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流式細(xì)胞儀的構(gòu)造、工作原理及數(shù)據(jù)分析-wenkub

2022-12-10 22:30:51 本頁(yè)面
 

【正文】 — 種相干光源,它能提供單波長(zhǎng)、高強(qiáng)度及穩(wěn)定性高的光照,是細(xì)胞微弱熒光快速分析的理想光源。 ?(三 ) 光學(xué)系統(tǒng) 流式細(xì)胞儀的光學(xué)系統(tǒng) ? FCM的光學(xué)系統(tǒng)是由若干組透鏡、濾光片、小孔組成, ? 主要光學(xué)原件是濾光片,主要分成 3類:長(zhǎng)通濾片 (longpass filter, LP)、短通濾片 (shortpass filtr, SP)及帶通濾片(bandpass filter, BP)。 ? 前向角散射光( FSC, Forward Scatter) 細(xì)胞相對(duì)大小及其表面積 ? 側(cè)向角散射( SSC, Side Scatter) ? 細(xì)胞粒度及細(xì)胞內(nèi)相對(duì)復(fù)雜性 ? (1)前向角散射:前向角散射與被測(cè)細(xì)胞的大小有關(guān),確切地說(shuō),它與細(xì)胞直徑的平方值密切相關(guān)。 2.熒光信號(hào) 激光的作用原理 (1)熒光信號(hào)的線性測(cè)量與對(duì)數(shù)測(cè)量 ? 當(dāng)攜帶熒光素的細(xì)胞與激光正交時(shí),受激發(fā)發(fā)出熒光,經(jīng)過(guò)濾光片分離不同波長(zhǎng)的光信號(hào)分別到達(dá)不同的光電倍增管(PMT), PMT將光信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào)。如用線性放大器,將無(wú)法在一張圖上清晰地將細(xì)胞陽(yáng)性群、陰性群同時(shí)顯示出來(lái)通常使用對(duì)數(shù)放大器,如果原來(lái)輸出是 1,當(dāng)輸入增大到原來(lái)的 10倍時(shí),輸出為 2;當(dāng)輸入增大到原來(lái)的100倍時(shí),輸出為 3等。 ?(五 ) FCM測(cè)量數(shù)據(jù)的的 存儲(chǔ)、顯示和分析 流式細(xì)胞儀數(shù)據(jù)分析 ? 數(shù)據(jù)存儲(chǔ) : LIST MODE ? 數(shù)據(jù)顯示 : 直方圖 ( Histogram ) 二維點(diǎn)圖 (Dot Plot) 等高線圖 (Contour Plot) 密度圖 (Density) 三維圖( 3D Plot)等 F SC SSC F
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