓力逐漸上升至所需溫度時(shí)，控制熱源，維持所需壓力和溫度，并開始計(jì)時(shí)。斜面培養(yǎng)基自鍋內(nèi)取出后要趁熱擺放，滅菌后的空培養(yǎng)皿、試管等要烘干或晾干。溫度達(dá)到60℃以上時(shí)，不能隨意打開干燥箱門。壓力過高不僅培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分被破壞，而且高壓鍋超過耐壓范圍易發(fā)生爆炸造成傷人事故。 如何選擇培養(yǎng)基的滅菌條件？ （1）含糖類或明膠的培養(yǎng)基： 113℃滅菌15分鐘或115℃滅菌10分鐘。如何進(jìn)行培養(yǎng)基的保存（1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基不能超過兩周（2）生化試驗(yàn)培養(yǎng)基不宜超過一周，（3）選擇性或鑒別性培養(yǎng)最好當(dāng)天使用，傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過3天。（2）使用前開啟紫外燈照射30分鐘以上。實(shí)驗(yàn)操作過程的無菌操作要求包括哪些內(nèi)容（1）、在操作中不應(yīng)有大幅度或快速的動(dòng)作；（2）、使用玻璃器皿應(yīng)輕取輕放。 1. 志賀氏菌都能分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，大多不發(fā)酵乳糖，不產(chǎn)生H2S。做生化試驗(yàn)要注意哪些事項(xiàng)？1）、待檢菌應(yīng)是新鮮培養(yǎng)物。觀察結(jié)果的時(shí)間，多為24或48小時(shí)。試驗(yàn)方法：用接種針或環(huán)移取純培養(yǎng)物少許，接種于糖發(fā)酵管中，若為半固體培養(yǎng)基，則用接種針作穿刺接種。試驗(yàn)方法：挑取新鮮的待試培養(yǎng)物少許，接種于磷酸鹽葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基，于36177。吲哚與對(duì)二甲氨基苯甲醛結(jié)合，可形成紅色化合物，即玫瑰吲哚，以此鑒別細(xì)菌。兩液接觸處呈現(xiàn)玫瑰紅色者，為陽性反應(yīng)，無紅色者為陰性反應(yīng)。結(jié)果觀察與記錄: 培養(yǎng)基底部呈黑色，為陽性，記+培養(yǎng)基底部無黑色，為陰性，記簡(jiǎn)述尿素酶（Urease）試驗(yàn)的原理，寫出驗(yàn)方法、結(jié)果的記錄原理：某些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶，將尿素分解產(chǎn)生氨，氨使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，使培養(yǎng)基中的酚紅指示劑呈粉紅色，培養(yǎng)基由黃色變?yōu)榧t色，為陽性。如陰性應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)至4天，作最終判定。陽性反應(yīng)試驗(yàn)管顏色變化過程: 紫色→黃色→紫色原理：對(duì)照管呈黃色，說明有細(xì)菌生長(zhǎng)。結(jié)果觀察與記錄：? 對(duì)照管有菌生長(zhǎng)，試驗(yàn)管有菌生長(zhǎng)為陽性，記+。（2） β （乙型）溶血: 菌落周圍出現(xiàn)較寬的透明溶血環(huán)。陽性反應(yīng)具有致病性。1簡(jiǎn)述三糖鐵（TSI）試驗(yàn)的試驗(yàn)的原理 如果細(xì)菌可利用乳糖和蔗糖發(fā)酵產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣，培養(yǎng)基全部變黃；如果只可以利用葡萄糖，葡萄糖被分解產(chǎn)酸可使斜面先變黃，但因量少，生成的少量酸，因接觸空氣而氧化，加之細(xì)菌利用培養(yǎng)基中含氮物質(zhì)，生成堿性產(chǎn)物，故使斜面最后為紅色，底部由于是在厭氧狀態(tài)下，酸類不被氧化，仍保持黃色?？贵w:是指機(jī)體內(nèi)的淋巴系統(tǒng)細(xì)胞在抗原物質(zhì)的激發(fā)下，所合成的一種具有特異性免疫功能的球蛋白(免疫球蛋白)。原理:用已知抗體作為診斷血清，來檢測(cè)未知抗原,以鑒定相應(yīng)的抗原。診斷血清、抗O血清、抗H血清、多價(jià)診斷血清、單價(jià)診斷血清、因子診斷血清的概念 ? 診斷血清：將已知的抗原注射于動(dòng)物體，使其產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，采出動(dòng)物的血液，分離出含有大量抗體的血清，稱為診斷血清（或抗血清、免疫血清）? 抗O血清：用菌體抗原（O抗原）免疫動(dòng)物后所獲得的血清。? 因子診斷血清：把含有多種抗體的混合免疫血清，用具有共同抗原成分的有關(guān)細(xì)菌將其共同抗體吸收，只留下一種或幾種所需的特異性抗體的血清。4）做好無菌室或超凈工作臺(tái)的滅菌工作，提前1h滅菌30~60min.5）工作衣、鞋、帽、等滅菌后備用。3）、采樣操作要防止污染，防止變質(zhì)、損壞、丟失。在微生物檢驗(yàn)中，如何進(jìn)行樣品的保留？（1）陰性樣品：在發(fā)出報(bào)告可及時(shí)處理；（2）陽性樣品：在發(fā)出報(bào)告以后3天才能處理樣品；（3）進(jìn)口食品的陽性樣品：要保留6個(gè)月才能處理。3）、了解細(xì)菌在食品中的繁殖動(dòng)態(tài)。在菌落總數(shù)的檢驗(yàn)中，要注意哪些事項(xiàng)？1）、對(duì)照平板出現(xiàn)幾個(gè)菌落時(shí)，要追加對(duì)照平板；2）、吸管進(jìn)出瓶子或試管時(shí)，吸管口不得觸及瓶口、管口的外圍部分；3）、,調(diào)整時(shí)要使管尖與容器內(nèi)壁緊貼。在菌落總數(shù)的檢驗(yàn)中，如何根據(jù)樣品的特性選擇培養(yǎng)溫度和時(shí)間？普通食品:37 ℃ 48h 倒放平板清涼飲料、調(diào)味品、糕點(diǎn)、酒類： 37 ℃ 24h 水產(chǎn)品: 30℃ 48h什么是大腸菌群？大腸菌群由哪些微生物組成？指一群需氧及兼性厭氧，在37℃能分解乳糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣的革蘭氏染色陰性無芽胞桿菌。（3）、有利于控制食品在生產(chǎn)加工、運(yùn)輸、保存等過程中的衛(wèi)生狀況。2）、對(duì)產(chǎn)酸但未看到氣泡的乳糖發(fā)酵，用手輕打動(dòng)試管，如有氣泡沿管壁上浮，應(yīng)考慮可能有氣體產(chǎn)生，應(yīng)作進(jìn)一步試驗(yàn)。2)、地面水源水：江湖河，水庫，水池等。4)、運(yùn)送：2小時(shí)內(nèi)送到檢驗(yàn)室。（2）、腸道致病菌一般不分解乳糖，而非致病菌多能分解乳糖、葡萄糖產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣。 二）、培養(yǎng)特性：1）、需氧或兼性厭氧，最適溫度37℃，~。沙門氏菌有哪些抗原？各有何特點(diǎn)？O、H抗原如何表示，A—F群沙門氏菌中，代表每群O特異性抗原的獨(dú)特因子是什么？ 抗原結(jié)構(gòu)：A、O抗原 B、H抗原 C、表面抗原（K抗原） D、菌毛抗原O抗原的表示