20xx年醫(yī)學(xué)專題—流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry-fcm)描述-wenkub
2024-11-15 05 本頁面
【正文】 224。,流式應(yīng)用常見(ch225。ng)于：多參數(shù)分析,第十三頁，共八十一頁。,流式常見(ch225。,流式常見(ch225。nɡ ji224。j249。ngyu225。,熒光(y237。zhōng)： FSC：反映細(xì)胞的大小 SSC：反映細(xì)胞內(nèi)顆粒性,第五頁，共八十一頁。nshū) 標(biāo)本的制備和染色 儀器的校準(zhǔn)和質(zhì)控 流式細(xì)胞儀數(shù)據(jù)獲取與儲(chǔ)存,第四頁，共八十一頁。 ? 存儲(chǔ)、顯示、分析系統(tǒng)：計(jì)算機(jī)。g242。 流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry):利用流式細(xì)胞儀對(duì)處于快速流動(dòng)的細(xì)胞或生物顆粒(kēl236。流式細(xì)胞術(shù) （Flow Cytometry,FCM),作者(zu242。)進(jìn)行多參數(shù)、快速（每秒可達(dá)100010000個(gè)）的定量分析和分選（純度可達(dá)99%以上）的技術(shù)。u),? 激光光源及光束形成系統(tǒng) ? 流動(dòng)室及液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng) ? 光學(xué)系統(tǒng)：透鏡、濾光片、小孔，聚焦光源， 收集不同波長的熒光信號(hào)。 ? 細(xì)胞分選系統(tǒng),第三頁，共八十一頁。,FCM的主要測(cè)定(c232。,FCM標(biāo)記(biāoj236。ngguāng)素種類,FITC(異硫氰酸熒光(y237。n) FITC最便宜，適用于強(qiáng)表達(dá)抗原，適用范圍廣 biotinavidin不適合 弱抗原的檢測(cè),抗體(k224。)顯示方式,單參數(shù)(cānsh249。n)圖形 (Histogram Plot),第十頁，共八十一頁。nɡ ji224。nɡ ji224。,第二節(jié) 流式細(xì)胞術(shù)的科研(kē y225。nɡ ji224。ngtǐ)標(biāo)記的方法,第十六頁，共八十一頁。,實(shí)驗(yàn)對(duì)照(du236。ng)對(duì)照的比較：,第十九頁，共八十一頁。)：抗原抗體反應(yīng) 非特異結(jié)合的去除：洗滌和封閉 封閉：血清和同型抗體,第二十頁，共八十一頁。nɡ) 細(xì)胞內(nèi)分子檢測(cè),第二十一頁，共八十一頁。,細(xì)胞周期,G1,M,G2,S,Quiescent cells,G0,第二十三頁，共八十一頁。nf,流式“TUNEL”,第二十八頁，共八十一頁。,第三十二頁，共八十一頁。,CBA(Cytometric Bead Array),第三十五頁，共八十一頁。n chu225。o xu232。,流式細(xì)胞的免疫(miǎny236。 Minimal residual diseases (MRD),第四十頁，共八十一頁。 其他(q237。d236。M期為有絲分裂期，在此期一個(gè)細(xì)胞分裂為2個(gè)細(xì)胞。nr249。因此，F(xiàn)CM分析一個(gè)群體細(xì)胞峰DNA倍體與細(xì)胞周 期時(shí)，將DNA含量直方圖分為三部分，即G0/G1,S,G2/M期三個(gè)細(xì)胞峰。h233。,第四十三頁，共八十一頁。 DNA指數(shù)=測(cè)量樣本G0/G1期DNA含量/正常人淋巴細(xì)胞G0/G1期DNA含量 以正常人淋巴細(xì)胞作為對(duì)照。,第四十五頁，共八十一頁。nɡ)檢測(cè),1）FCMDNA檢測(cè)（DNA亞G1峰的檢測(cè)）：利用PI染色(rǎns232。 可參看文章： http://www.biox.cn/content/cell/20040914791.htm http://www.biox.cn/content/cell/20040914792.htm,第四十八頁，共八十一頁。,第五十頁，共八十一頁。如CD3+（總T細(xì)胞）；CD19+（總B細(xì)胞），CD3/（CD16+5（NK細(xì)胞）。胞內(nèi)細(xì)胞因子的檢測(cè)：CD4+/IL4+，Th1細(xì)胞，CD4+/IFNγ+。,第五十二頁，共八十一頁?，F(xiàn)在多應(yīng)用(y236。主要用于干細(xì)胞移植(y237。而血小板減少的患者，如果出現(xiàn)網(wǎng)織血小板增多，則說明血小板減少的原因?yàn)檠“迤茐倪^多所致。,第五十六頁，共八十一頁。) 6）白細(xì)胞分類計(jì)數(shù),第五十八頁，共八十一頁。)，而檢測(cè)溶液中是否存在該種因子 HLAB27的檢測(cè)：用于診斷強(qiáng)直性脊柱炎。被測(cè)細(xì)胞的任何參數(shù)均可作為分選的依據(jù)。iyǎng)、原位雜交、分子生物學(xué)研究等。n bā)2025%: T: 70%, B: 20%,
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