食品微生物檢驗(yàn)技術(shù)筆記-wenkub
2023-04-22 04:07:06 本頁(yè)面
【正文】 抽取，注入無(wú)菌盛樣容器。在食品的檢驗(yàn)中，所采集的樣品必須具有代表性，即所取樣品能夠代表食物的所有部分。采樣必須符合無(wú)菌操作的要求，防止一切外來(lái)污染一件用具只能用于一個(gè)樣品，防止交叉污染。食品污染大腸桿菌的數(shù)目是采 用相當(dāng)于100g或100ml食品中的近似值來(lái)表示，稱大腸菌群近似值(Maximun Probable N umber,MPN)。 菌落總數(shù)測(cè)定的衛(wèi)生學(xué)意義：食品本身的新鮮程度加工、貯存運(yùn)輸過(guò)程中是否受到污染——衛(wèi)生質(zhì)量衛(wèi)生學(xué)指標(biāo)：必須配合大腸菌群的檢驗(yàn)和其他病原菌項(xiàng)目的檢驗(yàn)，才能作出比較全面準(zhǔn)確的評(píng)定大腸菌群是指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌。）食品中菌落總數(shù)檢驗(yàn)的意義:判定食品被細(xì)菌污染的程度及衛(wèi)生質(zhì)量。 食品成品的檢驗(yàn)：要的是對(duì)出廠食品、可疑食品及食物中毒食品的檢驗(yàn)。食品微生物檢驗(yàn)是食品質(zhì)量監(jiān)測(cè)的重要組成部分。食品微生物檢驗(yàn)的意義是衡量食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo)，也是判定被檢食品能否食用的科學(xué)依據(jù)。可以判斷食品加工環(huán)境及食品衛(wèi)生的情況，為衛(wèi)生管理工作提供科學(xué)依據(jù).。食品微生物檢驗(yàn)的范圍生產(chǎn)環(huán)境的檢驗(yàn) ：車間用水、空氣、地面、墻壁等中的微生物檢驗(yàn)。菌落總數(shù)的概念：食品檢樣經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下（如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間等）培養(yǎng)后，所得每mL(g)檢樣中形成的微生物菌落總數(shù)。預(yù)測(cè)食品耐存放的程度和期限。大腸菌群不是細(xì)菌學(xué)上的分類命名，而是根據(jù)衛(wèi)生學(xué)方面的要求，提出的與糞便污染有關(guān)的細(xì)菌，即作為食品、水體等是否受過(guò)人畜糞便污染的指示菌。食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，任何食品中均不得檢出致病菌。再保存和運(yùn)送過(guò)程中應(yīng)保證樣品中微生物的狀態(tài)不發(fā)生變化采集的非冷凍食品一般在0—5度冷藏，不能冷藏的食品立即檢驗(yàn)。如果采集的樣品沒(méi)有代表性，即使一系列檢驗(yàn)工作非常精密、準(zhǔn)確，其結(jié)果也毫無(wú)價(jià)值，甚至?xí)霈F(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)論。半固體食品的采樣 用無(wú)菌操作拆開(kāi)樣品包裝，用無(wú)菌勺子從幾個(gè)部位挖取樣品，注入無(wú)菌盛樣容器。 固體樣品和冷凍食品取樣還應(yīng)注意檢驗(yàn)?zāi)康?，若需檢驗(yàn)食品污染情況，可取表層樣品；若需檢驗(yàn)其品質(zhì)情況，應(yīng)再取深部樣品。（６、食物中毒微生物檢驗(yàn)的取樣當(dāng)懷疑發(fā)生食物中毒時(shí)，應(yīng)及時(shí)收集可以中毒源食品或餐具等，同時(shí)收集病人的嘔吐物、糞便或血液等７、人畜共患病原微生物檢驗(yàn)的取樣當(dāng)懷疑某一動(dòng)物產(chǎn)品可能帶來(lái)人畜共患病病原體時(shí)，應(yīng)結(jié)合畜禽傳染病學(xué)的基礎(chǔ)知識(shí)，采取病原體最集中、最易檢出的組織或體液送檢驗(yàn)室檢驗(yàn)。要注意防污染、防散漏、防變質(zhì)。C 是樣品檢測(cè)值超過(guò)指標(biāo)值m的最大可接受抽樣單位數(shù)，如果超過(guò)該值，則拒絕接受該批產(chǎn)品。檢查檢樣是否有超過(guò)m值的，來(lái)判定該批是否合格。若計(jì)數(shù)大于m，小于M ，則處于可接受的臨界處。例如，檢測(cè)大腸菌群的抽樣方案可以是： n=5, c=2，m=10， M=100意味著有5個(gè)樣品中有2個(gè)樣品的大腸菌群含量在10100之間是可接受的。2）計(jì)數(shù)菌落時(shí)，選取菌落數(shù)在30CFU300CFU之間無(wú)蔓延生長(zhǎng)的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。 (2)若有兩個(gè)稀釋度，其生長(zhǎng)的菌落數(shù)均在30－300 CFU之間， 按公式計(jì)算。(6)若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30—300之間，其中一部分大于300或小于30時(shí)，則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之，如表5－6中例7，報(bào)告為：30510=104。若空白對(duì)照上有菌落生長(zhǎng)，則此次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。必須做空白對(duì)照：監(jiān)測(cè)培養(yǎng)基、平皿、稀釋液的無(wú)菌程度。1℃/48h177。樣品稀釋液有時(shí)會(huì)帶有細(xì)碎的食物顆粒（如奶粉、堅(jiān)果），為避免這些顆粒與菌落發(fā)生混淆，可將樣品稀釋液與PCA混合，單做培養(yǎng)，置于4℃放置同樣時(shí)間，以便在計(jì)數(shù)時(shí)作為對(duì)照。 在測(cè)定菌落總數(shù)時(shí)，如何選擇菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)？ 在菌落總數(shù)的檢驗(yàn)中，要注意哪些事項(xiàng)？ 在菌落總數(shù)的檢驗(yàn)中，如何根據(jù)樣品的特性選擇培養(yǎng)溫度和時(shí)間？ 大腸菌群的定義：一群在一定培養(yǎng)條件下能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌。大腸菌群的生物學(xué)特性：形態(tài)與染色：革蘭氏染色陰性，無(wú)芽胞桿菌。乳糖是雙糖，細(xì)菌分解雙糖的酶大多是胞外酶。這種方法，對(duì)樣品進(jìn)行連續(xù)系列稀釋，加入培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，從規(guī)定的反應(yīng)呈陽(yáng)性管數(shù)的出現(xiàn)率，用概率論來(lái)推算樣品中菌數(shù)最近似的數(shù)值。 證實(shí)試驗(yàn)從VRBA 平板上挑取10 個(gè)不同類型的典型和可疑菌落，分別移種于BGLB 肉湯管內(nèi)，36 ℃177。例：104樣品稀釋液1 mL，在VRBA平板上有100個(gè)典型和可疑菌落，挑取其中10個(gè)接種BGLB肉湯管，證實(shí)有6個(gè)陽(yáng)性管，則該樣品的大腸菌群數(shù)為：1006/10104/g（mL）=105CFU/g（mL）。1℃培養(yǎng)48h。1℃培養(yǎng)20～24h。對(duì)可疑結(jié)果，應(yīng)進(jìn)行革蘭氏染色、鏡檢和其他輔助試驗(yàn){如耐熱核酸酶試驗(yàn)〔見(jiàn)附錄C（補(bǔ)充件）〕等}加以證實(shí)。4：確認(rèn)葡萄球菌為金黃色葡萄球菌的依據(jù)至少應(yīng)包括哪幾個(gè)試驗(yàn)？5：金黃色葡萄球菌的形態(tài)與
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