酶的分子修飾backgrou-wenkub
2023-01-21 08:57:28 本頁面
【正文】 144 Interferon (U/mL) Tues Wed Thur Fri Sat Sun Mon Periods of time when IFN is not in circulation 40 kDa branched peginterferon alfa2a (ng/mL) 0 5 10 15 20 25 30 0 24 48 72 96 120 144 168 Time (hours) after injection Tue Wed Thu Fri Sat Sun Mon ?粒細(xì)胞集落刺激因子（ GCSF） 用于治療中性粒細(xì)胞減少癥 美國 Amgen公司研制的 PEG修飾長效 GCSF，是在重組人GCSF的 N端 Met殘基上共價(jià)結(jié)合了 20kD的 PEG，于 2022年1月獲 FDA批準(zhǔn) 酶 半衰期 天然 SOD 6min 右旋糖苷－ SOD 7hr Ficoll（低分子量）－ SOD 14hr Ficoll（高分子量）－ SOD 24hr PEG－ SOD 35hr 天然 SOD與修飾 SOD在血漿中的半衰期 Characterization of the PEGylated proteins. (A) SDS – PAGE characterization of PEGylated human PAH, MOLECULAR THERAPY Vol. 9, No. 1, January 2022， 124－ 129 Lysozyme – Poly(PEGMA)NHS Conjugation + DMSO / NEt3 kDa Lysozyme (reference) Bioconjugate 57 polymeric chains attached Protein Markers 15% Crosslinked Gel SDS PAGE 16 17 18 19 20 21ti m e / m i n l yso zym e P o l y(PE G ) N H SLysozyme – Poly(PEGMA)NHS Conjugation Column: BioSep SECS3000 Flow rate: mL / min Mobile Phase : % TFA (v/v) solution in H20 / MeCN (69/31) UV detection 215 nm 主要用于側(cè)鏈基團(tuán)的修飾 ?羧基的修飾 碳二亞胺 o 三硝基苯磺酸（ TNBS） 與 Lys反應(yīng)在 420nm和 367nm能產(chǎn)生特定的光吸收 o 磷酸吡哆醛（ PLP） Lys的專一性修飾劑， 325nm有最大吸收，可用于定量 ?氨基的修飾 主要對 Lys的 ε –氨基 chemical crosslinking of side chains ?Arg胍基的修飾 丁二酮 、 1,2環(huán)己二酮 、苯乙二醛等具有兩個(gè)臨位羰基的試劑 ?巰基的修飾 主要是烷基化試劑和還原劑 碘乙酸 馬來酰亞胺 對氯汞苯甲酸 DTT 巰基乙醇 Conjugation to cysteine residues ?His咪唑的修飾 焦碳酸二乙酯 ?Trp吲哚基的修飾 Trp一般位于分子內(nèi)部，反應(yīng)性差 N溴代琥珀酰亞胺 4硝基苯硫氯 ?胰凝乳蛋白酶上羧基經(jīng)碳二亞胺活化后 ， 可與一系列二胺作用 。目前采用降低抗體分子的大小制造嵌合抗體 ?大分子的共價(jià)修飾 用可溶性大分子，如聚乙二醇、右旋糖苷、肝素等，通過共價(jià)鍵連接于酶分子的表面，形成一層覆蓋層 ?聚乙二醇修飾超氧物歧化酶 (SOD)， 不僅可以降低或消除酶的抗原性 ， 而且提高了抗蛋白酶的能力 ， 延長了酶在體內(nèi)的半衰期 ， 從而提高了酶藥效 。 所以 ， 用抗體穩(wěn)定酶的方法較普遍 。 C 95176。 ?Taqase 舉例 ANNEALING 37176。 用抗體來穩(wěn)定酶 。 ③ 針對異體反應(yīng) ,降低生物識(shí)別能力 ,降低免疫原性 . ?Low solubility ?Poor stability ?Oral delivery of proteins impossible because they ar
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1