微生物學(xué)實驗教學(xué)大綱-wenkub
2023-04-19 23:23:40 本頁面
【正文】 B 帶菌的器皿：2%%，然后洗滌。接種環(huán)常裝于鋁質(zhì)的握柄上，用壞后可隨時更換。1德漢氏小管觀察細(xì)菌在糖發(fā)酵培養(yǎng)基內(nèi)產(chǎn)氣情況時，一般在小試管內(nèi)再套一倒置的小套管（約6mm36mm），此小管即為德漢氏小管，又稱發(fā)酵小套管。在培養(yǎng)皿內(nèi)倒入適量固體培養(yǎng)基制成平板，可用于分離、純化、鑒定菌種、活菌計數(shù)以及測定抗生素、噬菌體的效價等。1下口瓶分為有龍頭和無龍頭兩種。1染色缸有方形和圓形兩種，方形的較大，可放10張載玻片，圓形的較小，可放5張載玻片，供細(xì)菌、血液及組織切片的標(biāo)本染色用。移液管上刻有標(biāo)線，在標(biāo)明的溫度下，當(dāng)吸取溶液至彎月面與標(biāo)線相切后，讓溶液自然放出，此時所放出溶液的體積即等于管上所標(biāo)的體積。燒杯 用來配制培養(yǎng)基與各種溶液等。燒瓶 通常具有圓肚細(xì)頸的外觀，因瓶口很窄，不適用玻璃棒攪拌，若需要攪拌時，可以手握瓶口輕微轉(zhuǎn)動手腕即可順利攪拌混勻。常用量筒的規(guī)格有5ml、10ml、25ml、50ml、100ml、250ml等。實驗內(nèi)容一、器皿的種類、要求與應(yīng)用：試管大試管(約18mm180mm) :可裝倒平板用的培養(yǎng)基；可作制備斜面用；裝液體培養(yǎng)基用于微生物的振蕩培養(yǎng) 中試管[(13～15)mm(100～150)mm]: 裝液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌或做斜面用；用于細(xì)菌、霉菌、病毒等的稀釋和血清學(xué)試驗。2. 本實驗課內(nèi)容包括驗證性實驗、綜合性實驗兩個部分。提高學(xué)生分析問題和解決問題的能力。根據(jù)本學(xué)科的特點，逐步使學(xué)生認(rèn)識微生物的基本特性，比較它們與其它生物的相似和不同之處，知道如何研究微生物以及對研究中所出現(xiàn)的問題點樣分析，并加以解決。驗證性實驗主要通過光學(xué)顯微鏡鏡檢觀察方法進(jìn)行教學(xué)，綜合實驗在教師指導(dǎo)下學(xué)生根據(jù)所掌握的理論基礎(chǔ)和實驗技能，由學(xué)生自己動手完成。小試管[(10～12)mm100mm]:一般用于糖發(fā)酵或血清學(xué)試驗，和其它需要節(jié)省材料的試驗。三角瓶用來裝無菌水、培養(yǎng)基和振蕩培養(yǎng)微生物等。燒瓶隨其外觀的不同分為圓底燒瓶和平底燒瓶兩種，通常平底燒瓶用在室溫下的反應(yīng)，而圓底燒瓶則用在較高溫的反應(yīng)，這是因為圓底燒瓶的玻璃厚薄較均勻，可承受較大的溫度變化。離心管、10ml、15ml、20ml等規(guī)格，其上有刻度，專供離心機使用。常用的移液管有1mL、2mL、5mL、1OmL等。1漏斗 分短頸和長頸式兩種。容量有2500mL、5000mL兩種規(guī)格。1載玻片及蓋玻片 載玻片主要用于微生物涂片、染色，做形態(tài)觀察等。1雙層瓶由內(nèi)外兩個玻璃瓶組成，內(nèi)層小錐形瓶放香柏油，供油鏡觀察微生物時使用，外層瓶放二甲苯，用以擦凈油鏡頭。二、玻璃器皿的洗滌方法新玻璃器皿的洗滌 在2%的鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時，用自來水沖洗干凈。C 帶病原菌培養(yǎng)物的器皿：先高壓蒸汽滅菌，倒去培養(yǎng)物。C 吸過含有微生物培養(yǎng)物的吸管：2%%新潔爾滅消毒液中浸泡24小時然后洗。 三、各種器皿的包扎培養(yǎng)皿的包扎：培養(yǎng)皿常用舊報紙緊緊包裹（也可用金屬筒包裝），一包7～10套，包好后干熱或濕熱滅菌。試管較多時，一般7個或10個一組，再用雙層報紙包扎。（由教師示范）實驗材料和用品 以上所有器皿。因此，可通過平板培養(yǎng)來檢查環(huán)境中細(xì)菌的數(shù)量和類型。實驗原理油鏡工作原理：增加照明亮度；顯微鏡的分辨力：指顯微鏡能夠辨別兩點之間最小距離的能力。（四）實驗四 細(xì)菌的簡單染色與顯微觀察目的要求學(xué)習(xí)微生物涂片、染色的基本技術(shù)，掌握細(xì)菌的簡單染色法；初步認(rèn)識細(xì)菌的個體形態(tài)、菌落形態(tài)特征；鞏固顯微鏡(油鏡)的使用方法和無菌操作技術(shù)。染色后的細(xì)菌細(xì)胞與背景形成鮮明的對比，在顯微鏡下更易于識別。實驗材料和用品材料：大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、環(huán)境微生物檢測平板；用品：學(xué)生顯微鏡、酒精燈、載玻片、接種環(huán)、雙層瓶(內(nèi)裝香柏油和乙醚——酒精擦拭液)、擦鏡紙；呂氏堿性美藍(lán)染液(或草酸銨結(jié)晶紫染液)。G－菌的細(xì)胞壁中含有較多易被乙醇溶解的類脂質(zhì)，而且肽聚糖層較薄、交聯(lián)度低，故用乙醇或丙酮脫色時溶解了類脂質(zhì)，增加了細(xì)胞壁的通透性，使初染的結(jié)晶紫和碘的復(fù)合物易于滲出，結(jié)果細(xì)菌就被脫色，再經(jīng)番紅復(fù)染后就成紅色。（六）實驗六 細(xì)菌的芽孢染色法目的要求學(xué)習(xí)并掌握芽孢染色法。進(jìn)入菌體的染料可經(jīng)水洗脫色，而進(jìn)入芽孢的染料則難以透出，若再利用復(fù)染液進(jìn)行復(fù)染，此時菌體就被染成紅色，而芽孢難以著色，仍呈綠色。 復(fù)染：用番紅液復(fù)染1～2分鐘，水洗，氣干。實驗原理鞭毛是細(xì)菌的運動“器官”，細(xì)菌是否具有鞭毛，以及鞭毛著生的位置和數(shù)目是細(xì)菌的一項重要形態(tài)特征。實驗材料和用品材料：變形桿菌；用品：學(xué)生顯微鏡、酒精燈、載玻片、接種環(huán)、雙層瓶(內(nèi)裝香柏油和乙醚——酒精擦拭液)、擦鏡紙；鞭毛染色液(鞭毛染色液A、鞭毛染色液B)。美藍(lán)是一種無毒性的染料，它的氧化型呈藍(lán)色，還原型無色。（九）實驗九 霉菌的形態(tài)觀察目的要求學(xué)習(xí)并掌握觀察霉菌形態(tài)的基本方法；初步了解霉菌的形態(tài)特征。實驗內(nèi)容霉菌的觀察（試管直接觀察法）。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無機鹽、生長因素和水。基礎(chǔ)培養(yǎng)基含有牛肉膏，蛋白胨和NaCl。干熱滅菌是利用高溫使微生物細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。實驗原理從混雜的微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物的分離與純化。分離純化常用的方法有：簡易單細(xì)胞挑取法它需要特制的顯微操縱器或其他顯微技術(shù)，因而其使用受到限制。實驗內(nèi)容土樣樣品的采集；倒平板；平板涂布法；制備土壤稀釋液；稀釋傾注法。實驗原理 微生物的培養(yǎng)特征是指微生物在固體、半固體和液
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