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流式細(xì)胞儀的構(gòu)造、工作原理及數(shù)據(jù)分析-wenkub.com

2024-11-22 22:30 本頁面
   

【正文】 從雙參數(shù)圖形中可以將各細(xì)胞亞群區(qū)分開,同時(shí)可獲得細(xì)胞相關(guān)的重要信息。 ? 熒光信號(hào)的寬度 (如 FL2- W)常用來區(qū)分雙聯(lián)體細(xì)胞 (3)光譜重疊的校正 ? 使用熒光補(bǔ)償電路 ? 合理設(shè)置熒光信號(hào)的補(bǔ)償值。 ? 在細(xì)胞膜表面抗原等的檢測(cè)時(shí),細(xì)胞膜表面抗原的分布有時(shí)要相差幾十倍,甚至幾萬倍。 方向的散射光信號(hào),側(cè)向散射光對(duì)細(xì)胞膜、胞質(zhì)、核膜的折射率更為敏感,可提供有關(guān)細(xì)胞內(nèi)精細(xì)結(jié)構(gòu)和顆粒性質(zhì)的信息。以上兩種信號(hào)都是來自激光的原光束,其波長(zhǎng)與激光的波長(zhǎng)相同。這種橢圓形光斑激光能量分布屬正態(tài)分布,為保證樣品中細(xì)胞受到的光照強(qiáng)度一致,須將樣本流與激光束正交,且相交于激光能量分布峰值處。 流式細(xì)胞儀的流動(dòng)室和液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng) ?(二 )激光光源與光束形成系統(tǒng) ? 目前臺(tái)式機(jī) FCM,大多采用氬離子氣體激光器。 流式細(xì)胞儀的特點(diǎn) ? 單個(gè)細(xì)胞或微粒分析 ? 同時(shí)多參數(shù)分析 ? 速度快: 10000個(gè)細(xì)胞 (微粒 )/秒 ? 統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:提供細(xì)胞群體的均值和分布情況 ? 分選感興趣的細(xì)胞或微粒 ? 其結(jié)構(gòu)一般分為 5部分:流動(dòng)室及液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng);激光光源及光束形成系統(tǒng);光學(xué)系統(tǒng);信號(hào)檢測(cè)、存儲(chǔ)、顯示分析系統(tǒng);細(xì)胞分選系統(tǒng)。流式細(xì)胞儀的構(gòu)造、工作原理及數(shù)據(jù)分析 東北師范大學(xué)生物基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心 巴雪青 ? 流式細(xì)胞術(shù)( flow cytometery, FCM)是 20世紀(jì) 70年代發(fā)展起來的一種 可以快速、準(zhǔn)確、客觀,可同時(shí)檢測(cè)單個(gè)微粒(通常是細(xì)胞)的多項(xiàng)特性,并加以定量的技術(shù),并且可以對(duì)特定群體加以分選。 (一)流動(dòng)室與液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng) ? 流動(dòng)室是儀器核心部件,被測(cè)樣品在此與激光相交。激光 (laser)是
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